Kim, Youn-Jung;Park, Hyo-Joung;Kim, Young-Soo;Kim, Mi-Kyung;Lee, Seung-Ho;Jung, Sang-Hun;Ryu, Jae-Chun
한국환경성돌연변이발암원학회지
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제21권2호
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pp.99-105
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2001
Sophoricoside was isolated as the inhibitor of IL-5 bioactivity from Sophora japonica (Leguminosae). It has been reported to has an anti-inflammatory effect on rat paw edema model. To develope as an anti-allergic drug, genotoxicity of sophoricoside was investigated in bacterial and mammalian cell system such as Ames bacterial reversion test, chromosomal aberration assay and single cell gel electrophoresis (Comet) assay. As results, in the range of 1,250~40 $\mu\textrm{g}$/plate sophoricoside concentrations was not shown significant mutagenic effects in Salmonella typhimurium TA 98, TA 100, TA 1535 and TA 1537 strains in Ames test. The 80% cell growth inhibition concentration (IC/SUB 80/) of sophoricoside was determined as above 5,000 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in Chinese hamster lung (CHL) fibroblast cell and L5178Y mouse lymphoma cell line for the chromosomal aberration and comet assay, respectively. Sophoricoside was not induced chromosomal aberration in CHL fibroblast cell at concentrations of 700, 350 and 175 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ or 600, 300 and 150 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ in the absence or presence of S-9 metabolic activation system, respectively. Also, in the comet assay, the induction of DNA damage was not observed in L5178Y mouse lymphoma cell line both in the absence or presence of S-9 metabolic activation system. From these results, no genotoxic effects of sophoricoside were observed in bacterial and mammalian cell systems used in these experiments.
It is well known that diesel exhaust particulate matter contains mutagenic PAHs, such as benzo[${\alpha}$]pyrene, benz[${\alpha}$]anthracene, chrysene, etc. Therefore it is suspected that these chemicals act on estrogen receptor and reveal endocrine-disrupting effects. Recent attention has focused on causative chemicals of endocrine-disrupting effects. We examined the estrogenic activity of respirable diesel exhaust particulate matter derived from diesel powered vehicle. PM2.5 diesel exhaust of vehicle was collected using a high volume sampler equipped with a cascade impactor. Diesel exhaust samples were fractionated according to EPA methods. The presence of estrogenic and antiestrogenic chemicals in PM 2.5 diesel exhaust was determined using E-screen assay. To quantitatively assess the estrogenic and antiestrogenic activities in diesel exhaust particulate matter, estradiol equivalent concentration (bio-EEQ) was calculated by comparing the concentration response curve of the sample with those of the estrogen calibration curve. Weak estrogenic activities and strong antiestrogenic activities were detected in the crude extract and moderately polar fractions. Higher antiestrogenic potency was observed with higher EROD activities in aliphatic and aromatic compounds fraction. In conclusion, estrogenic/antiestrogenic-like activities were present in diesel exhaust particulate matter. However, the health consequences of this observation was unknown, the presence of these activities may contribute to and exacerbate adverse health effect evoked by diesel exhaust particulate matter.
To develope the novel anti-allergic drug, many sophoricoside derivatives were synthesized. Among these derivatives, JSH-II-3, JSH-Ⅵ-3, JSH-Ⅶ-3, and JSH-Ⅷ-3 were selected and subjected to high throughput toxicity screening (HTTS) because they revealed strong IL-5 inhibitory activity and limitation of quantity. Mouse lymphoma thymidine kinase (tk$\^$+/-/) gene assay (MOLY) and single cell gel electrophoresis (Comet) assay in mammalian cells were used as HTTS tool in our laboratory. In MOLY assay, JSH-Ⅶ-3 at 50 ∼ 6 $\mu\textrm{g}$/ml concentrations was not shown significant mutagenic effect in the absence and presence of S-9 metabolic activation system. However, the concentration of ISH-II-3, 38 $\mu\textrm{g}$/ml, induced increased mutation frequency (MF) in the presence of S-9 metabolic activation system. Also in comet assay, DNA damage was not observed in JSH-Ⅵ-3 and JSH-Ⅶ-3, wherase concentration of 32.8 $\mu\textrm{g}$/ml in JSH-II-3 and 13.9 $\mu\textrm{g}$/ml in JSH-Ⅶ-3 were induced DNA damage in the absence of S-9 metabolic activation system. Therefore, we suggest that JSH-Ⅵ-3 and JSH-Ⅶ-3 have no genotoxic effects but JSH-II-3 and JSH-Ⅷ-3 induce some mutagenicity and DNA strand breaks in mouse lymphoma cell line used this study.
The larval form of Tenebrio molitor (T. molitor) has been eaten in many countries and provides benefits as a new food source of protein for humans. However, no information exists regarding its safety for humans. The objective of the present study was to evaluate the genotoxicity and repeated dose oral toxicity of the freeze-dried powder of T. molitor larvae. The genotoxic potential was evaluated by a standard battery testing: bacterial reverse mutation test, in vitro chromosome aberration test, and in vivo micronucleus test. To assess the repeated dose toxicity, the powder was administered once daily by oral gavage to Sprague-Dawley (SD) rats at dose levels of 0, 300, 1000 and 3000 mg/kg/day for 28 days. The parameters which were applied to the study were mortality, clinical signs, body and organ weights, food consumption, ophthalmology, urinalysis, hematology, serum chemistry, gross findings and histopathologic examination. The freezedried powder of T. molitor larvae was not mutagenic or clastogenic based on results of in vitro and in vivo genotoxicity assays. Furthermore, no treatment-related changes or findings were observed in any parameters in rats after 28 days oral administration. In conclusion, the freeze-dried powder of T. molitor larvae was considered to be non-genotoxic and the NOAEL (No Observed Adverse Effect Level) was determined to be 3000 mg/kg/day in both sexes of SD rats under our experimental conditions.
Smoke flavors based on the thermal decomposition of wood have been applied to a variety of food products as an alternative for traditional smoking. Despite its increasing use, the available genotoxicity data on wood smoke flavors (WSF) are still controversial. Thus, potential genotoxic effects of WSF in four short-term in vitro genotoxicity assays were investigated, which included the Ames assay, chromosomal aberration assay, micronucleus test and the alkaline comet assay. WSF did not cause any mutation in the Ames assay using five tester strains at six concentrations of 0.16, 0.31, 0.63, 1.25, 2.5 and 5 ${\mu}l/plate$. To assess clastogenic effect, the in vitro chromosomal aberration assay was performed using Chinese hamster lung cells. No statistically significant increase in the number of metaphases with structural aberrations was observed at the concentrations of 1.25, 2.5, and 5 ${\mu}l/ml$. The in vitro comet assay and micronucleus test results obtained on L5178Y cells also revealed that WSF has no genotoxicity potential, although there was a marginal increase in micronuclei frequencies and DNA damage in the respective micronucleus and comet assays. Taken together, based on the results obtained from these four in vitro studies, it is concluded that WSF is not a mutagenic agent in bacterial cells and causes no chromosomal and DNA damage in mammalian cells in vitro.
Sorghum bicolor L. Moench(Sorghum, Su-Su) is a major cereal food crop used in many parts of the world. It is used as a human food resource and folk medicines in Asia and Africa. The stem of sorghum has been used as a digestive aid and an anti-diarrheal agent. Sorghum hybrids contain high levels of diverse phenolic compounds that may provide health benefits. High levels of polyflavanols, anthocyanins, phenolic acids, and other antioxidant compounds have been reported in sorghums, which have also been shown to possess various biological activities such as anti-mutagenic, anti-carcinogenic, and HMG-CoA reductase inhibitory activities. In an in vitro experiment, we examined mice splenocyte proliferation and production of three types of cytokine($IL-1{\beta},\;IL-6,\;TNF-{\alpha}$) by peritoneal macrophages cultured with ethanol and water extracts of Sorghum bicolor L. Moench. A single cell suspension of splenocytes was prepared and the cell proliferation of the splenocytes was examined by MTT assay. The splenocyte proliferation was increased when water extracts of Sorghum bicolor L. Moench were used as supplements in all concentrations investigated. The production of cytokine($IL-1{\beta},\;IL-6,\;TNF-{\alpha}$) by activated peritoneal macrophage was detected by ELISA using the cytokine kit. $IL-1{\beta},\;IL-6,\;and\;TNF-{\alpha}$ production by activated macrophages were increased by supplementation with Sorghum bicolor L. Moench water extracts. This study suggests that supplementation of with Sorghum bicolor L. Moench water extracts may enhance immune function by regulating the splenocyte proliferation and enhancing the cytokine production by activated macrophages in vitro.
돼지고기와 챔을 이용한 찌개에서 생성되는 돌연변 이원성과 김치 , 표고버섯, 파, 마늘이 부재료로 첨가되었을 때의 억제효과를 검토하고 국산햄과 외국산챌의 차이를 알아보고자 변이원으로 4-NQO, Trp-p-1을 사용하여 염기치환형 변이균주인 Salmonella typhimurium TA100을 이용한 Ames test를 실시하였다. 1. 0.025-0.02 g/Plate 농도에서, 김치는 가열했을때 변이원성이 나타나지 않았고 4-NQO, Trp-p-1의 변미원성을 효과적으로 억제하였다. 햄과 돼지고기는 가열시 변이원이 자체적으로 생성되었고 돼지고기 0.02 g/plate 농도에서 가장 큰 값을 나타내어 육가공품에 첨가된 아질산염에 대한 안전성을 확보할 수 있었다. 2.가열된 돼지고기와 햄의 변이원성에 대하여 대체로 김치 첨가시 억제효과가 가장 컸고, 표고버섯 한가지보다는 표고버섯에 파 ,마늘을 함께 첨가했을때 억제효과가 더 컸다. 3. 외국산햄은 국산햄과 달리 항산화제인 ascorbic acid가 더 많이 첨가되어 있어 0.02g/plate 농도에서 가열에 의해 변이원이 생성되지 않았고 변이원 존재 시 국산햄보다 낮은 변이원성을 나타내었다.
The examination of the pollutants originated from domestic sewage, industrial and agricutural activities the existences of some toxic heavy metals, organic matters and pathogenic microorganisms. A recent report of WHO brought out that such pollutants are in existence with above roughly 2,000 kinds of chemical substances and amongst them about 750 chemicals have been indentified by drinking water. And above 600 kinds of them are organic pollutants and in addition these include carcinogenic mutagenic and poisonous substances. This is not intended to embody a study of broad confined to various approaches on organic materials, and therefore will be THM produced on injection of chlorine at water filtration plant. To specify the relations between THM and factors having an effect upon THM such as TOC, Cl$_{2}$, Temperature, pH and reaction time, first of all the recovery ratio for analytical methods of THM (Head sapce, purge and trap, Liquid/ Liquid Extraction methods) was investigated. Provided that by using it,the correction coefficients are obtained, the accuracy of data might be able to be enhanced through analysis.The result of the experiments are given in the followings. 1) Among three kinds of analytical methods, recovery rate was higher in order of purge and trap Liquid/Liquid Extraction, Head space. There is no great difference in recovery rate among three methods. 2) The higher the concentration of TOC, the more the amount of THM. 3) The higher the reaction temperature, the more the amount of THM. 4) The longer the reaction time, the more the amount of THM. 5) The higher the pH, the more the amount of THM. 6) The higher the concectration of chlorine, the more the amount of THM.
Quinone reductase(QR)를 포함한 2상효소계를 활성화시키는 성분들은 많은 동물실험에서 발암물질의 세포내 작용을 억제함으로서 항종양효과를 나타내는 것으로 보고되어 있다. 본 연구에서는 대표적인 농산부산물로서 미강, 밀기울, 탈지대두박, 두유박, 참깨박, 들깨박등 6종의 시료에 대한 암예방효과를 갖는 물질의 존재여부를 탐색하기 위하여, mouse hepatoma cell line(Hepalclc7 cells) 을 이용하여, quinone reductase활성유도 여부를 측정하였다. 참깨박과 들깨박의 80%메탄올 추출물은 0.5mg/ml 농도에서 강력한 QR 유도활성을 나타냈으며, 같은 농도에서 다른 시료들은 거의 QR 효소활성을 증가시키지 않았다. 한편 QR효소활성을 유도하는 성분을 찾아내기 위하여 일차적으로 TLC를 수행한 결과, 참깨박과 들깨박의 메탄올 추출물 가운데 사용한 전개용매(n-butanol : n-propanol : 2N ammonium hydroxide(10 : 60 : 30)에서 가장 빨리 이동하는 분획(Rf=0.70)이 유효성분을 함유하고 있음을 확인하였으며, 현재 활성성분의 동정이 진행중에 있다.
복숭아로부터 polyphenoloxidase를 추출하여 polyphenol 화합물인 caffeic acid, hydroxyhydroquinone, homocatechol 그리고 pyrogallol과 반응시켜 얻어진 4종류의 효소적 갈변반응 생성물의 생리작용을 검토한 결과 rec-assay와 돌연변이원성시험에서 돌연변이원성을 나타내지 않았다. 4종류의 시료모두 S-9Mix를 첨가한 돌연변이원성 억제활성 실험에서 B(a)p, Trp-P-1의 변이물질에 대한 Ca-PEBRP와 HCa-PEBRP가 80% 이상의 강한 돌연변이원성 억제활성을 나타내었음을 알 수 있었다. 또한 rec-assay에서도 강한 대조구인 MMC와 MNNG에 대해 Py-PEBRP경우 생육저지대차를 17 mm에서 5 mm로 감소시켜 돌연변이 억제활성이 있는 것으로 나타났고, Hca-PEBRP, HHQ-PEBRP 그리고 Py-PEBRP에 $Zn^{2+}$의 첨가로 생육저지대의 차가 5 mm로써 DNA 손상에 영향을 미치는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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