Mycobacterium sp. strain JCl DSM 3803 grown in methanol showed no methanol dehydrogenase or oxidase activities found in mast methylotrophic bacteria and yeasts, respectively. Even though the methanol-grown cells exhibited a little methanol-dependent oxidation by cytochrome c-dependent methanol dehydrogenase and alcohol dehydrogenase, they were not the key enzymes responsible for the methanol oxidation of the cells, in that the cells contained no c-type cytochrome and the methanol oxidizing activity from the partially purified alcohol dehydrogenase was too low, respectively. In substrate switching experiments, we found that only a catalase-peroxidase among the three types of catalase found in glucose-grown cells was highly expressed, in the methanol-grown cells and that its activity was relatively high during the exponential growth phase in Mycobacterium sp. JCl. Therefore, we propose that catalase-peroxidase is an essential enzyme responsible for the methanol metabolism directly Of indirectly in Mycobacterium sp. JCl.
Tuberculin positive cattle without gross tubercle lesions should be confirmed by the bacteriological examination to determine the state of the infection. To overcome the time-consuming and laborious identification by culture and biochemical tests, polymerase chain reaction (PCR) has been used to identify Mycobacterium bovis. Due to various lipids in the cell wall of Mycobacterium spp, novel methods of DNA extraction from Mycobacterium spp have been developed. In this study, a newly developed guanidium isothiocyanate/silica DNA extraction method was directly applied to specimens from the tuberculin positive cattle. DNAs were directly extracted from the lymph nodes and the major polymorphic tandem repeat (MPTR) and mycobacterial protein of BCG 70 (MPB70) were amplified using PCR. The DNA extraction method using guanidium isothiocyanate/silica was efficient and safe, and the MPTR and MPB70 primers were specific to M bovis. Therefore, MPTR and MPB70 PCRs will be useful for the detection of M bovis in the lymph node from skin-test positive cattle.
In this study, homogenized mixture of tubercle and pulmonary lymph node showed up tuberculin(PPD) positive dairy cattle was inoculated in experimental animal, and was cultured on medium(Lowenstein Jensen medium, 3% Ogawa). The results obtained through the survey were sumerized as follows ; 1. In experimental animal, goat and rabbits were decreased body weight(25∼28%) and died in 90 days with severe pathogenicity. Rats are slight pathogenicity. 2. Goat, rabbits and rats showed up severe lesions In lung, rabbits was also lesions other organs (kidney, appendix, ileocecum, and I lymph node). 3. Mycobacterium was grown between 5 weeks and 8 weeks on Lowenstein Jensen medium and 3% Ogawa medium. 4. Biochemical test of Mycobacterium cultured on medium was that niacin, nitrate reduction, tween 80 hydrolysis and catalase test were negative, but that urease test was positive. Therefore it was Mycobacterium bovis (M. bovis).
RNA 기반 연구에서 고품질의 RNA 추출은 상당히 중요하다. Mycobacterium tuberculosis는 세포벽에 mycolic acid가 풍부하여 두껍고 왁스와 같은 성질을 띈다. 이로 인해 용균이 쉽지 않아 RNA 추출이 어렵다. TRIzol 시약과 silica bead를 이용한 균 파쇄를 통하여 높은 수율의 RNA가 추출이 가능하였다.
Hamidieh, Faezeh;Farnia, Parissa;Nowroozi, Jamileh;Farnia, Poopak;Velayati, Ali Akbar
Tuberculosis and Respiratory Diseases
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제84권1호
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pp.1-12
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2021
Mycobacterium tuberculosis has infected more than two billion individuals worldwide, of whom 5%-10% have clinically active disease and 90%-95% remain in the latent stage with a reservoir of viable bacteria in the macrophages for extended periods of time. The tubercle bacilli at this stage are usually called dormant, non-viable, and/or non-culturable microorganisms. The patients with latent bacilli will not have clinical pictures and are not infectious. The infections in about 2%-23% of the patients with latent status become reactivated for various reasons such as cancer, human immunodeficiency virus infection, diabetes, and/or aging. Many studies have examined the mechanisms involved in the latent state of Mycobacterium and showed that latency modified the expression of many genes. Therefore, several mechanisms will change in this bacterium. Hence, this study aimed to briefly examine the genes involved in the latent state as well as the changes that are caused by Mycobacterium tuberculosis. The study also evaluated the relationship between the functions of these genes.
In a microbial cell-free extract system, side chain cleavage on various sterols and steroids was tested. The cell-free extracts of Mycobacterium sp. NRRL B-3805 showed the side chain cleavage activity on lithocholic acid to form 5$\beta$-androstan-3.17-dione. The properties of the activity were examined.
A mutant was selected by NTG treatment of Mycobacterium sp. NRRL B-3805, which was capable of degrading plant sterol to androsta-4-ene-3, 17-dione and yields was higher than NRRL B-3805. Also this mutant produced androst-4-ene-3, 17-dione faster than NRRL B-3805. It described the mode of sitosteroidal degradation, and the interrelation between cell membrane and its attachment to substrate during the sterol degradation process by this mutant and it was compared with Mvcobacterium sp. NRRL B-3805.
Mycobacterium sp. strain JC1 was capable of growth on benzylamine as a sole source of carbon and energy. The primary deamination of benzylamine was mediated by an inducible amine oxidase, which can also oxidize tyramine, histamine, and dopamine. Inhibitor study identified this enzyme as a copper-containing amine oxidase sensitive to semicarbazide.
Slow-growing pathogenic mycobacterium species, including Mycobacterium bovis BCG, secrete a large amount of glutamine synthetase into culture media. Extracellular and intracellular glutamine synthetases were purified from M. bovis BCG. While the native molecular weights of both glutamine synthetases were estimated to be 370.2 kDa, those of the subunits were 61.7 kDa, indicating that the native forms were composed of 6 subunits. The enzymes showed a hhigh thermal stability and high degree of sequence similarity with the glutamine synthetase from M. tuberculosis in the N-terminal amino acid sequence. Western blotting analysis indicated that the antibodies prepared against both the extracellular and intracellular enzymes exhibited common antigen determinants.
A carboxydotrophic bacterium, isolated from a soil sample in Seoul, was classified initially as Acinetobacter sp. strain JC1 DSM 3803. Chemotaxanomic properties, analysis of the 16s rDNA sequence, fatty acid content, and molecular Phylogenetic analysis based on rpoB gene, however, suggested that this bacterium belongs to the genus, Mycobacterium. On the basis of this evidence, it is proposed that Acinetobacter sp. strain JC1 DSM 3803 be reclassified as Mycobacterium sp. strain JC1 DSM 3803.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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