• Journal of Plant Biotechnology
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• 제30권1호
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• pp.73-80
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• 2003

패랭이꽃속의 분포와 개발을 위한 기초자료로 강원도에서 자생 2종과 수집가능한 7 외래종에 대한 기내배양체의 특성을 조사하였다. 캘러스의 유도를 위해 조직부위별 다양한 절편체들을 2,4-D. NAA, BA가 농도별로 처리된 MS 배지에 치상한 후, 27$^{\circ}C$ 광조건과 2.0mg/L 2,4-D와 0.5 mg/L BA의 조합배지에서 배양했을 때 3주 후 절단면에서 callus가 형성되기 시작하였으며, 패랭이꽃 (Dianthus chinensis)의 잎절편체에서 가장 양호하였다. Organogenic 캘러스의 선발은 기내에서 증식된 adventitious shoot의 절편체 유래 캘러스로부터 가능했으며 이들 캘러스를 1.0 mg/L BA와 0.1 mg/L NAA가 조합된 배지에 치상하였을 때 약 30% 정도의 shoot 형성률을 보였고 multiple shoot의 분화를 관찰할 수 있었다. In vitro에서 증식된 adventitious shoot 절편체를 1.0 mg/L BA와 0.1 mg/L NAA가 포함된 N6 배지에 치상했을 때, 캘러스 단계를 거치지 않고 직접 shoot이 형성되었고 D. gratianopol 유래 adventitious shoot 절편체는 52%의 높은 shoot 형성률을 보였다. 이들 multiple shoot로부터 재분화된 소식물체는 0.1 mg/L NAA가 포함된 MS 배지에서 뿌리가 유도되고 vermiculite가 담긴 pot에 이식 후 85% 습도하에서 활착되어 정상적인 개화된 개체를 획득할 수 있었다. 0.03 M EMS 처리된 패랭이꽃의 adventitious, shoot 절편체 유래 캘러스로부터 힌꽃의 패랭이꽃의 도연변체식물 (M23)이 분화되었으며 종자 형성이 가능하였다.

• 식물조직배양학회지
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• 제25권1호
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• pp.63-68
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• 1998

정단 및 마디조직을 이용한 지황의 기내증식방안을 마련하기 위하여 일련의 시험을 실시하였다. 재생된 신초의 정단을 재배양하였을 경우 BA 5.0 mg/L에서 7.8개의 신초가 형성되었으며 투명화된 묘의 발생은 Gelrite 보다는 Bacto-agar 첨가구에서 감소하였다. 광도와 한천의 농도가 증가할수록 신초형성수 및 생장은 억제되었고 생체중 : 건물중의 비율도 감소하였다. 광도가 2000 lx일 때는 Bacto-agar 0.6-1.2%, 3,000 lx에서는 한천 0.4-0.6%에서 건전한 신초를 10개 이상 생산할 수 있었다. 활성탄소 0.1-0.3%첨가는 신초의 생장촉진과 뿌리형성에 촉진적으로 작용하였으며 투명화 발생률도 감소시켰으나 신초형성수는 현저히 감소시켰다. MS배지내 첨가되는 다량원소의 농도를 0.8-1.0배 하였을때 신초형성수 및 생장이 촉진되었다. 기관형성에 미치는 오옥신의 종류 및 농도별 효과를 조사한 결과 NAA나 IBA 보다는 IAA 0.3mg/L 와 BA 5.0mg/L를 혼합처리 하였을 때 증식률이 16배에 달하였다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제31권1호
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• pp.49-53
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• 2004

기공이 잎의 앞뒤 양면에 존재하는 생리ㆍ형태적 특징을 가지고 있는 외래 교잡종인 Peace (Populus koreana ${\times}$ P. trichocarpa)포플러의 효율적인 기내증식법을 개발하고자 액아와 엽육 절편을 이용하여 기내배양을 실시하였다. 몇 종류의 배지 시험을 통해 1/2MS배지를 적정배지로 선정할 수 있었고, 이 배지에 TDZ를 처리하여 multiple shoot 및 adventitious shoot유도 효과를 조사하였다. 절간액아 및 엽육을 절편으로 TDZ의 농도별 처리로 배양 2주 후부터 multiple shoot 및 adventitious shoot가 유도되었으며 절편 및 TDZ처리 농도에 따라 차이를 나타냈다. 액아로부터는 TDZ 처리로 절편당 5-7개의 multiple shoot가 유도된 반면 엽육 절편에서는 2-5개의 adventitious shoot가 유도되었다. 한편 부정아로부터 정상적 인 줄기의 성장에 있어서도 절편에 따른 차이를 나타냈다. 이상의 결과는 저농도의 TDZ의 처리로 peace포플러의 액아 혹은 엽육 절편의 기내배양을 통해 대량증식이 가능함을 보여주는 결과이다.

• 한국약용작물학회지
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• 제8권1호
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• pp.41-48
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• 2000

큰용담을 대상으로 실시한 체세포배의 형성, 재분화 체계의 확립 및 multiple shoot의 형성 등의 대량증식에 관한 일련의 실험의 결과는 다음 몇 가지로 요약된다. 큰용담의 잎절편을 2, 4-D 2 mg/ l 에 배양한 경우 callus 형성율이 90%, embrogenic callus 형성율이 70% 로 높은 형성율을 나타내었으나 실제 형성되는 체세포배의 발생 숫자를 조사하였을 때 2,4-D 단독처리시 보다 2, 4-D 0.5 mg/ l 와 BAP 0.5 mg/ l이 조합처리 시 잎절편체 당 18.8 개의 높은 체세포배가 형성되었다. 큰용담의 줄기와 마디를 배양한 결과 캘러스의 형성은 단독처리시 $20{\sim}30%$의 캘러스 형성율을 보인 반면 고농도의 2,4-D에 TDZ를 조합처리 하여 줄기마디를 배양한 경우 50% 이상의 우수한 캘러스 형성이 이루어지는 것으로 나타났으며 재분화식물체는 단독처리에서 MS medium 에 BAP 2 mg/ l 처리한 줄기마디 배양에서 7개의 재분화 식물체를 얻음으로 해서 가장 높은 shoot 분화율을 나타내었다. 큰용담에서는 TDZ, BAP를 조합처리한 결과 TDZ 1 mg/ l 와 BAP 1 mg/ l 조합처리하였을 경우 multiple shoot를 형성하였으며 explant 당 $70{\sim}80$개의 식물체가 분화되었다. 식물체의 각 치상조직을 배양한 결과 정아 마디 줄기 순으로 식물체 많이 유도되는 것으로 나타났으며 잎조직에서는 새로운 신초는 유도되지 않았다. 배양기간에서 대한 차이는 배양한지 30일 경과한것 보다 60 일이 경과한것에서 거의 모든 조직에서 2배 이상의 신초형성을 보였다.

• 한국연초학회지
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• 제13권1호
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• pp.36-42
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• 1991

The present study was conducted to obtain some basic information on the shoot formation from crown gall callus and the characteristics of teratoma shoot derived from crown gall induced by inoculation of Agrobacterium tumefaciens C58. Crown gall callus could be continuously cultured on the phyohormone free basic medium. The growth of crown gall callus was inhibited when BA were added to the cultural media. Shoot formation from crown gall callus fail to be initiated except teratoma shoot which induced on the phytohormone free medium after several subculture on rare occasions. Teratoma shoot could not form root and grow as normal shoot. Addition of BA to cultural media was not effective for shoot elongation, reduction in multiple shoot formation, but IBA was somewhat effective for shoot elongation of teratoma shoot, never for root formation.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제6권2호
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• pp.77-85
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• 2004

Development of efficient plant regeneration and genetic transformation protocols (using the Particle Inflow micro-projectile Gun and the shoot-tips as target tissue) of Sorghum bicolor (L.) Moench in terms of expression of the reporter gene, $\beta$-glucuronidase(uidA) is reported here. Two Indian cultivars of sorghum were used in the study, viz. M-35-1 and CSV-15. Plant regeneration was achieved from one-week-old seedling shoot-tip explants via multiple-shoot-clumps and also somatic embryos. The multiple-shoot-clumps were produced on MS medium containing BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$), with biweekly subculture. Somatic embryos were directly produced on the enlarged dome shaped expansive structures that developed from shoot-tip explants (without any callus formation) when cultured on MS medium supplemented both with BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$) and 2,4-D (0.5 mg/$L^{-1}$). Whereas each multiple-shoot-clump was capable of regenerating more than 80 shoots via an intensive differentiation of both axillary and adventitious shoot buds, the somatic embryos were capable of 90% germination, plant conversion and regeneration. The regenerated shoots could be efficiently rooted on MS medium containing 1.0mg/$L^{-1}$ IBA and successfully transplanted to the glasshouse and grown to maturity with a survival rate of 92%. The plant regeneration efficiency of both the genotypes were similar. After the micro-projectile bombardment, expression of uidA gene was determined by scoring blue transformed cell sectors in the bombarded tissue by an in situ enzyme assay. The optimal conditions comprising a helium pressure of 2200 K Pa, the target distance of 11 cm with helium inlet fully opened and the use of osmoticum have been defined to aid our future strategies of genetic engineering in sorghum with genes for tolerance to biotic and abiotic stresses.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제7권3호
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• pp.149-153
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• 2005

In the present study, in vitro multiple shoot induction was achieved from cotyledonary node and stem nodal explants of cv. NARI-6 of safflower (Carthamus tinctorius L.). Among various growth regulators tested, MS salts and B5 vitamins supplemented with BA (6-Benzy-laminopurine) $17.76\;{\mu}M$ and KN (Kinetin) $6.96\;{\mu}M$ phytohormonal combination was found to be the most effective in initiating numerous shoot buds after 30 days of culture than BA ($4.44-44.39\;{\mu}M$) or KN ($2.32-46.40\;{\mu}M$) alone in the medium. In addition, 0.8% (w/v) agar (Hi-media) and 3.0% sucrose (w/v) was the optimum level for the formation of adventitious shoots. Further results showed the maximum shoot elongation occurred on MS medium with BA ($8.88\;{\mu}M$) and $GA_3$($11.56\;{\mu}M$) combinations. Efficient rooting occurred on quarter strength MS medium with NAA $10.74\;{\mu}M$. The regenerated plantlets were acclimatized and successfully transferred to the field.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제5권2호
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• pp.107-113
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• 2003

The effect of sodium sulphate on shoot induction and multiple shoot formation from nodal explants of Vitex negundo L. was tested on Murashige and Skoog's (MS) medium fortified with different auxins, cytokinins and sucrose. Highest percentage $(97.78\%)$ of explants for shoot induction and multiple shoot (20.68/explant) production were observed in the combination treatment of $N^6-Benzyl$ adenine (BA) $(17.80\;{\mu}M/L)$, ${\alpha}-Naphthalene$ acetic acid (NAA) $(2.15\;{\mu}M/L)$ and $5\%$ sucrose supplemented with 100 mg/L sodium sulphate. In vitro raised shoots were rooted on the half-strength MS medium fortified with different concentrations of NAA, Indole-3-acetic acid (IAA), and Indole-3-butyric acid (IBA) alone and in combinations. Among the treatments, $4.90\;{\mu}M/L$ of IBA was found most effective $(95.56\%)$ in inducing roots. The rooted plantlets were shifted to glasshouse for acclimatization and later transferred to the field with cent percent survival. Furthermore, in vitro flowering was observed in the shoots cultured on MS medium supplemented with BA $(8.90\;{mu}M/L)$ and NAA $(1.61\;{\mu}M/L)$.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제31권4호
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• pp.301-306
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• 2004

마늘 (Allium sativum L.) 다신초를 생물반응기를 이용, sucrose 2%가 포함된 MS 배지에서 3주간 증식시킨 후 microbulb의 형성을 위해 NAA 0.1 mg/L와 sucrose 11%가 포함된 MS 배지에서 9주간 배양하였다. 다신초 증식의 경우, 잎을 제거하지 않았을 때 90% 이상이 과수화되었고 과수화 된 신초의 세포는 크기와 형태가 일정하지 않았으며 microbulb의 형성도 이루어지지 않았다. 신초 배양 3주 후 표피의 부정아 세포에서 분열이 활성화되면서 부정아가 비대되었고 신초의 분열조직에서 수층과 병층으로 분열이 일어나 크게 비대된 후 배양 7주부터 microbulb를 형성하였다. Ploidy analyzer를 이용한 배수성 검정에서 다신초와 microbulb의 피크 모두, 모주 식물의 상대적인 피크와 동일한 위치에서 나타나 배수성의 변이가 없는 것으로 나타나 배양체가 모주 식물과 유전적으로 동일함을 입증하였다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제3권3호
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• pp.141-144
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• 2001

To enhance the shoot induction efficiency from nodal stem of yooza, the culture conditions such as basal medium, carbohydrate source, solidifying agent and the optimum concentration of plant growth regulators for shoot induction were investigated. The nodal explants were cultured better on MS medium than on MT, SH, B5 or W media in considering of shoot induction rate and mean shoot length. Solidifying agent in medium was better with 0.8% agar than with 0.3% agar, 1.2% agarose or 0.2% gelrite. Carbohydrate source in shoot induction medium was efficient with 30 g/L sucrose. The optimum concentrations of plant growth regulators were determined that 0.1 mg/L NAA as auxin was effective on the shoot induction, and 1.0 mg/L BAP as cytokinin induced multiple shoots efficiently. Shoot induction was the most effective on MS medium supplemented with 4 mg/L $GA_3$ in yooza.