The production of oilgosaccharides using Penicillium citrium cells at high sugar concentrations was investigated at 50$\^{C}$ and pH 5.0. Both 1-kestose and neokestose were produced form sucrose, while both nystose and tetrasaccharide were produced from 1-kestose. However, no reaction product was obatined from neogructo-oligosaccharides such as neokestos. Based on these experimental rsults, a hypothetical reaction route was proposed to illustrate how neofructor-oilgosaccharids are formed from 1-kestose.
An agarase was partially purified from the culture broth of marine bacterium Bacillus cereus ASK202. Optimal pH and temperature of this agarase were found to be 7.0 and 40$^{\circ}C$, respectively. The maximum productivity of agarooligosaccharides was obtained from 0.3 %(w/v) agar by using of 1 unit agarase. As the results of TLC and HPLC analysis, these oilgosaccharides consisted of neoagarobiose, neoagarotetraose and neoagarohexaose. Under the optimal reaction conditions, 77.5 %(w/v) neoagarobiose and 6.2 %(w/v) neoagarotetraose were produced from agar and the conversion yield of total agarooligosaccharides was 83.7 %(w/v) after for 2 h reaction at 40$^{\circ}C$.
Phytase of rat intestine had a large amount of oilgosacchanrides ; The enzyme consisted of two different subunits with the molecular weights of 90 KDa and 70 KDa in its intack form, whereas the apparent molecular weights tumed to 72 KDa and 52 KDa, respectively, after deglycosylation. The treatment with glycopeptidase F reduced the molecular weights from 90 KDa and 70 KDa to 83 KDa and 52 KDa, respectively, While endoglycosidase H caused no change in their molecular weights. These results indicate that the 70KDa subunit contains only the N-linked oilgosaccharide chains, while the 90KDa subunit ocntains O-linked oilgosaccharides as well as N-linked ones. Enzyme-linked lectin assays suggeted that bisecting N-acetyl-D-glucosamine and galactose 1-4 N-acetyl-D-glucosamine structures were present and that fucose was included in these oilgosaccharide moieties. Sialic acid was not found in either subunit.
A bacterial strain LC-413, producing extracellular inulin fructotransferase which converts inulin into di-D-fructofuranose dianhydride(DFAIII) and amount of oilgosaccharides, was isolated from soil and pre-sumed as Flavobacteium sp. LC-413. The enzyme production was induced by inulin as carbon source and enhanced by the addition of 0.3% malt extract and 0.2% {TEX}$NaNO_{3}${/TEX} as nitrogen source. The enzyme activity in the culture supernatant reached at the maximum, 78.6units/ml, after 11 hours of cultivation in the medium composition of 1.5% inulin, 0.2% {TEX}$NaNO_{3}${/TEX}, 0.05% {TEX}$K_{2}${/TEX}{TEX}$HPO_{4}${/TEX}, 0.05% {TEX}$MgSO_{4}${/TEX}.7{TEX}$H_{2}${/TEX}O, 0.05% KCI, a trace amount of {TEX}$FeSO_{4}${/TEX}.7{TEX}$H_{2}${/TEX}O, and 0.3% malt ext. at 3$0^{\circ}C$. The oilgosaccharide produced by enzyme reaction from inulin was identified as DFA III by and {TEX}${13}^C${/TEX}-NMR spectrosocpy.
Bean cooking water was used as a raw material for the production of soy-oligosaccharides. To maximize the yield of the physiologically functional oligosaccharides such as raffinose and stachyose, a fermentation process was introduced to reduce sucrose content. Yeast strains utilizing sucrose, but scarcely affecting the raffinose and stachyose for the growth were initially selected to reduce the sucrose content in the bean cooking water. The selected strains were Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763, S. cerevisiae KCTC 7039 and Hansenula anomala KFRI 626. Bean cooking water with 2% inoculation volume of these yeasts was fermented until 48 hrs, respectively. The results of sugar analysis according to the fermentation time showed, bean cooking water treated with S. cerevisiae KCTC 7039 and H. anomala KFRI 626 used almost sucrose without decreasing stachyose for the growth.
We have produced new-structured oligosaccharides using immoobilized mixed-enzyme reactor of destransucrase from Leuconostoc mesenteroides B-512FMCM and $\alpha$-amylase from Aspergillus oryzae. The reactors of immobilized mixed-exzyme beads were more efficient for the production of oligosaccharides than that of each immobilized enzyme bead in stirred-tank reactior(STR) or in packed-bed reactor(PCR). In continuous flow reactor, the immobilized mixed-enzyme bead in PBR was more stable than in STR, and 52% of initial yield was maintained for 200 hr. New structured-oligosaccharides (NOS) reduced the change of pH in the culture of Streptococcus mutans. It also showed an inhibitory effect on the growth of Staphylococcus aureus.
Paenibacillus sp. JB-13 producing the cyclodextrin glucan-otransferase(CGTase) [EC 2.4.1.19] that glucosylated ascorbic acid(AA) at the C-2 position was isolated form soil and the optimal conditions for the production of 2-O-$\alpha$-D- Glucopyranosl L-Ascorbic acid(AA-2G) with CGTase were investigated. CGTase produced AA-2G efficiently using dextrin as a substrate and AA as an aceptor. Several AA-2-oilgosaccharides(AA-2Gs) were also produced in this reaction mixture, and these were efficiently hydro-lyzed to AA-2G and glucose by the treatment with glucoamylase. The optimal temperature for AA-2G production was $37^{\circ}C$ and the optimal pH was around 6.5. CGTase also utilized $\alpha$-,$\beta$-,${\gamma}$-CDs, soluble starch, com statch, dia-static solution from rice and diastatic solution from malt as substrate, but not glucose. The reaction mixture for the maximal production of AA-2G was following; 15% total substrate concentration, 2,500 units/ml of CGTase and a mixing ration of 3:2(g of AA: g of dextrin). Under this condition, 56 mM of AA-2G ,which corresponded to 12.4% yield based on AA. was produced after incubation for 44 hrs at $37^{\circ}C$ and pH 6.5.
Effects of the addition of three commercial oligosaccharide syrups into a Korean rice cake (Karedduk) on the textural characteristics and retrogradation of the rice cake were examined during the storage for 5 days at $25^{\circ}C$ and $4^{\circ}C$. Each syrups contained maltose (M75), isomaltose and panose (HL), or maltotetraose (G4) as major sugars. The increment (rates) in gumminess, hardness and chewiness during the storage were significantly reduced by replacing rice flour (up to 10%) with the oligosaccharides. The retardation in the textural changes by the oilgosaccharides was more significant when the rice cake was stored at $25^{\circ}C$ than at $4^{\circ}C$. Among the three types, HL exhibited most effective in retarding the textural changes. Thermograms by a differential scanning calorimeter (DSC) showed that the oligosaccharide increased the onset temperatures and enthalpy for the starch melting, but the recrystallinity measured from the enthalpy ratio before and after the storage was significantly reduced by the presence of the oligosaccharide. Especially with 5% HL, the recrystallinity was significantly low (72.7%) compared to rice cake without HL (88.1%). Therefore, HL had great efficiency in retarding starch retrogradation as well as textural changes of the rice cake during the storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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