Aspergillus nidulans가 생산하는 naringinase를 acrylamide gel을 이용한 entrapping moth길에 의하여 고정화하여 그 고정화 효소의 물리, 화학적인 성질에 대하여 검토한 결과 다음과 같았다. 1) Acrylamide의 농도는 10% 일때 enzyme activity가 가장 좋았다. 2) Immobilized enzyme의 최적온도는 $50^{\circ}C로서$ 유리효소의 경우보다 $10^{\circ}C정도$ 증가 하였고 최적 pH는 유리효소의 경우와 마찬가지로 pH 40이었다.(중략)
유자 착즙액에 naringiase와 탁주용 당화 효소 3% 처리 결과 naringin과 hesperidin의 함량이 61.94 mg%, 9.98 mg%에서 각각 8.43 mg%, 0.06 mg%와 6.58 mg%, 1.11 mg% 감소하였다. Hunter value를 측정한 결과 적색도/녹색도(a값)는 효소처리구 모두 대조구보다 높게 나타났고, 황색도(b값)와 명도(L값)는 탁주용 당화 효소가 가장 높았다. 복합 효소 처리후 실제 관능적으로 고미제거에 대한 효과와 선호도를 조사한 결과는 각 제조사별 복합효소를 처리한 시료구가 대조구보다 전체적으로 선호도가 높았고, naringin의 함량이 적을수록 기호도는 증가하였다. 호소의 최적 첨가량은 3% 내외가 바람직한 것으로 사료된다.
Naringinase 생산 균주로 분리 선정된 Asp. niger S-1은 동시에 Hesperidinase도 강력히 생산함이 확인 되었으며 이 균의 효소학적 특성을 요약하여 1. 최적 반응 온도는 $60^{\circ}C이며$$80^{\circ}C에서$ 30분 열처리 하여도 65%을 활성을 가지며 pH 5.0부위에서 최적반응과 안정성을 보였으며 Mg(이온)은 반응을 활성화 하였다. 2. Aceton을 60% 처리하여 조효소를 11배 정제하였으며 35%가 회수되었고 유안 0.4-0.6 포화로 48배 정제되었으며 13%가 회수되었다.
산업상 이용에 적합한 분리 선정된 Naringinase 생산 균주인 Asrpergillus niger S-1은 동시에 Hesperidinase를 강력히 생산함이 확인되었으며 이 균주가 생산하는 Hesperidinase의 효소학적 성질을 요약하면 다음과 같다. 1. PH 4.0에서 30분간 반응 시켰을때 최적 온도는 6$0^{\circ}C$ 이었으며 최적 작용 pH는 5.0이었으나 pH 3.0에서는 70% 활성을 보였다. 2. pH 4.0에서 30분간 열처리 하였을 경우 6$0^{\circ}C$로 열처리한 결과 90%, 7$0^{\circ}C$일 경우 70%, 8$0^{\circ}C$일 경우 65%의 활성을 가지는 비교적 내열성 효소이었다. 그리고 pH에 대한 안정성은 4$^{\circ}C$에서 24시간 보존한 결과 pH 5.0일 경우 가장 안정 하였다. 3. $Mg^{++}$ 이온은 1$\times$$10^{-2}$M 이하부터는 활성화하였으나 Cu$^{++}$ Mn$^{++}$ Pb$^{++}$ Mo$^{++}$ Ag$^{++}$ Hg$^{++}$등은 저go 하였다. 4. 효소를 Aceton 처리할 경우 60% Aceton 처리에서 배양 추출물의 경우 보다 11배 전제되었으며 35%가 회수 되었으며 40%의 Aceton 처리일 경우 10배 정제되었으며 5.6%가 회수 되었다. 5. 배양 추출 효소를 유안으로 염석할 경우 0.4.~0.6 분획 침전 시킬 경우 48배 정제되었으며 처음 효소의 13%가 회수되었고 0.6~0.8포화 분획에서도 19%가 회수되었고 25배 정제되었다. 6. Hesperidinase 생성은 약간량의 밀감 과피 추출물의 첨가로 현저히 증가 하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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