International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제9권2호
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pp.225-228
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2004
Superoxide dismutase (SOD) is an important enzyme which catalyzes superoxide radicals to hydrogen peroxide. A Cu, Zn sod-like gene was found in Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus encoding 151 amino acids. To demonstrate its function, a recombinant virus named dsBmNPV with deleted sod gene was constructed. It was discovered that the sod gene was not essential for viral replication. Studies on growth of budded virus in BmN cells and superoxide dismutase and catalase activities in vivo after dsBmNPV infection showed that the titer of dsBmNPV decreased obviously comparing to wild type BmNPV, the sod gene was effective on genomic DNA replication of baculovirus, the peak of SOD activity of silkworm infected with wt-BmNPV appeared between 36 and 48 hrs post infection, and with dsBmNPV, it did not appear. And the changes of CAT activity after infection were similar to SOD activity.
담배거세미나방 핵다각체병바이러스를 white carbon 제제, molasses 제제 및 White carbon-molasses 혼합제등 3종의 바이러스살충제로 만들어 제제의 살포방법, 살포효과 및 잔류효과를 폿트 및 콩포장에서 살충효과를 비교하였다. 바이러스 살충채 살포는 콩잎 표면 살포시 약 5일, 이변 살포시 약 12일까지 60% 이상의 살충효과가 지속되었다. 폿트식재 콩잎을 이용한 바이러스살충제의 살포효과는 molasses 제제와 with carbon 제제에서 모두 97% 이상의 살충효과가 있었으나 molasses성분을 포함한 제제는 햇빛에 의해 일부 콩잎에 약해를 보였다. 바이러스살충제 살포 1 시간 후 빗물 처리에 의한 영향은 빗물 무처리와 큰 차이가 없이 90% 이상의 살충효과가 있었다. 야외 콩 포장에서 바이러스살충제의 살포효과는 3종의 제제 모두 90%이상의 살충율이었 며, 유기합성농약보다 7일 늦게 효과가 나타난 반면 2주 이상 효과가 지속되었다.
핵다면체 바이러스는 S. frugiferda 세포주에 감염되었다. 감염 12시간 후에 세포는 운동성을 잃고 세포의 핵은 팽창되었다. 감염 24시간 후에 세포는 비정상적인 형태로 되었으며, 작은 PIB가 나타나기 시작하였다. 감염 48시간 후에는 전체 세포에 PIB가 형성되었고, 감염 76시간 후에는 핵속에 있는 PIB는 일부가 세포밖으로 방출되었다. 전자현미경을 통해 감염후 13시간이 지난후 NPV를 관찰한 결과 세포의 핵속에서는 virogenic stroma가 형성되었으며, 그 부분에서 nucleocapsids가 형성되었다. 감염 48시간 후에는 많은 nucleocapsid들은 bundle을 형성하고, PIB에 봉입되었다. PIB는 대부분 4면체이며, 크기는 $3{\sim}10{\mu}m$ 정도이었다. Virion은 막대형으로 nucleocapsid는 $30{\sim}40{\times}300{\sim}400nm$이었다.
파밤나방 핵다각체병ㅂ이러스의 기주곤충 및 나비목해충에 대한 병원성과 10종 baculovirus의 파밤나방 유충에 대한 교차감염을 조사하여 방제에 이용하고자 시험을 수행하였다. 난에대한 중앙치사농도($LC_{50}$)는 2.855$\times$$10^{5}$ 다각체/ml로 유충보다 높았다. 령별 $LC_{50}$은 3령이 1.422$\times$$10^{4}$ 다각체/ml로 1령보다 1.16배, 5령보다 .11배의 높은 병원성을 나타냈다. 각 령의 중앙치사일수($LT_{50}$)은 1.56$\times$$10^{6}$ 다각체/ml에서 4.26~5.04일이었다. 8종 나비목 해충에 대한 파밤나방 핵다각체병바이러스의 병원성은 기주곤충인 파밤나방에서만 인정되었고 10종의 곤충간상바이러스 중 Autographa californica MNPV, Mamestra brassicae MNPV 및 Trichoplusia ni MNPV 등 3종이 파밤나방 유충에 대해 교차감염을 일으켰다.
담배거세미나방을 인공사료로 사육했을 경우 경과일수는 약 42일(강낭콩잎 사육은 37.9일)이었고 담배거세미나방 유충 핵다각체병 바이러스의 $LC_{50}은 1,3,5령에 대해 각각 $5.04{\times}10^{2}, 4.48{\times}10^{3}, 4.52{\times}10^{4}$ 다각체/ml이었으며, $LC_{50}은 1 령은 $1.1{\times}10^{5}$ 다각체/ml에서 7.1일, 3 령은 $1.1{\times}10^{6}$ 다각체/ml에서 7.7일, 5령은 $1.1{\times}10^{7}$ 다각체/ml에서 7.0일로 나타났다. 1 령유충은 비교적 고농도인 $10^{5-6}$ 다각체/ml로 접종했을 때 2-4령기, 3 령의 경우는 $10^7$ 다각체/ml 농도에서 100% 치사되었고, 병사충은 5 령때 발생했다. 담배거세미나방은 A. californioca MNPV, S. littoralis MNPN 및 T. ni MNPV에 의해 병원성이 나타났으며, $1.1{\times}10^{7}$ 다각체/ml로 접종했을 때 각각 92.0, 92.0, 60.0%의 사충율을 보였다.
흰불나방의 미생물적 방제를 위한 핵다각체병 바이러스의 제제화와 그 실용화를 위한 야외 살포 시험을 통해 얻어진 제제의 불활화 정도 및 살포효과는 다음과 같다. 흰불나방 핵다각체병 바이러스의 불활화 조사에서 부유액의 경우 야외 살포후 5일이 경과한 후로는 완전히 불활화 되었으며, 제제는 살포 후 20일이 지나서 완전히 불활화 되어, 흰불나방 핵다각체병 바이러스를 제제화 했을 때 부유액에 비해 약 10-15일 정도 활성을 보유하여 제제의 안전성을 확인하였다. 또 제제의 야회 살포효과 시험에서 부유액의 경우는 2일이 경과하면서 병원성을 보이지 않은 반면에 제제는 접종당일 살포하였을 때 약 50%정도의 폐사율을 나타내었으며, 살포 후 9일까지는 약 30% 정도의 폐사율을 유지하면서 비교적 안전성을 보이다가 살포 후 14일이 경과하면서 병원성을 보이지 않았다. 제제의 경우 야외에서 약 10일 이상 감염력의 지속에 의한 살포효과를 나타내었다.
Je, Yeon-Ho;Jin, Byung-Rae;Roh, Jong-Yul;Chang, Jin-Hee;Kang, Seok-Kwon
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제1권1호
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pp.19-23
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2000
A novel recombinant baculovirus Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (ACNPV) producing the green fluorescent polyhedra was constructed and characterized. The recombinant virus was stably produced fluorescent polyhedra in the infected cells and the morphology of the polyhedra was nearly similar to that of wild-type AcNPV. For the production of the fluorescent polyhedral the green fluorescent protein (GFP) gene was introduced under the control of polyhedrin gene promoter of AcNPV by translational fusion in the front and back of intact polyhedrin gene. The recombinant baculovirus was named as CXEP, As expected, the 93 kDa fusion protein was expressed in the CXEP-infected cells. Interestingly, however, the cells infected with CXEP also showed a 33 kDa protein band as cells infected with wild-type AcNPV. The results of Southern blot analysis and plaque assay suggested that two types of baculoviruses expressing the GFP fusion protein or only native polyhedrin were formed through homologous recombination between two polyhedrin genes in the same orientation. Thus, this system can be applied for the production of recombinant polyhedra with foreign gene product of diverse interest.
1975년 수원 잠업시험장에서 분리한 흰불나방 핵다각체 바이러스 성상과 령기, 화기별 및 병원체 보존조건에 따른 병원성을 검정하기 위하여 핵다각체 바이러스를 현탁액 및 건조시켜 실온$(18.5^{\circ}C)$, 냉장$(5^{\circ}C)$, 냉동$(-80^{\circ}C)$에 각각 보존, 이병사체는 그대로 양지 음와 지에 보존하였고 야외에서의 병원성, 가잠에 대한 교우감염을 검정한 결과 다음과 같다. 1. 흰불나방 핵다각체는 4면체와 6면체로 크기는 약 $2.0{\mu}$이고 바이러스 입자는 간상형의 $2\~12$본으로 $33m\mu\times35m\mu$이었다. 2. 6각형의 흰불나방 중장핵다각체 바이러스는 중장의 핵에서만 발견되었다. 3. 령기별 $LD_{50.}$ 2,3,4 및 5령에 대해 $8.377\times10^4,\;4.974\times10^5,\;2.621\times10^6$ 및 $9.471\times10^6PIBs/ml$ 였으며 $1.45\times10^6\;PIBs/ml$에 대한 $LT_{50}$은 각각 9.6, 11.5, 12.0 및 17.3일 이었다. 4. 핵다각체 바이러스는 1화기 유충보다 2화기 유충에서 감수성이 높았다. 5. 핵다각체 보존은 둔화건조하여 냉동 및 냉장보존하거나 이병사체를 음지에 보존하는 것이 바이러스 활성도의 감소가 적었다. 6. 야외에서의 효과적인 살포농도는 $6.4\times10^7\;PIBs/ml$이며 이의 $LT_{50}$은 3령은 4.8일, 5령은 14.2일이었다. 7. 흰불나방 핵다각체 바이러스와 가잠의 핵다각체 바이러스는 상호 교우감염을 일으키지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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