Ion beam assisted deposition (IBAD) was successfully used to produce a dense and ultra-adherent Hydroxyapatite (HA) film on titanium alloy and alumina. Recently it is also proved that the HA coatings on alumina substrate treated with 20 ppm $AgNO_3$ had the structure of $(Ag, Ca)_10(PO_4)6(OH)_2$, which exhibited excellent antimicrobial effects. The present paper aims to morphlogically characterize the adhesion of macrophages on newly developed Ag-HA coated alumina and Ti6A14V substrates and to evaluate the biocompatibility of the coatings in vitro. It can be found that the cell number on alumina of the concentration of $AgNO_3$ in the treatment, the cell number on Ag-HA coatings decreased. Up to 20 ppm $AgNO_3$ by Ag-treatment, the morphological development of the cells on Ag-HA coating was similar to that of the cells on HA coating, suggesting the biotolerance of the Ag-HA coatings.
B-Amylase was obtained from sweet potato extract in a crystalline state by dialysis against water after precipitated with acetone according to the method reported previously followed by DEAE Sephadex A-50 ion exchange chromatography plus gel chromatography of Sephadex G-200. The purified enzyme was homogeneous by SDS PAGE. The efforts had done to remove the miner bands in SDS PAGE by Sephadex G-200 gel chromatography, DATE Sephadex A-50 ion exchange chromatography. isoelectrophocusing, affinity chromatography, hydroxyapatite chromatography, recrystallizstion and HPLC on a column of TSK gel SW 3000 but have given any result. But, N -terminal amino acid of the enzyme was revealed mainly alanine and trace of glycine and glutamic acid. Therefore, it seems that the miner bands in SDS PAGE have a role of subunit.
A $C_{1}$ enriched cellulase fraction was separated from culture filtrate of anaerobic Clostridium thermocellum by hydroxyapatite column chromatography. The separated fraction showed strong synergistic action with $C_{x}$ component (endo-$\beta$-1, 4-glucanase) in digestion of crystalline cellulose, similar to the other aerobic cellulolytic microorganisms. Unlike the $C_{x}$ component the $C_{1}$ enriched fraction was rapidly inactivated by oxidation at the atmospheric condition. The enzyme activity was significantly enhanced by the addition of reducing agents, especially $\beta$-mercaptoethanol, which indicates that a $C_{1}$ component has a lot of sulfhydryl groups essential for the enzyme activity. The effect of metal ions on $C_{1}$ activity was also investigated. The $C_{1}$ fraction was found to be thermally stable compare to endo-$\beta$-1,4-glucanase. Optimal temperature and pH were found to be 60.deg.C and 6.0, respectively.
Recently ion beam assistant deposition (IBAD) was successfully used to produce a dense ultra-adherent and pinhole-free hydroxyapatite (HAp) layer on alumina substrate. After that the HAp-coated alumina was immersed in 20ppm and 100ppm $AgNO_3$ solution at room temperature for 48 hours to carry out the ions exchange between $Ag^+\;and\;Ca^+$ in HAp. The obvious antimicrobial effect against E.Coli, P. Aeruginosa and S. Epidermidis was observed in the samples treated with 20ppm $AgNO_3$ Solution, In contrast to this the untreated samples did not show any bactericidal effect. Scanning electron microscope(SEM) study showed that Ag homogeneously distributed on the surface. X-ray diffraction (XRD) demonstrated that the surface structure in the samples without Ag was HAp whereas with Ag is HAp and AgCaP. It appears that silver ions exchange with calcium ions in HAp does not cause significant changes in the structure of HAp coatings.
A novel and convenient electrochemical method has been developed for sensitive determination of melamine (MEL) using ascorbic acid (AA) as the recognition element. The working electrode employed in this method was modified with the nanocomposite of hydroxyapatite/carbon nanotubes to enhance the current signal of recognition element. The interaction between MEL and AA was investigated by fourier transform infrared spectroscopy and cyclic voltammetry, and the experimental results indicated that hydrogen bonding was formed between MEL and AA. Because of the existing hydrogen bonding and electrostatic interaction, the anodic peak current of AA was decreased obviously while the non-electroactive MEL added in. It illustrated that the MEL acted as an inhibitor to the oxidation of AA and the decreasing signals can be used to detect MEL. Under the optimal conditions, the decrease in anodic peak current of AA was proportional to the MEL concentrations ranging from 10 to 350 nM, with a detection limit of 1.5 nM. Finally this newly-proposed method was successfully employed to detect MEL in infant formula and milk, and good recovery was achieved.
Kamel, Nagwa A.;Mansour, Samia H.;Abd-El-Messieh, Salwa L.;Khalil, Wafaa A.;Abd-El Nour, Kamal N.
Advances in materials Research
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제4권3호
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pp.145-164
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2015
Biodegredable and injectable nanocomposites based on polypropylene fumarate (PPF) as unsaturated polyester were prepared. The investigated polyester was crosslinked with three different monomers namely N-vinyl pyrrolidone (NVP), methyl methacrylate (MMA) and a mixture of NVP and MMA (1:1 weight ratio) and was filled with 45 wt% of hydroxyapatite (HA) incorporated with different concentrations of chemically treated natural bone powder (NBP) (5, 10 and 15 wt%) in order to be used in treatment of orthopedics bone diseases and fractures. The nanocomposites immersed in the simulated body fluid (SBF) for 30 days, after the period of immersion in-vitro bioactivity of the nanocomposites was studied through Fourier transform infrared (FTIR), scanning electron microscope (SEM), energy dispersive X-ray (EDX) in addition to dielectric measurements. The degradation time of immersed samples and the change in the pH of the SBF were studied during the period of immersion.
The palmitoyl acyl carrier protein (ACP) specific thioesterase (EC 3.1.2.14) from Iris pseudoacorus was purified and characterized. The thioesterase which was very unstable in relatively high salt concentrations was eluted using a co-gradient of Triton X-100 and low concentration of KCl or Na-phosphate from Q-Sepharose, DEAE-Sepharose, and hydroxyapatite chromatography. SDS-PAGE analysis showed a single band with a molecular weight of 35,000. The native molecular weight of approximately 37,000 was estimated by Sephacryl S-200 chromatography, indicating that the enzyme is a monomer. The thioesterase activity was inhibited about 75% and 50% by N-ethylmaleimide (2 mM) and phenylmethylsulfonyl fluoride (2 mM). respectively. The N-ethylmaleimide-inactivation was protected by sodium palmitate but the inactivation with phenylmethylsulfonyl fluoride was not protected. Oxidation of thiols by 2 mM 5.5'-dithio-bis-(2-nitrobenzoic acid) resulted in 65% inactivation of the enzyme. These results suggest that a cysteinyl residue is essential to the catalytic reaction of the enzyme. The enzyme activity was increased by sodium citrate and also by $Cu^{2+}$
유아기 우식증을 예방하기 위한 연구의 일환으로 이유식의 우식유발능을 생체외 방법으로 연구하였다. 국내에서 시판되는 5종의 이유식을 실험군으로 하고 10% 자당용액과 우유를 대조군으로 하였다. 시료용액 50ml의 pH를 4.0까지 낮추는데 소모된 0.1 N 유산용액의 양으로 완충능을 측정하였고, Streptococcus mutans 10449의 배양액을 접종하여 48시간 배양하기 전과 후에 각각 시료용액의 pH, 시료용액 속에 담근 유치 법랑질시편의 표면미세경도, 합성 hydroxyapatite로부터 용출된 칼슘이온의 농도를 측정하여 산 생성능과 탈회능을 평가하였다. 이유식의 완충능은 자당용액보다 크고 우유보다 작았으며, 이유식간에 유의한 차이가 있었다(P<0.01). 48시간 배양 후 이유식의 평균 pH는 3.88로서 자당용액의 4.35, 우유의 4.20보다 낮았고 자당용액과 유의 한 차이가 있었으며 (P<0.05), 이유식 상호간에도 유의한 차이가 있었다(P<0.01). 배양 전후의 유치 법랑질 표면미세경도의 차이는 이유식군이 평균 98.7 VHN로서 자당용액군의 97.1 VHN과 비슷하였고 우유군의 63.5 VHN보다 컸으나 차이가 유의하지 않았다. 합성 hydroxyapatite로부터 용출된 칼슘농도의 차이는 이유식군이 평균 1816.02ppm로서 자당용액군의 2235.98ppm보다 작았으나 차이가 유의하지 않았다.
한국 전통누룩으로부터 분리한 신종 Aspergillus coreanus NR 15-1가 생산하는 a-amylase의 효소학적 특성을 조사했다. 공시균주가 생산하는 a-amylase는 황산암모늄을 이용한 분별 침전, CM-cellulose, DEAE-cellulose, Sephadex G-100, hydroxyapatite column chromatography를 통하여 8.7%의 수율을 보이며, 78배로 정제되었다. 공시균주의 a-amylase의 분자량은 Sephadex G-100 겔 여과에 의해 49 kDa으로 나타났으며, SDS-PAGE에 의하여 51 kDa으로 측정되어 본 효소는 monomer로 추정할 수 있었다. 정제효소는 pH 4.0∼11.0 사이에서 안정하였으며, 반응최적 pH는 5.0이었고, 5$0^{\circ}C$ 이하의 온도에서 비교적 안정하며, 반응최적온도는 45$^{\circ}C$로 나타났다. 정제효소는 금속이온에 의해 효소활성에 영향을 받지 않았으나, N-bromosuccinimide에 의해서는 효소활성이 완전히 저해되어 본 공시균주의 a-amylase의 활성부위에는 tryptophan 잔기가 관여한다고 추정할 수 있었다. 정제효소의 전분분해물은 maltose, maltotriose 등의 oligosaccharide를 형성하므로 a-amylase임을 확인할 수 있었다. 신종 누룩시상균인 Aspergillus coreanus NR 15-1의 a-amylase는 5$0^{\circ}C$ 이하의 온도와 pH 4.0∼11.0사이에서 안정하여 온도와 pH의 안정성이 우수하여 누룩제조용 사상균으로 사용이 가능함을 알 수 있었다.
이번 연구의 목적은 하이드록시아파타이트를 이용하여 블라스팅 처리한 뒤 양극산화 방법을 이용하여 하이드록시아파타이트와 이산화티탄이 복합된 표면을 만들고, 이에 대해 세포부착양상을 관찰하고 ALP 활성도와 칼슘 침착량을 측정함으로써 세포 분화능을 평가하여 표면의 생체적합성을 평가하는 데 있다. 이를 위해 실험을 진행한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 접촉각 분석 결과, 복합처리된 HA+100과 HA+MAO 150은 유의하게 낮은 접촉각을 나타내었다(p<0.05). 세포부착 관찰 결과 연마 처리한 SM 시편에서는 납작한 모양으로 세포가 붙어있는 모습을 관찰할 수 있었으나, 표면 처리된 실험군에서는 세포의 모양이 시편을 따라 좀 더 길게 뻗어 부착된 모습을 관찰할 수 있었다. ALP 활성도 측정 결과 HA+MAO 150과 HA+MAO 200은 1, 2, 3주 모든 기간에서 가장 높은 ALP 활성도를 나타내었다(p>0.05). 칼슘양 측정 결과 HA+MAO 150 과 HA+MAO 200은 1, 2, 3주 모든 기간에서 가장 많은 칼슘양을 나타내었다(p<0.05). 따라서 하이드록시아파타이트 이산화티탄이 복합 코팅된 표면은 높은 표면에너지를 가지며 우수한 세포활성도를 나타내어 치과용 임플란트 표면으로 유용하게 사용될 수 있을 것이라고 생각된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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