Deer antler has been widely prescribed in Chinese and Korean pharmacology. Although there have been several reports concerning the effects of deer antler, such as anti-aging action, anti-inflammatory activity, antifungal action and regulatory activity of the level of glucose, the effect on bone has not determined yet. The purpose of this study was to examine the effect of deer antler on osteoblast differentiation. Hexane extract(CN-H) and chloroform extract(CN-C) were acquired from deer antler(Cervus nippon) and MC3T3-E1 pre-osteoblasts were cultured in the presence or absence of each extract. Osteoblast differentiation was estimated with the formation of mineralized nodules and the mRNA expression of alkaline phosphatase(ALP), osteocalcin(OC) and bone sialoprotein(BSP) which are markers of osteoblast differentiation. Non-treated group did not show mineralized nodule. CN-C or CN-H-treated group showed minerlaized nodules in 16 days. In northern blot analysis, CN-C or CN-H-treated group showed the elevated expression of ALP, BSP and OC in 16 days. These results suggest the possibility to develop deer antler as a bone regenerative agent in periodontal therapy by showing the stimulating activity of deer antler on differentiation of osteoblast.
Background: Endodontic sealers or their toxic components may become inflamed and lead to delayed wound healing when in direct contact with periapical tissues over an extended period. Moreover, an overfilled sealer can directly interact with adjacent tissues and may cause immediate necrosis or further resorption. Therefore, the treatment outcome conceivably depends on the endodontic sealer's biocompatibility and osteogenic potential. This study aimed to evaluate the cell viability and osteogenic effects of four different sealers in osteoblastic cells. Methods: AH Plus (resin-based sealer), Pulp Canal Sealer EWT (zinc oxide-eugenol sealer), BioRoot RCS (calcium silicate-based sealer), and Well-Root ST (MTA-based calcium silicate sealer) were mixed strictly according to the manufacturer's instructions, and dilutions of sealer extracts (1/2, 1/5 and 1/10) were determined. Cell viability was measured using the water-soluble tetrazolium-8 (WST-8) assay. Differentiation was assessed by alkaline phosphatase (ALP) activity and mineralized nodule formation by Alizarin Red S staining. Results: The cell viability of the extracts derived from the sealers excluding Well-Root ST was concentration dependent, with sealer extracts having the least viability at a 1/2 dilution. At sealer extract dilution of 1/10, the test groups showed the same survival rate as that control group, with the exception of BioRoot RCS. Among all experimental groups, BioRoot RCS showed the highest cell viability after 48 hours. The ALP activity was significantly higher in a concentration-dependent manner. Furthemore, all four materials promoted ALP activity and mineralized nodule formation compared to the control at 1/10 dilutions. Conclusion: This is the first study to highlight the differences in biological activity of these four materials. These results suggest that the composition of root canal sealers appears to alter the form of biocompatibility and osteoblastic differentiation.
Objectives: This study was performed to evaluate the effect of Samkieumgamibang (SKG) on osteoporosis. Methods: The osteoclastogenesis and gene expression were determined in RANKL-stimulated RAW 264.7 cell. And, osteoblastogenesis was also determined in rat calvarial cell. Results: SKG decreased the number of TRAP positive cell in osteoclast. It also decreased the expression of Cathepsin K, MMP-9, TRAP, c-fos, NAFTc1 and JNK1 in osteoclast. SKG increased the expression of iNOS in RANKL-stimulated in osteoclast. Otherwise, SKG inhibited TRAP activity in osteoclast. SKG increased cell proliferation, ALP activity, bone martix protein, collagen and nodule in osteoblast. Conclusions: It is concluded that SKG might decrease the bone resorption resulted from decrease of osteoclast differentiation and it's related gene expression. And, SKG might increase the bone formation resulted from increase of osteoblast function.
Recently, use of natural medicine is getting more attention, and some of them are believed to be effective in the treatment of periodontitis. Among them, the seeds of safflower(Carthamus tinctrorius L.) have been proven to be effective through its use in bone diseases such as fracture and osteoporosis. During the last few years, studies using the seeds of safflower gown in Korea have been active, and it has been reported that safflower seed extract increase the proliferation and the alkaline phosphatase(ALP) activity of human periodontal ligament fibroblast(hPDLF), osteoblast, and that they promote the mineralization process. In animal studies, when safflower seed extract were administered orally new bone formation was promoted. Recently, in an effort to find out the most effective osteogenic components, among many components of the safflower seed, various safflower seed fraction extracts were obtained by multistep extraction of the safflower components using various solvents. Among these, saf-M-W fraction extracted by methanol and water was most effective in increasing osteogenic potential of osteoblasts. In this study, the effect of safflower seed fraction extract, saf-M-W, on the growth and differentiation of hPDLF and MC3T3-E1 cell was investigated. The toxicity of saf-M-W on both cells was measured using M'IT(3-(4,5dimethylthiazol-2-y1)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) test, and ALP activity was measured using the colorimetric assay of hPDLF. In addition, in MC3T3-El cells, the expression of ALP, bone sialoprotein(BSP) mRNA was observed using Northern blot, and the mineralized nodule formation Was observed using von Kossa stain and phase-contrast microscope. 1. In concentrations below $10{\mu}g/ml$, saf-M-W didn't show any toxicity on hPDLF and MC3T3-El cell. 2. The change in saf-M-W concentration had no effect on the ALP activity of hPDLF. 3. In MC3T-E1 cells, mRNA expressions of ALP and BSP were greater in the experimental group treated with $10{\mu}g/ml$ concentration of saf-M-W compared with the control group. 4. In MC3T3-El cells, abundance of mineralized nodules were formed in the experimental group treated with $10{\mu}g/ml$ Concentration of saf-M-W, while no mineralized nodule was formed in the control group. These results suggest that safflower seed fraction extract, saf-M-W. didn't show any toxicity on hPDLF and MC3T3-E1 cell at concentrations below $10{\mu}g/ml$ and effectively enhanced the differentiation and osteogenic potential of MC3T3-El cell.
Fibrosis of skeletal muscle following acupuncture is an iatrogenic disorder. The present case illustrates a patient with a unilateral fibrotic formation on a thumb muscle after acupuncture injection therapy with red sage. The patient in the present case was a counter-terrorism police officer with right-handedness; he noted a palpable nodule three months after injection therapy at his left first dorsal interosseous in which the acupuncture point LI4 (He Gu) is located. He also found a reduction in the strength of his left pinch grip that noticeably affected his left handgun marksmanship. However, being ambidextrous in single-hand pistol shooting is an essential requirement for counter-terrorism police officers. Based on the patient's medical history and claims, no underlying disease or trauma was found to be associated with his current complaint. During physical examination, a fibrotic formation in his left first dorsal interosseous muscle was visualized by using diagnostic ultrasound; also, as confirmed with dynamometry, the strength of his left pinch grip was significantly lower than that of the right counterpart. Because acupuncture injection therapy has three components, antiseptic practices, the mechanical action of syringe insertion, and the pharmacological effect of the sterile herb extract, any one of the components may have contributed to the present adverse event. The first dorsal interosseous muscle is small in dimension and rather vascular; thus, it is not an ideal site for intramuscular injection. When a clinician needs to treat a patient by performing acupuncture at the LI4 acupoint and injecting a herbal extract simultaneously, the clinician should only mechanically stimulate the LI4 acupoint while injecting the herbal medicine into the LI14 (Bi Noe) acupoint on the same meridian, the LI14 acupoint being located in the distal portion of the deltoid muscle and being fairly close to the universally agreed upon site on the upper arm for safe administration of an injection.
We introduce an implementation of plug-ins on PLUTO. These plug-ins discriminate inflammatory nodules from other types of nodules in chest X-ray CT images. The PLUTO is a common platform for computer-aided diagnosis systems on Microsoft Windows series and it is easy to add new functions as plug-ins. We coded two plug-ins. One of the them calculates features based on medical knowledge. The other plug-in calculates parameters to classify the type of nodules, and it also classifies nodules into inflammatory nodules and others using SVM. These plug-ins are coded using MIST library which is produced at Nagoya University, Japan. In our previous study, the MIST library was parallelized, so that we can utilize a number of CPUs to calculate features and SVM learning/classifying depending on the amount of computation. Using these plug-ins, it became easy to extract features to discriminate inflammatory nodules from other types of nodules and to change parameters for feature extraction and SVM learning/classifying with GUI interface. The accuracy of the classifying result is 100% with 78 solid nodules which contains 43 inflammatory nodules and 35 other type of nodules.
골조직은 골아세포, 파골세포, 골세포 등으로 구성되며, 골개조시 여러 인자가 세포증식, 분화, 활성화 및 골대사 조절에 관여한다. 이때 조골세포의 활성은 골형성에 중요하므로, 본 연구에서는 MC3T3-E1 조골세포주를 이용하여 식용자원인 복분자의 조골세포의 증식과 분화활성에 미치는 영향을 조사하였다. 복분자 추출물이 조골세포의 성장에 미치는 영향을 MTT 검색법으로 조사한 결과, 복분자 추출물 $10\;{\mu}g/mL$ 처리시 대조군과 비교하여 $142\%$ 증가하여 조골세포에 대해 높은 성장률을 보였다. 복분자 추출물이 ALP 효소 활성에 미치는 영향을 3일 간격으로 배지교환 및 시료처리를 하면서 27일 동안 배양시간에 따른 변화를 측정하여 조사하였다. 그 결과, 농도 1, 10, $100\;{\mu}g/mL$ 처리시 $100\;{\mu}g/mL$을 제외한 나머지 분획물들이 시간이 지남에 따라 ALP 활성을 증가시켰고, $10\;{\mu}g/mL$ 농도의 추출물은 27일째에 대조군에 비해 약 2.6배 이상, 양성대조군에 비해 약 1.5배 이상 ALP 활성을 증가시켰다. 복분자 추출물은 다시 ALP 효소 염색법과 Alizarin Red 염색으로 조골세포의 ALP활성유도, 분화와 석회화 형성능을 재확인하였으며 골기질 유전자의 발현의 변화도 확인하였다. 따라서 종래의 골질환에 좋다고 알려진 식품인 복분자 추출물이 양성대조군에 비해 빠르게 세포 증식과 분화를 유도하고 있어 앞으로 복분자에 대한 좀 더 깊은 분자생물학 수준 등의 구체적인 연구들과 기작연구가 지속적으로 이루어져야 할 것이라 추측된다.
본 실험은 alfalfa 와 vetch의 추출물과 잔유물의 콩과 옥수수에 대한 타감작용을 검정하기 위해서 실시 되었다. 콩과 옥수수에 대한 타감작용을 검정하기 위해서 영양생장기 때에 수확된 alfalfa 와 vetch를 건조시켜 추출물을 얻었고 또한 이들 잔기를 silica sand와 혼합처리하여 콩과 옥수수의 생육을 검토 하였고, 콩에 대해서는 근류균의 착생정도를 조사 하였다. 1. 발아시험에서는 롱과 옥수수의 발아율, 유근의 생장, 무게 등이 추출물 농도가 증가할수록 억제 되었으며, 최고 억제정도는 추출물 농도 20%에서 발생되었다. 추출물에 대하여 콩이 옥수수보다 더 민감하게 반응하였으며, alfalfa의 추출물이 vetch의 추출물보다 더 억제적이었다. 2. Alfalfa와 vetch를 silica sand에 혼합하여 콩과 옥수수의 간장, 엽면적, 지상부의 생육정도를 비교하였을 때 콩의 간장, 업면적, 지상부 생육은 alfalfa처리에서 더 억제적 이었으며, 옥수수의 생육은 vetch 처리에서 촉진 되었다. 3. Alfalfa와 vetch처리가 모두 콩 뿌리혹의 형성을 억제시켰는데 alfalfa처리가 vetch의 처리보다 뿌리혹의 형성을 더 억제 시켰다. 4. Alfalfa와 vetch의 추출물과 잔기의 처리는 옥수수보다는 콩의 발아와 생육에 더 억제적으로 작용하므로 콩 재배의 경우에는 이들 잔기의 관리가 필요하다고 생각되어진다.
본 연구를 통하여 여주 추출물은 세포 증식을 제외하고는 조골세포에 긍정적인 영향을 미치지 못하였지만 머위 추출물은 세포의 증식, ALP 활성, bone nodule의 형성이 대조군과 비슷한 결과를 나타내거나 높은 경향을 나타냄으로써 조골세포의 골 형성 과정인 증식, 기질의 성숙, 기질의 석회화의 세 단계에서 유효성을 증명하였다. 또한 OPG mRNA의 2배 이상의 증가는 조골세포의 골 형성에 주요 매개 물질로서 가능성이 있음을 밝혔다. 따라서 머위 추출물은 골수의 미세 환경에서 세포의 조절작용을 하는 물질로 여겨지며, 골다공증을 포함한 각종 골 결손 질환의 예방과 치료약 개발에 긍정적인 가능성을 제시할 것이라 사료된다.
황금 추출물이 조골세포와 파골세포에 미치는 영향을 세포수준에서 관찰하고자 하였다. 조골세포에 미치는 영향을 관찰하기 위하여, mouse calvaria 유래의 MC3T3-E1 osteoblastic cells를 이용하여 세포 생존률, 염기성 인산분해효소 활성, 골석회화 형성능을 측정하였다. 또한 미분화된 파골세포 전구세포로부터 파골세포의 생성 및 활성에 미치는 영향을 관찰하기 위하여, murine macrophage 유래인 Raw 264.7 cells를 이용하여 M-CSF와 RANKL을 처리하여 파골세포의 분화를 유도하였고, TRAP에 양성인 다핵세포의 형성을 관찰하여 황금추출물이 파골세포의 형성에 미치는 영향을 알아보았다. 황금 추출물이 MC3T3-E1 세포의 증식에 미치는 영향을 MTT assay로 측정한 결과, MC3T3-E1 세포는 처리한 황금 추출물의 농도에 의존적으로 세포의 증식이 촉진되는 경향을 나타내었으며 특히 $1{\mu}g/mL$ 농도에서 130.4%의 증식 효과를 나타내었다. 또한 황금 추출물이 세포에 독성을 나타내지 않는 범위($0.01-1{\mu}g/mL$)에서 MC3T3-E1 세포의 ALP activity를 측정한 결과, 농도에 의존적으로 ALP activity가 증가하였으며 $1{\mu}g/mL$ 농도에서 152.0%의 ALP 활성 증가효과를 나타내었다. 황금 추출물의 최적 작용 농도 $1{\mu}g/mL$에서 골석회화 형성능을 측정한 결과, 배양 시간에 따라 계속 증가하여 배양 20일째는 대조군에 비해 223.3%의 석회화 형성능을 나타내었다. 황금 추출물의 파골세포 분화억제 효과를 알아보기 위해 황금 추출물이 세포에 독성을 나타내지 않는 범위($0.01-10{\mu}g/mL$)에서 TRAP staining한 결과, 황금 추출물은 $0.0{1\mu}g/mL$ 농도에서 대조군에 비해 파골세포 분화를 50% 이상 감소시켰으며 농도 의존적으로 TRAP 양성 세포가 감소함을 관찰하였다. 이상의 결과로 미루어 볼 때, 황금 추출물이 골다공증을 포함한 골질환 예방에 효과가 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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