Zinjarde, Smita S.;Kale, Bhagyashree V.;Vishwasrao, Paresh V.;Kumar, Ameeta R.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권9호
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pp.1522-1528
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2008
The morphogenetic behavior of a tropical marine Yarrowia lipolytica strain on hydrophobic substrates was studied. Media containing coconut oil or palm kernel oil (rich in lauric and myristic acids) prepared in distilled water or seawater at a neutral pH supported 95% of the cells to undergo a transition from the yeast form to the mycelium form. With potassium laurate, 51 % of the cells were in the mycelium form, whereas with myristate, 32% were in the mycelium form. However, combinations of these two fatty acids in proportions that are present in coconut oil or palm kernel oil enhanced the mycelium formation to 65%. The culture also produced extracellular lipases during the morphogenetic change. The yeast cells were found to attach to the large droplets of the hydrophobic substrates during the transition, while the mycelia were associated with the aqueous phase. The alkane-grown yeast partitioned more efficiently in the hydrophobic phases when compared with the coconut oil-grown mycelia. A fatty acid analysis of the mycelial form revealed the presence of lauric acid in addition to the long-chain saturated and unsaturated fatty acids observed in the yeast form. The mycelia underwent a rapid transition to the yeast form with n-dodecane, a medium-chain aliphatic hydrocarbon. Thus, the fungus displayed a differential behavior towards the two types of saturated hydrophobic substrates.
Rusty root of ginseng has been known as one of the limiting factors in ginseng production in Korea. An attempt was, therefore, made to elucidate biological and chemical natures of the rusty root, and the redox Potential of the ginseng cultivated soils were measured and compared with diseased and non-diseased soils. Reddish discoloration was most frequently observed on the epidermis of ginseng root and the pigments were accumulated in all epidermal cells of the diseased lesions. The lower the redox potential of the ginseng cultivated soil was, the more severe the rusty root was observed. Fe content in the diseased epidermis was 3 times higher than that of healthy one. Organic acids such as oxalic, malonic, succinic, and citric acids were also higher in the mss root than in the healthy one. Thin layer chromatogram of phenolic acid fractions obtained from the epidermal cells of the rusty root of ginseng exhibited 3 to 4 unidentified substances not found in the healthy root. Also lignification of the epidermal cells and the activity of phenylalanine ammonia lyase were greater in the rusty root than the healthy root. Colony formation and conidia production of F. solani, And mycelial growth and sclerotium formation of Sclerotinia sp. isolated from ginseng root were suppressed in a nutritionally minimal medium supplemented with water extract of rusty ginseng root epidermis. It is, therefore, suggested that rusty root of ginseng is caused by unfavorable rhizosphere environmental stress or stresses resulting abnormal metabolism in the root as a selfdefence mechanism of non-specific resistance responses.
The immunomodulating activity of Kp, an antitumor protein-polysacchanide preparation from the shake-cultured mycelia of Phellinus linteus, was investigated in ICR mice subcutaneously implanted wit $1\times10^6$ cells of sarcoma 180. The mice were intraperitoneally administered with Kp at a does of 100 mg/kg once daily for five consecutive days starting from 24 hrs after the tumor implantation. Ten days after the last injection, the mice were immunized with $1\times10^7$ or $4\times10^8$ sheep red blood cells (SRBC) and five days later, the antibody-forming immune response were assessed by direct hemolytic plaque assay. To an immunization does of $1\times10^7$ SRBC, the Kp-treated mice elicied a successful humoral immune response despite the turmor-burden and produced $259\times10^3$ plaque-forming cells (PFC)/spleen, while the corresponding tumor-bearing control mice showed virtually no reponse $(2.0\times10^3$ PFC/spleen) (the stimulation index=129.5). However, to an immunization dose of $4\times10^8$ SRBC, both of the control mice and Kp-treated mice showed almost the same level of strong humoral immune response. From these data it is clear that Kp effectively restores the humoral immune response of the turmor-bearing ICR mice.
본 연구의 결과는 다음과 같다. 국내외에서 수집된 아위버섯 4균주(F-1, F-2, F-3, F-4)를 공시하여 우량 균주를 선발한 결과 균사생장이 빠르고 균사밀도가 좋은 F-2 균주를 선발하였다. 선발된 아위버섯균은 MYPA배지에서 균사생장이 가장 좋았으며, 균사생장 최적 온도는 $25{\sim}30^{\circ}C$이며 $30^{\circ}C$에서 가장 빨리 자랐다. 그리고 균사배양 최적 산도는 pH 5.0~6.0 이었다. 아위버섯균의 균사생장을 위한 최적배지조성은 탄소원에서는 다당류인 soluble starch이고 그 다음으로는 maltose였으며, 최적 탄소원인 soluble starch의 적정농도는 1%(w/w)였다. 질소원에서는 yeast extract 0.25%(w/w), malt extract 0.25%(w/w)를 혼합하였을 때 가장 빠른 생장속도를 보여주었으며, malt extract 만을 첨가하였을 때는 균사생장이 극히 부진하였다. 아위버섯균의 현미경 관찰 결과 일부 세포벽의 박벽화와 침식 현상이 관찰되었지만, 이 같은 현상이 광범위하게 관찰되지 않았다는 점에서 아위버섯균에 의한 리기다소나무재의 분해는 매우 미미한 것으로 사료된다. 아위버섯균에 의해 분해된 리기다소나무재의 편광현미경 관찰 결과 일부 세포의 S3에서 복굴절성이 감소하는 것으로 나타나 아위버섯균이 부분적으로 셀룰로스를 분해하고 있음이 관찰되었다. 그러나 이 같은 복굴절성이 소멸되는 가도관은 많지 않아 아위버섯균에 의한 리기다소나무재의 셀룰로스의 분해 역시 크지 않았음을 보여주고 있다. 아위버섯균의 졸참나무재의 분해결과 리기다소나무재에 비하여 방사조직과 축방향유세포에서 분해가 상당히 이루어졌고, 목섬유에서도 부분적으로 침식과 박벽화가 상당히 진행되었음을 알 수 있었다. Bavendam Test결과 아위버섯균은 탄닌산을 분해하여 갈색의 대사물질을 형성하여 전형적인 백색부후균의 부후형태를 나타내었다.
Candidiasis is a mycosis caused by the mycelial yeast of the Candida genus which is opportunistic pathogen of humans, animals, and birds. Under some conditions such as prolonged antibiotic therapy, overcrowding, and immunosuppression, the opportunistic Candida can cause disease. Chicken candidiasis is sporadically occurred and characterized by unsatisfactory growth, listlessness, roughness of feathers, and death. A case of 23 weeks old layer with history of increased mortality and anemia was submitted to our Lab. At necropsy, the characteristic lesions were observed in the crop and proventriculus. The whitish pseudomembrane, that are peeled easily, was found in the crop. Proventriculus was swollen and the mucosa was covered with hemorrhagic exudate. The histological changes of the affected crop are epithelial hyperplasia, hydropic degeneration, and mycelia formation. Smears made from the necrotic mucosal surfaces of the crop revealed the presence of large number of yeast cells and mycelia. Pure cultures of yeast colonies were obtained from the potato dextrose agar. The yeast cells were identified as Candida albicans by gene sequencing. To our knowledge, this is the first report of candidiasis in chickens with anemia in Korea.
This study investigated the effects of mycelium and culture supernatant of Cordyceps ochraceostromat(Co) on air way hyper-responsiveness, pulmonary immune cell infiltration, and Th2 cytokine expression in animal models of atopy and asthma. After ConA(+/-) activation of mouse primary spleen cells, decreased IL-4 and IL-13 cytokine production were seen in the presence of Co mycelium extracts and culture supernatant. The asthma model involved mice sensitized to ovalbumin by i.p. injection treatment; Co mycelium extract was also injected. The atopy model was the dinitrofenylbenzene-treated mouse ear. Ear thicken ing induced by DNFB was decreased by Co mycelium extract, and the extract also inhibited lung cell infiltration in ovalbumin-induced asthmatic mice. The results thus indicated that the Co mycelial extract reduced the undesirable immune responses seen in asthma and atopy.
Fifty five species of medicinal plant materials were tested for their antifungal activity in vitro against Rhizoctonia solani AG 2-1 and Trichoderma harzianum to select plant species that can be used to improve the biocontrol efficacy of T. harzianum. Six species were effective against R. solani AG 2-1 but were also antagonistic to T. harzianum, except for Cinnamomum loureirii stem bark (CSB). CSB inhibited mycelial growth of R. solani AG 2-1 by 73.7% but showed an inhibitory effect on mycelial growth of T. harzianum by only 2.2%. Scanning electron microscophs showed that the CSB treatment resulted in deformed R. solani AG 2-1 hyphal cells, and transmission electron microscophs revealed degenerated cell structures such as degenerated cytoplasm and disentangled cell wall and the accumulation of electron-dense inclusions (asterisks) in the CSB treatment. The biocontrol efficacy of radish damping-off increased greatly following the combined treatments of T. harzianum and CSB and the combined treatment increased efficacy from 6.4-23.1% to 37.1-87.3% compared with either treatment alone. CSB did not affect T. harzianum population growth, as it was almost the same in rice-bran peat medium (culture) amended with 0.1% and 1.0% CSB powder as in non-amended medium. The formulation of T. harzianum in rice-bran peat medium amended with CSB powder reduced the severity of radish damping-off by 80.6%, suggesting that T. harzianum and CSB can be formulated as a biocontrol product for the control of R. solani AG 2-1.
한국식물병리학회 1994년도 Proceedings of International Symposium on BIOLOGICAL CONTROL OF PLANT DISEASES Korean Society of Plant Pathology
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pp.27-49
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1994
Root colonization of biocontrol agents via seed treatment was investigated and a compatible combination, Gliocladium virens G872B and Pseudomonas putida Pf3, in colonizing cucumber rhizosphere was confirmed through the study. Much higher number of fungal and bacterial propagules were detected when two isolates were inoculated together. The presence of Pf3 in root system was greatly helpful to G872B to colonize at root tip. The mechanism of this phenomenon is partially elucidated through the results of in vitro experiments and the observations of scanning electron and fluorescence microscope. Addition of Pf3 cells resulted earlier germination of G872B conidia and increased mycelial growth. And the more number of germinated conidia on seed coat, the more vigorous hypal streching and sporulation on the root surface were observed in coinoculated treatment. The propagules of G872B on the cucumber root when they were challenged against the pathogenic Fusarium oxysporum, were even higher than that of G872B treated alone, and the magnitude of such a difference was getting grater toward the root ip and the population of F. oxysporum on the root was reduced by seed inoculation of G872B. The rhizosphere competence was obviously reflected to disease suppression and plant growth promotion that induced by the given isolate. Green house experiments revealed that the combined treatment provided long-term disease suppression with greater rate and the larger amount of fruit yield than single treatments. Through this study the low temperature growing Pseudomonas fluorescens M45 and MC07 were evaluated to apply them to the winter crops in field or plastic film house. In vitro tests reveal that M45 and MC07 inhibited the mycelial growth of Pythium ultimum, Rhizoctona solani and Phytophthora capsici and enhanced growth of cucumber cotyledon in MS agar. This effect was more pronounced when the bacteria were incubated at 14$^{\circ}C$ than at 27$^{\circ}C$. And disease suppression and plant growth promotion in green house were also superior at low temperature condition. Seed treatment of M45 or soil treatment of MC07 brought successful control of damping-off and enhanced seedling growth of cucumber. The combined treatment of two isolates was more effective than any single treatment.
Antifungal properties of methyl 2-benzimidazole carbamate(BMC) were investigated using 16 fungi. Cytotoxicity test of BMC revealed that the morphology of HeLa cells was considerably deformed even at the concentrations as low as 0.1 ppm. Minimum inhibitory concentration(MIC) values of BMC for 7 fungi among the 16 tested ones were lower than $1.95{\times}10^{-4}{\mu}g/ml$, while Aspergillus flavus showed an MIC value higher than 1.0 ${\mu}g/ml$. Tolerance induction against BMC was successful only for Paecilomyces farinosus LAR10, contrary to the expectation that tolerance would be induced for the fungi having high MIC values such as Aspergillus niger ATCC 9642 and A. flavus ATCC 9643. Spore germination of A. niger ATCC 9642 was suppressed by BMC. However the mycelial growth of the fungus once germinated was not retarded at all by BMC up to 8 MIC. Addition of lanosterol provided a remedy for the reduced germination rate of A. niger ATCC 9642 spores.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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