버섯배지의 발효를 효율적으로 행하면서 버섯의 재배 시 빈번하게 발생하는 푸른곰팡이 병의 원인 균주인 Trichoderma sp. 곰팡이 성장을 억제하는 세균의 분리를 행하였다. 균원시료로부터 1차 분리한 약 200여 균주 중에서 성장속도가 빠르고, SM, AM 및 CM의 평판배지 상에서 clear zone이 뚜렷한 6균주를 2차 분리하였다. 분리한 6균주 중 cellulase, amylase 및 protease의 효소활성이 높고 T. virens와 T. harzianum에 대하여 강한 항균활성을 나타낸 C-1균주를 최종 분리균주로 선정하였다. 분리한 C-1균주는 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology에 의한 동정과 16S rDNA 염기서열 분석을 행한 결과 Paenibacillus polymyxa 밝혀져 P. polymyxa CK-1으로 명명하였다. P. polymyxa CK-1균주의 생육조건을 검토한 결과 최적배양온도는 $45^{\circ}C$, 생육을 위한 배지의 최적 pH는 6.0~7.0 범위로 나타났다. T. virens와 T. harzianum 곰팡이의 생육억제를 위한 P. polymyxa CK-1의 배양시간은 22~36시간이 적당하였다. 그리고 P. polymyxa CK-1균주의 24시간째 배양용액을 처리한 petri dish에 두 곰팡이를 각각 접종한 후 10일 동안 방치하여도 곰팡이의 생육은 관찰되지 않았다. P. polymyxa CK-1 균주가 생산한 길항물질의 열안정성을 검토한 결과 $60^{\circ}C$ 및 $100^{\circ}C$로 20분 동안 처리한 시험구에서는 두 곰팡이의 균사성장이 전혀 관찰되지 않았지만 $121^{\circ}C$에서 20분 동안 처리한 시험구에서는 약간의 균사성장이 관찰되었다. P. polymyxa CK-1배양액이 버섯균사 생육에 미치는 영향을 검토한 결과 팽이버섯, 표고버섯 등의 다양한 버섯균사 생육에 전혀 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.
Anthracnose caused by Colletotrichum gloeosporioides has been destructive during pepper fruit production in outdoor fields in Korea. In vitro antifungal activities of 15 different plant essential oils or its components were evaluated during conidial germination and mycelial growth of C. gloeosporioides. In vitro conidial germination was most drastically inhibited by vapour treatments with carvacrol, cinnamon oil, trans-cinnamaldehyde, citral, p-cymene and linalool. Inhibition of the mycelial growth by indirect vapour treatment with essential oils was also demonstrated compared with untreated control. Carvacrol, cinnamon oil, trans-cinnamaldehyde, citral and eugenol were among the most inhibitory plant essential oils by the indirect antifungal efficacies. Plant protection efficacies of the plant essential oils were demonstrated by reduced lesion diameter on the C. gloeosporioides-inoculated immature green pepper fruits compared to the inoculated control fruits without any plant essential oil treatment. In planta test showed that all plant essential oils tested in this study demonstrated plant protection efficacies against pepper fruit anthracnose with similar levels. Thus, application of different plant essential oils can be used for ecofriendly disease management of anthracnose during pepper fruit production.
Imidazole계(系) 농약(農藥)인 prochloraz와 triazole계(系)인 triadimefon의 사과나무 부란병균(腐爛病菌)(Valsa ceratosperma)에 대한 항균력(抗菌力) 및 지방산(脂肪酸)의 조성변화(組成變化)에 미치는 영향(影響)을 조사(調査)한 결과(結果)는 다음과 같다. 균(菌)이 생육(生育)하고 있는 PS액체배지(液體培地)에 두 약제(藥劑)를 각각(各各) 처리(處理)하였을 때의 $I_{50}$값은 prochloraz의 경우는 1~5ppm이었고 triadimelon은 5~10ppm이었으며 prochloraz의 저해능(沮害能)이 다소 높았다. 균사(菌絲)의 현미경(顯微鏡) 관찰결과(觀察結果) 약제(藥劑) 처리구(處理區)에서는 모두 균사(菌絲)의 이상생육현상(異常生育現象)이 관찰(觀察)되었다. 균체(菌體)에 약제(藥劑)를 처리(處理)함으로 인해서 지질(脂質)의 변화(變化)를 조사(調査)한 결과(結果) 균체중(菌體中)의 총지질(總脂質) 및 지방산(脂肪酸)의 함량변화(含量變化)는 없는 것으로 나타났다.
This study was conducted to develop an integrated disease management system against large patch disease. Attempts were made to estimate the effect of calcium hydroxide, silicate fertilizer and urea on the mycelial growth of Rhizoctonia sotani AG2-2 and the development of large patch in vitro and in vivo and to establish the most promising combination of fertilizer, fungicide and antagonistic microbes. 1.The mycelial growth of Rhizoctonia sotani AG2-2 were completely inhibited at 2,000, 1,000 and 3,000ppm concentration by calcium hydroxide, silicate fertilizer and urea, respectively. Inhibition effect of silicate fertilizer was the highest, but that of urea was the lowest compared with other treatments. 2.Treatment of calcium hydroxide at rate of l00g /$m^2$ was the most effective, and control effect appeared from 30 days after treatment in spring, which was better in autumn than in spring. Silicate fertilizer treated at rate of l00g /$m^2$, 200g /m$^2$, in spring and 50g /$m^2$ in autumn were very effective. Urea at rate of 30g /$m^2$ was more effective than 60g /m$^2$ and 120g /m$^2$. 3.The efficacies of mepronil and toclofos-methyl, applied twice in spring and once in autumn, were 83.8% in spring, which persisted to 70% in autumn compared with untreated plot. 4.The efficacies of Trichoderma harzianum were the highest by 55% in spring, but those of Bacillus amyloliquefaciens BL-3 and Peudomonas putida were the highest by 80% in autumn among other antagonists tested, when two organisms were applied twice in spring and once in autumn.
Podosphaera fusca에 의한 멜론 흰가루병은 우리나라에서 멜론의 심각한 식물병 중의 하나이다. 본 연구에서는 선발한 길항세균의 다양한 식물병원균에 대한 균사 생육 억제 및 메론 흰가루병 방제에 대한 효과를 평가하였다. 16S rDNA 및 gyrA 유전자의 염기서열을 바탕으로 선발한 길항세균 Bacillus sp. M09, M70 및 M99-1을 동정한 결과 B. velezensis로 동정되었다. B. velezensis M09, M70 및 M99-1는 다양한 식물병원균에 47~69%의 균사생육 억제 효과를 보였을뿐만 아니라 흰가루병균의 발생을 현저히 감소시켰다. 본 연구에서 선발한 3균주는 멜론 흰가루병뿐만 아니라 다양한 식물병에 대한 잠재적인 생물방제제로 활용될 수 있을 것으로 생각되었다.
Acetic acid는 상온($25^{\circ}C$)에서 저온저장고에 발생하는 과실의 부패병균인 Botrytis cinerea 및 Penicillium expansum의 포자발아 및 발아관 생장 억제에 효과가 나타났다. $4.8mg{\cdot}L^{-1}$의 acetic acid 함유배지에서는 처리 12시간 후에도 B. cinerea 및 P. expansum의 포자가 전혀 발아하지 않았으며, 처리 7일 후에도 거의 생장하지 못할 정도로 완전한 균사생장 억제효과를 나타내었다. 저온($2^{\circ}C$)에서도 B. cinerea 및 P. expansum에 대해 acetic acid의 농도가 높을수록 균사생장 억제효과가 증가하였으며 $4.8mg{\cdot}L^{-1}$를 함유한 배지(PDA)에서는 처리한 후 20일이 경과하여도 균총이 전혀 형성되지 않았다. 저온저장고를 가동하기 전에 기존의 $SO_2(5g{\cdot}m^{-3})$ 가스와 acetic acid($4.8g{\cdot}m^{-3}$)를 처리한 저장고에서 출현하는 균의 발생을 감소시켰다. 그러나 실제 적용시 인체에 대한 자극성이 있다는 점에 대한 보완책이 필요할 것으로 생각되었다.
Essential oils (EOs) have been shown to be plant-extracted antimicrobial agents. However, there are limited studies investigating the efficacy of EOs against pathogens. Among them, tea tree oil (TTO) is extracted from Melaleuca alternifolia, which is also used as an antifungal agent. In this study, the effect of TTO was investigated on the suppression of melon powdery mildew caused by Podosphaera xanthii and tomato leaf mold disease caused by Passalora fulva. Both powdery mildew and leaf mold diseases were significantly suppressed by a spray of TTO. Eighty percent of powdery mildew and 81% of leaf mold disease of the control value were suppressed by 0.5% TTO liquid, when sprayed 3 times every 7 days on the melon and tomato leaves. Inhibition of mycelial growth was also greatly affected by different concentrations of TTO against four different fungal pathogens. Ninety-eight percent of Pseudocercospora fuligena, 97% of P. fulva, 95% of Botrytis cinerea, and 94% of Phytophthora infestans mycelial growth were inhibited by 0.2% to 1.0% of TTO contained in plate media, respectively. However, phytotoxicity in plants by the TTO treatments was revealed when melon and tomato leaves were sprayed with a 1% and 2% concentration of TTO, respectively. Therefore, our findings show that TTO has high antifungal effects against various plant pathogens that occur during crop cultivation. We also suggest that when applying TTO to plant leaves, it is necessary to establish an accurate treatment concentration for different crops.
This study was carried out to assess the antidermatophytic potential of the ethyl acetate(EtOAc) extract of the marine isolate of Aspergillus sp.. The fungus was isolated by serial dilution, and was identified Aspergillus sp.. The EtOAc extract of the fungus was examined to evaluate the antidermatophytic efficacy against the fungal pathogens infecting human skin using the disc diffusion and MIC(minimum inhibitory concentration) determination methods. The EtOAc extract($5{\mu}l\;disc^{-1}$) was considered to have the antidermatophytic activity based on the inhibition percentage of the mycelial growth of the fungi tested such as Trichophyton mentagrophytes KCTC 6085, Microsporum canis KCTC 6591, Microsporum canis KCTC 6348, Trichophyton rubrum KCTC 6352, Microsporum canis KCTC 6349 and Trichophyton mentagrophytes KCTC 6316. The percentage of the inhibition ranged from 54% to 81, and the MIC obtained was 62.5, 62.5, 250, 125, 125, and $125{\mu}g\;ml^{-1}$, respectively. The extract had a strong detrimental effect on the spore germination of the tested skin infectious pathogens. These findings strongly support the role of the ethyl acetate extract as a potential antidermatophytic agent.
새로운 건강기능성 식품소재를 개발하고자 현미, 가시오가피 및 인진쑥을 기질로 하여 큰느타리버섯 균사의 고체배양 조건을 검토하였으며, 배양산물의 성분분석 및 추출물의 ACE 저해 활성을 조사하였다. 가시오가피와 인진쑥을 현미배지에 첨가시 농도가 증가함에 따라 균사의 생육속도는 감소하였으며, 특히 가시오가피의 첨가가 인진쑥에 비해 큰느타리 균사의 생육에 미치는 영향이 컸다. 배양산물의 성분분석 결과, 수분함량은 $10.9{\sim}12.0%$ 범위이었고, 조단백질, 지질 및 섬유질은 현미배지에서 가장 높았으며, 무기질(칼슘, 칼륨 및 인) 함량은 가시오가피 첨가배지가 가장 높았다. 추출수율은 인진쑥 첨가배지가 4.80%로 가장 높았으며, 추출물의 pH는 현미배지가 pH 6.1로 가장 낮았다. 세가지 시료 추출물의 명도는 $85.8{\sim}87.1$ 범위이었고, 적색도는 현미와 가시오가피 첨가배지가 높았으며, 반면, 황색도는 인진쑥 첨가배지가 가장 높았다. 당 성분을 thin layer chromatography로 분석한 결과, 세가지 시료 모두 2개의 spot가 검출되었고, 이들은 각각 glucose와 maltose로 판단되었다. Angiotensin converting enzyme에 대한 저해율을 측정한 결과, 가시오가피 첨가배지가 시료농도 $0.2{\sim}1.0\;mg/ml$에서 가장 높은 활성을 나타내었다.
In vivo와 in vitro 생물검정법에서의 활성관계를 조사하고 또한 보다 효율적인 in vitro 검정법을 개발하기 위하여 작용기구가 다른 두 계열 살균제 즉 sulphamide계 (dichlofluanid와 tolylfluanid)와 dicarboximide계 살균제 (iprodione, vinclozolin 및 procymidone)을 시험약제로 하여 본 실험을 수행하였다. Dichlofluanid, tolylfluanid, iprodione, vinclozolin procymidone의 토마토 유묘에서의 병 방제효과는 유사하였다. 그러나 이들 살균제에 대해 in vitro 생물검정법으로 항균활성을 비교한 결과, sulphamide계 살균제는 포자발아 억제실험에서 높은 활성을 나타낸 반면에, dicarboximide계 살균제는 균사생장 억제실험에서 항균활성이 더 우수하였다. 그러므로 in vivo 병 방제효과가 유사하더라도 작용기구가 다르면 in vitro 생물검정법에서의 항균활성은 다르게 나타남을 알 수 있었다. 또한 포자현탁액을 넣은 96-well microtiter plate에 약제를 처리하고 3시간 배양 후 배양액을 제거하고 다시 새 배지를 넣어 배양한 후 생장억제를 조사한 실험 (microtiter plate method I, MPM I)에서는 살균제들의 포자발아 억제실험과 유사한 경향의 활성을 보였다. 96-well microtiter plate에서 포자현탁액을 6시간 동안 배양하여 포자를 발아시킨 후에 약제를 처리한 실험(microtiter plate method II, MPM II)에서의 항균활성은 균사생장 억제효과와 일치하는 경향을 보였다. 따라서 기존의 in vitro 항균활성 실험보다 편리하고 효율적인 MPM I과 II 방법은 각각 포자발아와 균사생장 억제실험을 대신할 수 있으리라 생각되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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