The purpose of this study was to elucidate protective effect of Fructus Schsandrae(FS) water extract against xanthine oxidase/hypoxanthine(XO/HX)-induced cardiotoxicity in myocardial cells this experiment was performed. Cardiotoxicity of XO/HX was examined by MTT(MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2.5,-diphenyl tetrazolium bromide) assay. XO/HX induced the decrease of cell viability. Also XO/HX induced the increase of LDH activity and the decrease of beating rate on cultured myocardial cells in a dose-dependent manner. To investigate cardioprotective effect of FS water extract cultures were preincubated with FS water extract for 3 hours. Cultures were then exposed to XO/HX for 72 hours. FS water extract have an efficacy in decreaasing LDH activity and increasing heart beating rate on cultured myocardial cells damaged by XO/HX. From the results it is suggested that XO/HX may show toxic effect in cultured myocardial cells derived from neonatal mouse and FS water extract is effective in the prevention of XO/HX-induced cardiotoxicity.
Ginsenosides of 20(S)-protopanaxadiol and 20(S)-protopanaxatriol classification including the aglycones, PD, PI and ginsenosides Rh2, Rhl were shown to posses characteristic effects on proliferation of THP-l human leukaemia cells. A similar result was not apparent for ginsenoside Rg3 or dexamathasone. The concentration to inhibit $50\%$ of cells $(LC_{50})$ for PD, Rh2, PI and Rhl were 13 ${\mu}g/mL,\;15{\mu}g/mL,\;19{\mu}g/mL\;and\;210\;{\mu}g/mL$ respectively. Cell cycle analysis showed apoptosis with PD and PI treatment of THP-1 cells resulting in a build up of sub-G1 cells after 24, 48 and 72 hours of treatment. Rh2, and dexamathasone treatments also increased apoptotic cells after 24 hours, where as Rhl did not. After 48 and 72 hours Rh2, Rhl and dexamathasone similarly increased apoptosis, but these effects were significantly (P<0.05) lower than observed for both PD and PI treatments. Furthermore, treatments that produced the largest build up of apoptotic cells were also found to have the largest release of lactate dehydrogenase (LDH). It can be concluded from these studies that the presence of sugars to PD and PI aglycone structure reduces the potency to induce apoptosis, and alternately alter membrane integrity. These cytotoxic effects to THP-l cells were different from dexamethasone.
Lee, So-Rok;Hwang, Hye-Jeong;Yoon, Ju-Gyeong;Bae, Eu-Young;Goo, Kyo-Suk;Cho, Sang-Joon;Cho, Jin Ah
Nutrition Research and Practice
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제13권2호
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pp.95-104
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2019
BACKGROUND/OBJECTIVES: Inflammatory Bowel Disease (IBD) has rapidly escalated in Asia (including Korea) due to increasing westernized diet patterns subsequent to industrialization. Factors associated with endoplasmic reticulum (ER) stress are demonstrated to be one of the major causes of IBD. This study was conducted to investigate the effect of Lycium barbarum (L. barbarum) on ER stress. MATERIALS/METHODS: Mouse embryonic fibroblast (MEF) cell line and polarized Caco-2 human intestinal epithelial cells were treated with crude extract of the L. chinense fruit (LF). Paracellular permeability was measured to examine the effect of tight junction (TJ) integrity. The regulatory pathways of ER stress were evaluated in MEF knockout (KO) cell lines by qPCR for interleukin (IL) 6, IL8 and XBP1 spliced form (XBP1s). Immunoglobulin binding protein (BiP), XBP1s and CCAAT/enhancer-binding homologous protein (CHOP) expressions were measured by RT-PCR. Scanning Ion Conductance Microscopy (SICM) at high resolution was applied to observe morphological changes after treatments. RESULTS: Exposure to LF extract strengthened the TJ, both in the presence and absence of inflammation. In polarized Caco-2 pretreated with LF, induction in the expression of proinflammatory marker IL8 was not significant, whereas ER stress marker XBP1s expression was significantly increased. In wild type (wt) MEF cells, IL6, CHOP and XBP1 spliced form were dose-dependently induced when exposed to $12.5-50{\mu}g/mL$ extract. However, absence of XBP1 or $IRE1{\alpha}$ in MEF cells abolished this effect. CONCLUSION: Results of this study show that LF treatment enhances the barrier function and reduces inflammation and ER stress in an $IRE1{\alpha}$-XBP1-dependent manner. These results suggest the preventive effect of LF on healthy intestine, and the possibility of reducing the degree of inflammatory symptoms in IBD patients.
Studies have been conducted on fermentation products known to increase biological activity through bioconversion of mycelium. In this study, ethanol extract of waxy sorghum (WS) and ethanol extract of waxy sorghum fermented with Phellinus linteus mycelium (WSPM) were prepared, and functional component contents, antioxidant activity, and cytotoxicity were analyzed. Total polyphenol contents and total flavonoid contents of WSPM were higher than those of WS. In addition, the ${\beta}-glucan$ content of WS was higher than that of WSPM. DPPH and ABTS radical scavenging activities showed that WSPM had higher antioxidant activity than WS at all concentrations. Analysis of SOD-like activity also showed higher antioxidant activity in WSPM. MTT assay demonstrated that WSPM exhibited high inhibitory activity in all cancer cells, and in particular, in HeLa cells with the highest inhibition. A concentration-dependent increase in anticancer activities of WS and WSPM was detected in all cancer cells, which was identical to the SRB assay result. MTT and SRB assay showed the increased cytotoxicity of WSPM in cancer cells. Therefore, it is expected that WSPM can be used as a functional food material.
The effect of the polyunsaterated fatty acids, linoleic acid(LA), arachidonic acid(AA) and conjugated dienoic linoleic acid(CLA) on IEC-6 cells (rat intestinal cell)proliferation and cell transduction have been determined in vitro. IEC-6 cells proliferation was assessed by cell growth and [3H]-thymidine incroporation analysis. At 10 μM concentration , the proliferationof cells supplemented with AA or LA was significantly higher than that of CLA. [3H]-thymidine uptake showed the same results. LA and AA increased [3H]-thymidine uptake more than CLA. The stimulatory effect of LA or AA was even more pronounced in the presence of IGF. Both cell number analysis and [3H]-thymidine incorporation revealed that IEC-6 cell proliferation was influenced differently by exogenous free fatty acids, in which AA or LA stimulated IEC-6 cell proliferation and CLA inhibited it. Tyorosine phosphorylation provides a key switch to regulate celluar acitivity in response to extracellular stimuli. At 20 μM and 10μM, AA with IGF-1 stimulated protein tyrosine phophorylation in IEC-6 cells, but LA's impact was less than that of AA. CLA and CLA with IGF-1 inhibited protein tyrosine phosphorylation in IEC-6 cells. These results suggest there is a possible correlation between cell proliferation and IGF receptor tyrosine knase activity driven by AA.
KIM, SOO YEON;YOUNG MIN LEE;SUN YOUNG LEE;YEON SOOK LEE;JEONG HWAN KIM;CHEOL AHN;BYUNG CHEOL KANG;GEUN-EOG JI
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제11권5호
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pp.831-837
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2001
Pediocin K1, a bacteriocin produced by Pediococcus sp. K1 isolated from Korean traditional fermented flatfish, inhibited certain strains of Lactobacillus, Streptococcus, and Listeria monocytogenes. Pediocin K1 was found to be stable at $90^{\circ}C$ for 30 min. Among the organisms tested, Listeria monocytogenes was the most sensitive to pediocin K1 and was completely killed when the initial inoculum size of L.monocytogenes cells was equal to or less than $10^3 CFU/ml$. The degree of inibition of Listeria monocytogenes by pediocin K1 increased 10-fold on the addition of citric acid ($0.2\%$) to the medium, thereby showing the synergistic effect of citric acid. Listeria monocytogenes cells resistant to pediocin K1 appeared at a frequency of about $10^-4$/cells. Once developed after exposure to pediocin K1, the resistant phenotype still persisted in the absence of pediocin K1 in successive cultures. This infers that resistance may be attributable to genetic change(s) in the resistant cells.
(-)-Epigallocatechin-3-gallate (EGCG) is a polyphenolic compound found in peen tea leaves, and has been known to be one of the most potent catechin species which inhibits cell growth most possibly through an apoptotic cell death. We investigated the apoptotic activity of (-)-EGCG on the human myeloid leukemia cell line, HL-60. Our results of MTT test indicated that (-)-EGCG had a significant antiproliferation effect in HL-60 cells with $IC_{50}$/ (50% inhibition concentration) value of 65 $\mu$M. Giemsa statining of HL-60 cells treated with (-)-EGCG (100 $\mu$M) for 6hrs showed a typical apoptosis-specific morphological change including shrinkage of the cytoplasm, membrane blobbing and compaction of the nuclear chromatin. The DNA fragmentation was observed from the agarose gel electrophoresis of cells treated with (-)-EGCG for 3hrs or longer, and was progressed to a greater degree as treatment time increases. Treatment of the cells with (-)-EGCG (100 $\mu$M) resulted in a rapid release of mitochondrial cytochrome c into the cytosol, and a subsequent cleavage of caspase-3 to an active form in a treatment-time dependent manner. (-)-EGCG (100 $\mu$M) also stimulated proteolytic cleavage of poly-(ADP-ribose) polymerase (PARP) to an active form in HL-60 cells. Tlken together, (-)-EGCG appears to induce the apoptosis in human myeloid leukemia cells via a caspase-dependent pathway. These results suggest the possible application of (-)-EGCG, the major active compound in green tea, as an antiproliferative agent for cancer prevention.
산수유를 항암 식품 소재로 활용하기 위하여 sarcoma-180 암세포에 대한 산수유 에탄올 추출물의 증식 억제 및 마우스에서의 수명 연장효과를 검토하였다. 산수유 에탄올 추출물을 10, 100, 300 및 $500\;{\mu}g/mL$ 농도로 24, 48 및 72시간 별로 sarcoma-180 암세포에 처리하여 암세포 증식억제 효과를 측정한 결과, 농도 및 시간 의존적으로 억제하였으며, $500\;{\mu}g/mL$ 농도에서 48시간 배양 시 60% 이상의 높은 암세포 증식 억제 효과를 나타내었다. 산수유 에탄올 추출물을 $100\;{\mu}g/mL$ 농도 이상으로 처리한 암세포에서는 대조군의 증식이 감소되었으며, 형태학적 변화도 관찰되었다. 또한 산수유 에탄올 추출물은 농도 의존적으로 핵을 응축하고 apoptotic bodies를 생성하였으며, 300 및 $500\;{\mu}g/mL$의 농도에서는 DNA fragmentation을 유도하였고 이러한 apoptosis 유도는 caspase-3 활성과 관련이 있었다. 산수유 에탄올 추출물을 sarcoma-180 암세포가 접종된 마우스 복강에 7일간 100 및 300 mg/kg/day의 농도로 연속적으로 투여하였을 때, 산수유 투여군의 수명이 대조군에 비하여 증가되었다. 따라서 이 결과를 종합하여 볼 때 산수유는 암 예방 기능성 소재로서 활용이 가능하리라 생각된다.
The immunostimulating activities of mucilage fraction from yam were investigated. The proliferation of BSA-primed lymph node cells was enhanced between 4.1- to 10.9-fold compare to control, when cultured with 1 to $25{\mu}g/mL$ of yam-mucilage fraction. It showed strong immunostimulating activity than ginseng extract and as remarkable as Bifidobacterium adolescentis M101-4 known as a positive immunostimulator. Mitogenicity to lymph node cells was fully induced by concanavalin A and lipopolysaccharide. The proliferation of splenocytes and Peyer's patch cells was enhanced between 5.0- to 14.1-fold and 2.4- to 6.4-fold, respectively, when cultured with 1 to $25{\mu}g/mL$ of yam-mucilage fraction. It enhanced the production of cytokines such as tumor necrosis $factor-{\alpha}$ and IL-6 in the culture of RAW 264.7 macrophage cells. In the culture of lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 cells, production of cytokines was as similar as compared to controls. In unstimulated RAW 264.7 cells, both tumor necrosis $factor-{\alpha}$ and IL-6 production were enhanced between 15.6- to 60.1-fold and 2.3- to 9.1-fold, respectively. Mucilage fraction from yam is expected to be a safe immunopotentiator to maintain the host immunity and develop a physiologically functional food.
The purpose of this study was to investigate the biological activity of fucoidan, a sulfur-containing polysaccharide, on cytotoxicity and apoptosis in the human HT-29 colorectal cancer cell line using cell viability, Flow cytometry, Western blot, and RT-PCR analyses. Fucoidan inhibited the proliferation of HT-29 cells by 39.6% at a concentration of 100 ㎍/mL for 72 h. The inhibition was dose-dependent and accompanied by apoptosis. Flow cytometric analysis showed that fucoidan increased early apoptosis and late apoptosis by 65.84% and 72.09% at concentrations of 25 and 100 ㎍/mL, respectively. Analysis of the mechanism of these events indicated that fucoidan-treated cells exhibited increases in the activation of caspase-3, caspase-8, and PARP in a dose-dependent manner. These results suggest that fucoidan may inhibit the growth of human colorectal cancer cells by various apoptosis-promoting effects, as well as by apoptosis itself.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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