Aloe in vitro culture was attempted to induce callus and regeneration ability from different explant sources onto MS medium with 0.5mg/l NAA plus 1.0mg/l BA. Anthers that no developed any callus and plant regeneration, while only four out of 274 filament explants induced calli at cut edge without regenerated plants. Twenty ovary explants regenerated four direct plantlets without via callus from the base of epidermal tissues. Regenerated plants on the root tip gave 2n=14 of chromosome numbers.
Culture of embryogenic callus and suspension were induced from rice seeds in MS2.5 medium. In hormone free N6 medium, whole plantlets were regenerated from embryogenic callus. We observed cell division and reformation of embryogenic callus on culture of protoplast isolated from embryogenic cell suspensions. In addition, we studied the influencing factors on viability of protoplast treated with electroporation. Viability was decreased according to the increase of voltage and capacitance during electroporation. An optimal level of viability was obtained after treatment with $200-300\;V/1180\;\mu\textrm{F}$ in HEM buffer at $4^{\circ}C$..
Bae, Kee Hwa;Lee, Mi Hyun;Choi, Yong Eui;Yoon, Eui Soo
Journal of Plant Biotechnology
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v.41
no.1
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pp.33-37
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2014
Lychnis wilfordii (Regel) Maxim is a rare and valued ornamental plant. Germination rate reached 46.6% when seeds were treated with $100mg{\cdot}l^{-1}$ GA (Gibberellic acid). The highest callus induction was observed in the leaf explants of the seedlings on MS medium containing specific concentrations of $0.5mg{\cdot}l^{-1}$ BA ($N^6$-benzyladenine) and $3.0mg{\cdot}l^{-1}$ NAA (a-naphthalene acetic acid). The adventitious shoot was formed in 97.3% of calli on 1/2 WPM (Woody Plant Medium) medium. Shoot elongation of in vitro propagated plantlets was no difference among various medium. The plantlets grew well after transferring to the pot. This in vitro propagation protocol should be useful for conservation of this endangered plant.
Anther and/or tissue culture of cross pollinated crops would be very important because it can result in the direct use of haploids or doubled haploids for developing superior hybrids or varieties. The objective of the study was to investigate the response frequencies in anther and/or tissue-cultured hybrids of corn. pearl millet and buckwheat to identify agronomically acceptable germplasm of the crops. 27 crosses of corn inbred lines were evaluated by plating their anthers on N6. MS and Yu-Pei media. Two genotypes of FR1l41/FR16 hybrid cultured on N6 medium and Fla 2BT73/S6013 hybrid cultured on N6 medium responded with one anther producing calli when plated after 5$^{\circ}C$ low temperature treatment for one week. Immature embryos of corn hybrid Suwon 19 responded producing calli that were regenerated to plants at a 8.6 percent success rate. Of the 20 corn hybrids. immature tessels of FR1l41/FR16. B68/A1l6N//KS15. KS16/KS17. GA209/DB578 and SDB126/GA209 crosses responded at a relatively higher success rate producing calli that were regenerated to plants. In tissue culture of elongating culms of pearl millet x Napier grass interspecific hybrid. 2.5-4.0mm long pieces of the culm were good for callus induction resulting in higher success rate. The epicotyl of buckwheat was very good for tissue culture. and the node produced the plants regenerated directly without callus induction on the B5 medium containing I ppm BA and 0.05 ppm IBA. There were great differences in response to anther and/or tissue culture of corn, pearl millet and buckwheat due to genotype x medium and environment interactions.
This study was performed to investigate the effects of various media compositions in regeneration of Lilium lancifolium. The adventitious bud initiation from microscale was the best on MS medium supplemented with BAP 1.0 mg/L and NAA 0.1 mg/L after 4 weeks of culture. However, from bulbscales, adventitious bud initiation was the best in dark condition on MS medium supplemented with BAP 0.5 mg/L and NAA 0.1 mg/L. On the other hand, callus induction was found to be the best from the microscales incubated in complete dark condition for 8 weeks on MS medium supplemented with 2,4-D 1.0 mg/L and BAP 0.1 mg/L. The highest plantlet regeneration from callus was obtained after incubation in the light condition for 8 weeks on MS medium supplemented with NAA 0.5 mg/L and BAP 0.1 mg/L. Rooting of shoots was obtained easily on MS medium and the plantlets were transferred to soil pots after 8 weeks. The chromosome analysis of the root tip cells was revealed that the callus-derived plantlets had normal chromosome number, 2n=24. No variation was observed in the morphology of the plantlets.
Kim, K.Y.;Shin, J.S.;Rim, Y.W.;Choi, K.J.;Jang, Y.S.;Kim, W.H.;Lee, B.H.;Jo, J.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.19
no.1
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pp.23-30
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1999
The conditions for callus formation and plant regeneration were confirmed in four varieties of alfalfa(Medicago sativa L.). Among four varieties of alfalfa, "Vernal" expressed the highest rate for both of callus formation and plant regeneration. Otherwise, among SH(Schenk and Hildebrandt), MS(Murachige and Skoog) and N6 medium (Chu), SH medium was highest degree of efficiencies respectively in callus formatio and plant regeneration. In this study, we determined volume of hormones and other compounds appended in media. For callus formation, only $3mg/{\ell}$ of 2,4-D (2,4-dichlorophenoxy acetic acid) was appended in their media. For plant regeneration, the three kinds of media were used; the medium appended $5mg/{\ell}$ of NAA (1-naphtalene acetic acid) and $2mg/{\ell}$ of kinetin (6-furfurylaminopurine), the medium appended $11mg/{\ell}$ of 2,4-D and $1mg/{\ell}$ of kinetin, and the medium appended $1.6g/{\ell}$ of ammonium sulfate and $5.75g/{\ell}$ of proline. We obtained alfalfa plants from callus by regeneration, about sixty five days later transfer calli to regeneration media.
In an effort to optimize tissue culture responses of Italian ryegrass(Lolium multiflorum Lam.) for future genetic manipulations to improve forage characteristics, the effects of culture medium supplements on tissue culture responses were investigated with mature seeds of three cultivars, 'Jeanne', 'Florida-80' and 'Metro', as explant tissues. For all explants, MS medium containing 5mg/L 2,4-D was optimal for embryogenic callus induction from mature seed and had a strong effect on successive plant regeneration. The optimal concentration of dicamba for the induction of embryogenic callus from mature seeds was 7mg/L. The highest plant regeneration frequency was observed when embryogenic callus was transferred to N6 medium supplemented with 1mg/L 2,4-D and 5mg/L BA. Plant regeneration frequency of callus cultured in the dark was higher than that of cultured in the light. Casein hydrolysate and L-proline improved both in embryogenic callus induction from mature seeds and plant regeneration. High-frequency regeneration system established in this study will be useful for molecular breeding of Italian ryegrass through genetic transformation.
JO, Man Hyun;MATSUBARA, Sachiko;KANG, Tae Jin;LEE, Eun Mo;WOO, In Sik
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.25
no.4
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pp.219-223
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1998
Anthers contanining uninucleate microspores of eight cultivars of pepper were cultured on MS medium supplemented with 0.004mg/L 2,4-D and 0.1mg/L kinetin, 3% sucrose and 0.2% Gelrite, kept at $35^{\circ}C$ for 24 h, and then cultured at $25^{\circ}C$ with a photoperiod of 16 h daylight for 40 days. Frequency of embryoid and callus formation was varied with cultivars. Embryoid formation was found in Cheongyang and Fushimi Amanaga, while callus formation was in California Wonder, Fushimi Amanaga and Geoseong. In anther culture medium supplemented with 1% activated charcoal, embryoid formation was found with 0.5% of frequency only in Cheongyang, while no callus formation was found. In 1/2MS medium, frequency of embryoid formation in Shishitou, Yatsufusa and Taka no Tsume was 1.2%, 0.4% and 0.4%, respectively. On the other hand, in 1/2 B5 medium, frequency of callus formation in Yatsufusa and Taka no Tsume was 2.8% and 2.7%, respectively. Embryoids transferred to hormone-free MS medium were developed to plantlets and acclimatized. The number of chromosomes in the root tip cells of the haploid plant was 2n=$\times$=12 in cv. Cheongyang.
Protoplasts, isolated from leaf of N. tabacum NR-/SR+ and N. glottnosa were electrofused and divided with a plating efficiency of 30∼35% in AAPI 9M medium. Green callus lines were selected in protoplast-derived colonies on MSNO3 selection medium with 1.2mg/ml streptomycin sulfate on the basis of nitrate reductase proficiency and streptomycin resistance. Four putative hybrid plant lines regenerated from the green callus lines had intermediate morphology between that of parents with respect to floral shape, corolla length and ovate leaf blade. Zymograms of leaf peroxidase and esterase from these putative hybrid plant lines showed isozyme profiles derived from both parents and also, they exhibited additional and lost bands. Cytological analysis of two putative hybrid plant lines gave chromosome counts of 2n=66 in L22 and 2n=54 in L44 which were less than the expected number of N. tabacum(2n=48) and N. glutinosa(2n=24).
Effects of two auxins, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and a-napthaleneacetic acid (NAA) on nicotine production during callus culture of a wild tobacco (Nicotiana glauca) were investigated using a high performance liquid chromatography (HPLC). The high concentration ($11.5\;\mu\textrm{M}$)of 2,4-D and NAA had peaks of nicotine contents at 4th and 2nd week, respectively. Thereafter, the concents decreased and the nicotine was metabolized to other alkaloids. The low concentration ($1.5\;\mu\textrm{M}$) of 2,4-D on the medium supplemented with 0.1 mM of L-aspartic acid or L-arginine inhibited nicotine production. However, the low NAA promoted it only when the medium was supplemented with L-aspartic acid. From these results, it could be concluded that both auxins exhibit different action mechanisms on nicotine production pathway and the low NAA promotes the activities for the pathway with L-aspartic acid as a precursor.cursor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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