Lim, Seon-Hwa;Kwak, A Min;Min, Kyong-Jin;Kim, Sang Su;Kang, Hee Wan
한국균학회소식:학술대회논문집
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한국균학회 2014년도 추계학술대회 및 정기총회
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pp.19-19
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2014
Pleurotus ostreatus, P. eryngii, and Flammulina velutipes are major edible mushrooms that account for over 89% of total mushroom production in Korea. Recently, Agrocybe cylindracea, Hypsizygus marmoreus, and Hericium erinaceu are increasingly being cultivated in mushroom farms. In Korea, the production of edible mushrooms was estimated to be 614,224 ton in 2013. Generally, about 5 kg of mushroom substrate is needed to produce 1 kg of mushroom, and consequently about 25 million tons of spent mushroom substrate (SMS) is produced each year in Korea. Because this massive amount of SMC is unsuitable for reuse in mushroom production, it is either used as garden fertilizer or deposited in landfills, which pollutes the environment. It is reasonably assumed that SMS includes different secondary metabolites and extracellular enzymes produced from mycelia on substrate. Three major groups of enzymes such as cellulases, xylanases, and lignin degrading enzymes are involved in breaking down mushroom substrates. Cellulase and xylanase have been used as the industrial enzymes involving the saccharification of biomass to produce biofuel. In addition, lignin degrading enzymes such as laccases have been used to decolorize the industrial synthetic dyes and remove environmental pollutions such as phenolic compounds. Basidiomycetes produce a large number of biologically active compounds that show antibacterial, antifungal, antiviral, cytotoxic or hallucinogenic activities. However, most previous researches have focused on therapeutics and less on the control of plant diseases. SMS can be considered as an easily available source of active compounds to protect plants from fungal and bacterial infections, helping alleviate the waste disposal problem in the mushroom industry and creating an environmentally friendly method to reduce plant pathogens. We describe extraction of lignocellulytic enzymes and antimicrobial substance from SMSs of different edible mushrooms and their potential applications.
흰구름버섯 (Trametes hirsuta)의 균사체는 CR, CV, RBBR 등 방향족 염료가 함유된 고체와 액체 배지에서 이들 염료를 효과적으로 탈색하였으나 MB의 탈색은 저조하였다. 각각 CR, MB, CV 및 RBBR 등 4종류의 염료가 함유된 액체배지에서 흰구름버섯의 균사체를 10일 간 배양했을 때 laccase, LiP, MnP 등 세 종류의 효소를 모두 생산하였으며 이들 효소 중 laccase의 활성도가 가장 높았으며 LiP와 MnP의 활성도laccase에 비해 낮았다. 따라서 흰구름버섯 균사체에 의한 방향족 염료의 탈색에는 laccase가 주로 사용되고 LiP나 MnP는 보조적인 역할을 하는 것으로 사료된다. 또한 비스페놀 A가 0, 25, 50, 100, 200 ppm의 농도로 함유된 PDA 배지에 균사체를 접종하여 배양한 결과 비스페놀 A의 농도가 증가함에 따라 균사체의 생장은 농도 의존적으로 저해되는 것으로 나타났다. 또한 비스페놀 A가 100 ppm 함유된 YMG 액체배지에 균사체를 접종하고 비스페놀 A의 분해율을 측정한 결과 배양 12시간 후 72.3%, 배양 24시간 후 95.3%, 그리고 배양 36시간 후에는 100% 분해된 것으로 나타났다. 따라서 본 연구 결과는 우리나라의 산업 활동 과정에서 생산되고 자연계로 배출되어 생물체에 큰 피해를 주는 합성염료와 내분비계 장애물질인 비스페놀 A를 친환경적으로 제거할 수 있는 기술의 개발에 도움이 될 수 있을 것으로 사료된다.
아로니아 첨가 시 생육 일자에 따른 느타리 균사체 생장량 및 pH 양상을 확인하였다. 무처리 대비 아로니아 첨가 시 균사체 직경과 건물중이 증가하는 경향을 보였으며, pH의 경우 아로니아 처리 시 배지의 농도가 낮아지는 것을 확인할 수 있었다. 아로니아 10% 첨가 배지에서 배양한 버섯 균사체와 일반 배지에서 배양한 버섯 균사체의 DPPH 라디칼 소거 활성에서 아로니아 첨가 배지 내 느타리 균사체는 61.81%, 무첨가 배지 내 느타리 균사체는 49.65%로 약 12%의 라디칼 소거 활성 차이를 보였으며, ABTS 라디칼 소거 활성은 아로니아 첨가 배지 내 느타리 균사체 59.83%, 무첨가 배지 내 느타리 균사체 52.66%로 나타나 7.17%의 라디칼 소거 활성 차이를 보였다. 총 폴리페놀 함량의 경우 아로니아 첨가 배지 내 생육 균사체 6.54 mg GAE/g, 무첨가 배지 내 생육 균사체 5.77 mg GAE/g로 0.77 mg GAE/g의 차이를 나타냈다. 생육 배지에 아로니아를 첨가함에 따라 느타리 균사체의 총 폴리페놀 함량이 많아지며 ABTS, DPPH에 의한 항산화 효과가 높아지는 경향을 나타냈다.
본 연구실에서는 송이의 인공재배 조건 확립을 목표로 세균을 활용한 생장촉진 유도실험을 진행하였으며, 봉화에서 확보한 7 점의 세균에 의한 송이 균사체의 생장촉진 결과를 확인하였다. 생장촉진 효과가 가장 높았던 3 점의 세균 B22_7_B06, B22_7_B07, B22_7_B08은 Paenibacillus 속으로 확인되었다. 그러나 이러한 배양된 송이 균사체의 생장면적 측정 이외에 다양한 방식을 통한 균사체 생장결과 확인 기준이 필요한 실정이며, 이에 향후 확보된 세균들이 모두 그람 양성균인 것에 착안하여 각 세균들로부터 대사산물을 추출한 후 (Eltokhy et al., 2021), 추출한 대사산물을 활용하여 송이 균사체의 세포외 효소활성 변화 정도를 측정하여 보다 체계적인 송이 균사체 생장촉진 데이터를 확보하고자 한다. 더불어 미생물에 의한 송이 균사체 생장촉진 사례 데이터를 지속적으로 축적하여 송이 종류에 따른 미생물의 생장촉진 효과의 다양성을 확보하고 확보된 촉진균으로 부터 추출한 물질이 함유된 영양 배지를 활용하여 송이 인공재배를 위한 생태모방에 기여하고자 한다.
차가버섯의 균사체 생장과 세포외 다당체 생산을 위한 최적의 배양조건을 조사하고, 세포내 외 다당체의 항보체 활성과 대식세포의 lysosomal enzyme 활성을 관찰하였다. 균사체 생장과 세포외 다당체 생산을 위한 최적 pH, 온도, 및 교반속도는 각각 5.5, $25^{\circ}C$, 150 rpm으로 나타났으며, 배양기간은 11일째 최대 균사체 생장(10.89 g/l)과 세포외다당체 생산(1.25 g/l)을 보였다. 항보체 활성은 세포내 외 다당체의 처리 농도가 높을수록 활성이 증가함을 보였고, 대식세포의 lysosomal enzyme 활성은 $100{\mu}g/ml$ 농도에서 음성대조군에 비해 세포내 다당체는 약 2.2배, 세포외 다당체는 약 2배 정도 증가하였다.
This study was conducted to identify a suitable color of light for development of the fruit body in Hypsizygus marmoreus. To accomplish this, samples were irradiated with blue (475 nm), green (525 nm), yellow (590 nm), or red (660 nm) light emitting diodes (LEDs) to induce the formation of fruiting bodies after mycelia growth. The diameter and thickness of the pileus and length of stipes in samples subjected to blue LED treatment were similar to those of subjected to fluorescent light (control), and the lengths of the stipes were highest in response to treatment with the red LED and darkness. The commercial yields of plants subjected to blue and green LED treatment were similar to those of the control. In conclusion, cultivation of H. marmoreus coupled with exposure to blue LED is useful for inducing high quality fruit bodies as well as higher levels of ergosterol, DPPH radical scavenging activity, total polyphenol content and reducing power.
When medicinal mushroom, Poria cocos, is cultured , inoculation method of spawn is cross slice inoculation of which the both sides of pine tree were peeled and spawn of P.cocos was inoculated. However, this method required lots of inoculation amount. This study was carried out to improve the culturing method of P. cocos. A good growth of P.cocos was observed in MCM(mushroom complete medium), showing proper mycelia growth and density. In inoculation amount, conventional method(cross slice inoculation) requires 20 bottles of spawn. In contrast, short log method required 8 bottles of spawn and drilling inoculation method 2~3 bottles, which could save by 60% and 85-90% respectively. In the selectrion of tree species, pine and larch had better condition for spawn culture and sclerotia formation condition.In terms of yield , pine was 33.7kg/3.3$m^2$. In the yield of pine, conventional method was 23.4kg/3.3$m^2$, drilling inoculation 29.4kg/3.3$m^2$, short log inoculation 31.7kg/3.3$m^2$, therefore drilling inoculation could increase by 25% and short log inoculation 35%, In addition, management cost was also saved.
Ergone, a fungal metabolite derived from ergosterol, was previously isolated and identified from Polyporus umbellatus. Ergone is a major component of P. umbellatus known to have anti-aldosteronic diuretic effect and also displays cytotoxic activities. Most of mushroom's fruit bodies used for test contained less than 10 ${\mu}g/g$ of ergone. But P. umbellatus have larger amount of ergone than any other mushrooms. In order to improve the ergone production from the submerged culture of P. umbellatus, several factors including medium composition, culture conditions (temperature and pH) and different combinations of co-cultivation with various mycelia were studied. Among various carbon sources examined, starch proved to be most effective for the production of mycelia. The optimum pH and temperature for a flask culture of P. umbellatus mycelia were found to be 4.5 and $25^{\circ}C$, respectively. Under the optimized culture conditions, both the ergone production (86.9 ${\mu}g/g$) and mycelial growth (3.5 g/l) increased when P. umbellatus was cultured with Armillariella mellea. When the optimized conditions were applied, both mycelium and ergone production were significantly enhanced.
During an investigation of fungi from an elm tree infested with bark beetles in Korea, one isolate, DUCC401, was isolated from elm wood. Based on morphological characteristics and phylogenetic analysis of the internal transcribed spacer and 28S rDNA (large subunit) sequences, the isolate, DUCC401, was identified as Mariannaea samuelsii. Mycelia of the fungus grew faster on malt extract agar than on potato dextrose agar and oatmeal agar media. Temperature and pH for optimal growth of fungal mycelia were 25oC and pH 7.0, respectively. The fungus demonstrated the capacity to degrade cellobiose, starch, and xylan. This is the first report on isolation of Mariannaea samuelsii in Korea.
느타리버섯 푸른곰팡이병에 대한 품종 저항성은 포장에서 효과적인 검토가 불가능하여 한천 배지상에서 푸른곰팡이균이 균을 저해하는 특징 fungistatic, lysis, toxin enzyme 등에 대한 각각의 특성을 실내에 검정할 수있는 방법을 검토하기 위하여 균사생장과 특이 현상을 조사하였다. 대치배양에서는 느타리버섯 균주에 따라 대치선 형성위치, 푸른곰팡이균의 느타리균사 생장부분 위로 생장(overgrowth), 대치선 이후의 버섯균의 용균(lysis)현상이 발생하여 효과적인 저항성 검정이 가능하였다. 배양여액을 여지에 적용하는 방법은 버섯균과 병원균의 종류에 따른 균사생장 및 특이적 현상이 타나나지 않았으나, well plate를 이용한 배양여액 희석방법으로 균사생장의 억제정도의 확인이 가능하였다. 분활 petri dish를 활용하여 동시배양의 경우 약간의 버섯균이 억제되는 현상은 보였으나, 푸른곰팡이균이 버섯균 생장 부분 위로 덮어 효과검정이 불가능 하였다. 버섯균을 petri dish 전체에 배양한 후 그 위에 병원균의 균총을 접종하는 방법은 overgrowth, lysis등의 현상이 발생하여 병원성의 검정이 용이하였다. 실내에서의 느타리버섯균의 푸른곰팡이병에 대한 저항성 검정은 대치배양, 배양여액법, 생장후 접종법에 의한 방법으로 가능한 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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