Ultrastructural observations of mycelial and tissue phase with dimorphic fungal pathogen Coccidioides immitis were studied by electron microscopy of thin sections. 1. In mycelial phase of C.immitis contains normal cell components such as nucleus, mitochondria, endoplamsic reticulum, intracytoplasmic membrane system, cell wall and cell membrane as observed in the other encaryotic cells. 2. In tissue phase of C. immitis was larger than mycelial phase in cell size and observed much more vacuoles than mycelial phase. 3. In the contrast of mycelial phase of C. immitis, the tissue phase of cells were observed fibril form of capsular layer.
Ultrastructural observations of mycelial and tissue phase with dimorphic fungal pathogen Coccidioides immitis were studied by electron microscopy of thin sections. 1. In mycelial phase of C.immitis contains normal cell components such as nucleus, mitochondria, endoplamsic reticulum, intracytoplasmic membrane system, cell wall and cell membrane as observed in the other encaryotic cells. 2. In tissue phase of C. immitis was larger than mycelial phase in cell size and observed much more vacuoles than mycelial phase. 3. In the contrast of mycelial phase of C. immitis, the tissue phase of cells were observed fibril form of capsular layer.
Yeast-form cells of cadmium ion-tolerant Hansenula anomala B-7 were changed to mycelial cells in medium containing more than $400\mu$g/ml of cadmium. Moreover, the mycelial cells were exchanged into clumped cells in a medium containing more than $1,000\mu$g/ml of cadmium. Optimal conditions of mycelial cell formation were achieved in the presence of .$1,000\mu$g/ml of cadmium with shaking cultivation for 7 days. Glucan and mannan contents of the yeast cell wall frown with $1,000\mu$g/ml of cadmium decreased by 10% compared with those grown without cadmium. However, protein and lipid contents increased about 20% respectively. By cadmium, no significant findings in specific amino acid contents were discovered.
The unstructured model was tested to describe mycelial growth, exopolysaccharide formation, and substrate consumption in submerged mycelial culture of Paeeiliomyees tenuipes C240. The Logistic equation for mycelial growth, the Luedeking-Piret equation for exopolysaccharide formation, and LuedekingPiret-like equations for glucose consumptions were successfully incorporated into the model. The value of the key kinetic constants were: maximum specific growth rate ${\mu}m,\;0.7281\;h^{-1};$ growthassociated constant for exopolysaccharide production $(\alpha),\;0.1743g(g\;cells)^{-1}$; non-growth associated constant for exopolysaccharide production $(\beta),\;0.0019g(g\;cells)^{-1}\;;$ maintenance coefficient $(m_s),\;0.0572g\;(g\;cells)^{-1}$. When compared with batch experimental data, the model successfully provided a reasonable description for each parameter during the entire growth phase. The model showed that the production of exopolysaccharide in P. tenuipes C240 was growth-associated. The model tested in the present study can be applied to the design, scale-up, and control of fermentation process for other kinds of basidiomycetes or ascomycetes.
Compounds from Lingzhi has been demonstrated the ability for inhibiting tyrosinase (a key enzyme in melanogenesis) activity. In this study, we investigated the anti-melanogenic activity from the submerged mycelial culture of Ganoderma weberianum and elucidated the skin lightening mechanism by B16-F10 murine melanoma cells. From the cellular context, several fractionated mycelium samples exhibited anti-melanogenic activity by reducing more than 40% extracellular melanin content of B16-F10 melanoma cells. In particular, the fractionated chloroform extract (CF-F3) inhibited both secreted and intracellular melanin with the lowest dosage (25 ppm). Further analysis demonstrated that CF-F3 inhibited cellular tyrosinase activity without altering its protein expression. Taken together, our study has demonstrated that the chemical extracts from submerged mycelial culture of G. weberianum have the potential to serve as an alternative anti-melanogenic agent.
In a previous study, an extract of Clavicorona pyxidata DGUM 29005 mycelia demonstrated an inhibitory effect against enzyme-associated perceptual disorders. We have attempted to determine whether this mycelial extract is also capable of inhibiting the activities of acetylcholinesterase (AChE) and ${\beta}$-secretase (BACE) activity. Butanol, ethanol, and water extracts of C. pyxidata DGUM 29005 mycelia were shown to inhibit AChE activity by 99.3%, 93.7%, and 91.7%, respectively. The inhibitory value of the butanol extract was more profound than that of tacrine (95.4%). The ethanol extract also exerted an inhibitory effect against BACE activity; this fraction may harbor the potential for development into a pharmocotherapeutic modality for the treatment of Alzheimer's disease (AD) patients. Rat pheochromocytoma PC12 cells in culture were not determined to be susceptible to the cytotoxic activity evidenced by the mycelial extract. The ethanol extract inhibited endogenous AChE activity in PC12 cellular homogenates, with an $IC_{50}\;of\;67.5{\mu}g/ml$, after incubation with intact cells, and also inhibited BACE activity in a dose-dependent fashion. These results suggest that the C. pyxidata mycelial extract has the potential to enhance cholinergic function and, therefore, may perform a function in the amelioration of the cholinergic deficit observed in cases of AD, as well as other types of age-associated memory impairment.
A Saprolegnia sp. was isolated from cultured snakehead, Channa argus, and its physiological characteristics were investigated. The optimum temperature, pH and NaCl concentration for mycelial growth of Saprolegnia sp. were $25^{\circ}C$, 6.0 and 0%, respectively. The mycelial growth was increased with the addition of 10 mM phosphate and 10mg/L casamino acid. The essential oils extracted from three plants, Artemisia princeps var. orientalis, Thuja orientalis and Chamaecyparis obtusa have been tested to know whether they inhibit the growth of Saprolegnia sp. at six different oil concentrations(10, 100, 500, 1,000, 1,500 and 2,000 ppm). Essential oil from A. princeps var. orientalis began to inhibite the mycelial growth of Saprolegnia sp. at the concentration more than 10ppm. Using other essential oils from T. orientalis and C. obtusa, those initially inhibited the mycelial growth of Saprolegnia sp. at the concentration over 10 ppm and complate inhibition of mycelial growth was observed at over 500 ppm. The histopathological features of Snakehead infected by Saprolegnia sp. were studied. A club shape of gill lamella epithelial cells was observed in the gill. The mycelial cells were penetrated into muscular tissue, and the accumulation of the ceroid was observed in the liver, spleen and kideny tissue in common. The necrosis of tubular epithelial cells was seen in the liver tissue, parenchymal tissue in the spleen and tubular epithelial cells in the kidney.
Amyloid $\beta$-peptide (A$\beta$), which is a product of the proteolytic effect of $\beta$-secretase (BACE) on an amyloid precursor protein, is closely associated with Alzheimer's disease (AD) pathogenesis. There is sufficient evidence to suggest that a BACE inhibitor may reduce A$\beta$ levels, thus decreasing the risk of AD. In a previous study, an extract of Clavicorona pyxidata DGUM 29005 mycelia was found to inhibit the production of a soluble $\beta$-amyloid precursor protein (s$\beta$APP), A$\beta$, and BACE in neuronal cell lines. We sought to determine whether this mycelial extract exerts the same effect in human rhabdomyosarcoma A-204 and rat pheochromocytoma PC-12 cells. We found that the production of A$\beta$ decreased in a dose-dependent manner in the presence of the mycelial extract and that the concentration of A$\beta$ never exceeded $50{\mu}g/ml$. The presence of sAPP was detected in every culture medium to which the mycelial extract had been added and its concentration remained the same, regardless of the concentration of the extract used. Endogenous $\beta$-secretase activity in A-204 and PC-12 cellular homogenates also decreased in the presence of this extract. These cells, in culture, were not susceptible to the cytotoxic activity of the mycelial extract.
In the present study, in order to investigate the anti-proliferative phenomenon of PLME, the effects of mycelial extract of Phellinus linteus (PLME) on the growth of human lung carcinoma cell line A549 was examined. We studied on the effects of PLME on the release of nitric oxide (NO) in mouse macrophage Raw 264.7 cells. Treatment of PLME to A549 cells resulted in the growth inhibition, morphological change and induction of apoptotic cell death in a dose-dependent manner as measured by MTT assay. We found that PLME stimulated a dose-dependent increase in NO production. These findings suggest that PLME enhances the anti-tumoral activity of macrophage and may be a potential therapeutic agent for the control of human lung carcinoma cells.
Protein-polysaccharide fractions, PJ-3 and PJ-4, were prepared from mycelial culture filtrate of an insect-born fungus, Paecilomyces japonica DGUM 32001, and subjected to a flow cytometrical analysis for their vivo antitumor and immunomodulating activity in ICR mice. When i.p. injected once daily for semen days at 100 mg/kg, PJ-4 exerted a strong antitumor activity showing the growth inhibition ratio of 85.1% against i.p. implanted sarcoma 180 cells, while PJ-3 showed only a weak activity. Moreover, PJ-4 signiscantly increased the expression level of CD25 (IL-2R $\alpha$-chain) as well as forward scatter (FSC) values of splenic CD8$^{8}$ T cells. It is also noteworthy that PJ-4 strongly induced the peritoneal exudate cells in the same experiment. In an in vitro study, PJ-4 slightly inhibited the growth of sarcoma 180 cells at the concentration of 50$\mu$g/ml or higher. These results strongly suggest that PJ-4 might exert its antitumor activity through immunostimulation as well as direct inhibitory activity on the tumor cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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