• Reproductive and Developmental Biology
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• 제31권3호
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• pp.215-220
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• 2007

본 연구는 소 배반포의 내부 세포괴로부터 다능성(pluripotency)을 지닌 배아 줄기 세포(embryonic stem cell) 또는 그 유사 세포를 분리 및 배양함으로써 줄기 세포 관련 분야의 기반 기술을 확립하고자 하였다. 소 체외수정란을 $10{\sim}12$일간 체외배양하여 생산된 부화 배반포를 세포분열이 불활성화된 생쥐 태아 섬유아 세포(mouse embryonic fibroblast, MEF) 위에서 배양하여 콜로니 형성을 유도하였으며, 이들로부터 내부 세포괴 유래의 형태를 지닌 것만을 광학현미경 하에서 물리적으로 분리하여 약 $5{\sim}7$일 간격으로 계대배양을 실시하였다. 이러한 방법을 통하여 배아 줄기 유사 세포의 특성을 40계대 이상 유지하는 2개의 세포주를 확립하였다. 각각의 세포주들은 높은 alkaline phosphatase(AP) 활성을 지니고 있었으며, 형광 면역 염색법과 PCR 기법을 사용하여 Oct-4, Nanog, STAT3, SSEA3 및 SSEA4의 발현을 관찰할 수 있었다. 이러한 결과를 종합하여 볼 때, 본 연구에서는 소 배반포로부터 배아 줄기 세포주를 확립하는 제반 기술이 확립되었다고 판단되며, 향후 관련 분야 연구에 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

• 대한화장품학회:학술대회논문집
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• 대한화장품학회 1996년도 4차 심포지움(Skin Biology Efficacy)
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• pp.33-51
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• 1996

화장품의 변질요인은 크게 물리적 또는 화학적 변화에 의한 요인과 미생물오염으로 인한 각종 문제점으로 대별될 수 있다. 이 중에서 미생물 오염문제는 제품의 상품가치에 미치는 영향 뿐만 아니라 지속적인 사용에 의한 피부의 위생적 측면때문에 그 중요성에 대한 인식이 높아지고 있다. 따라서, 제품개발시는 화장품 처방중의 영양성분의 배합, pH, 유화형태, 방부제의 혼합, 분배계수 및 그 안정성을 고려하여야 함은 물론이고 처방중의 모든 원료의 각각에 대한 항균능 및 피부자극여부를 사전에 미리 조사하여 각 제품별로 적당한 방부체계를 선택하는 것은 매우 중요한일이다. 독성실험방법에 있어서 in vivo 실험에 대체할 수 있는 새로운 in vitro 실험방법 수립 즉, 동물실험을 하지 않고 in vitro 실험결과로부터 in vivo 결과를 예측할 수 있도록 새로운 in vitro 실험체계의 가능성을 실험하였다. 4종의 cell line중 transformed mouse fibroblast L929가 본 실험에서 사용하기에 배양상의 용이성과 안정성, 재현성의 관점에서 가장 알맞은 cell line이었다. transformed mouse fibroblast L929를 사용한 NR$_{50}$ assay와 Draize score간의 regression coefficient ${\gamma}$값은 0.91이었다. 혈청은 시험물질의 세포에 대한 민감성에 영향을 주었다. 따라서, modified serum-free method를 이용함으로써 regression coefficient가 증가된 즉, 상관성 및 재현성이 높은 결과를 얻을 수 있었다. 이러한 기술은 독성실험에 실험동물을 사용하지 않고 in vivo test에 대체 할 수 있고, 또한 화학물질에 대한 prescreening으로 이용할 수 있을 것으로 판단된다.원과 섭식장소, 수중생물의 경우는 특히 수온, 수량 영양원등이다.(중략). 본 연구의 접근방법으로는 ASRS의 개념적인 Reference Model을 수립하고 이 Reference Model에 대한 Formal Model로 DEVS(Discrete Event System Specification)을 이용하여 시스템을 Modeling하였다. 이의 Computer Simulation을 위하여 DEVS형식론 환경에서의 Simulation Language인 DEVSim ++ⓒ를 이용하여 시스템을 구현하였다.. 실형 결과로는 먼저 선형 상미분방정식의 예로 mass-damper-spring system, 비선형 상미분방정식의 예로는 van der Pol 방정식, 연립 상미분방정식의 예로는 mixing tank problem 등을 보였으며, 그의 공학에서 일어나는 여러 가지 문제들도 다루었다.화물에 대한 방어력이 증가되어 나타난 결과로 여겨지며, 또한 혈청중의 ALT, ALP 및 LDH활성을 유의성있게 감소시키므로서 감잎 phenolic compounds가 에탄올에 의한 간세포 손상에 대한 해독 및 보호작용이 있는 것으로 사료된다.반적으로 홍삼 제조시 내공의 발생은 제조공정에서 나타나는 경우가 많으며, 내백의 경우는 홍삼으로 가공되면서 발생하는 경우가 있고, 인삼이 성장될 때 부분적인 영양상태의 불충분이나 기후 등에 따른 영향을 받을 수 있기 때문에 앞으로 이에 대한 많은 연구가 이루어져야할 것으로 판단된다.태에도 불구하고 [-wh]의미의 겹의문사는 병렬적 관계의 합성어가 아니라 내부구조를 지니지 않은 단순한 단어(minimal $X^{0}$ elements)로 가정한다. 즉, [+wh] 의미의 겹의문사는 동일한 구성요 소를 지닌 병렬적 합성어([$[W1]_{XO-}$ $[W1]_{XO}$ ]

• 한국치위생학회지
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• 제19권2호
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• pp.173-181
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• 2019

Objectives: The resin infiltration technique is a promising alternative therapy for arresting the early dental caries. However, there are very few reports on the safety and biocompatibility of this technique. We evaluated various properties of resin infiltrant (RI) based on a triethylene glycol dimethacrylate (TEGDMA).The water sorption (Wsp) and water solubility (Wsl) was assessed. Additionally, the cytotoxicity of RI against both animal and human fibroblast cell lines was investigated. Methods: The RI of the $Icon^{(R)}$, the first product developed for resin infiltration, is mainly composed of TEGDMA in the resin matrix. The Wsp and Wsl for the RI were measured in accordance with ISO 4049 specifications. Fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR) was used for analyzing the polymerization before and after curing of RI. The cytotoxicity of RI against the mouse fibroblasts (L929) and human gingival fibroblasts (hTERT-hNOF) was evaluated using MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay and the data were analyzed using one-way analysis of variance. Results: Wsp and Wsl of the RI specimens were $53.37{\mu}g/mm^3$ and $10.6{\mu}g/mm^3$, respectively. FTIR analysis revealed a slightly higher degree of curing with longer irradiation time. The degree of conversion for RI was high (80.9%) after 40 seconds of light curing. There was a significant decrease in the viability of L929 and hTERT-hNOF cells at RI extraction solution concentrations above 50%, respectively, compared to that in the negative control (p< 0.05). Conclusions: Even though the RI exhibited positive effect on the early prevention of dental caries, the clinicians should also consider the toxicity of RI on periodontal tissues.

• 한국식품과학회지
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• 제32권3호
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• pp.699-705
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• 2000

인간의 체내에서 과량으로 생성된 활성산소가 자체 방어기전에 의해서 분해 혹은 소거되지 않는 경우에 이는 생체 조직 내 세포와 면역체계에 관련된 효소들을 손상시켜 암이나 면역질환과 같은 퇴행성 질환을 야기 시키는 것으로 알려지고 있다. 이에 본 연구에서는 고대 이집트 시대이래 지금까지 서구에서 약초 혹은 향초로서 사용되어온 13종 허브추출물에 대해서 유해산소 소거능을 검색하고 SRB assay 방법에 따라 두가지 암세포주(Hepa-lclc7, KB-3-1)와 정상세포주(L-929)에 대한 세포 독성을 조사하였다. 또한 이들에 의한 대식세포의 활성화와 같은 면역체계의 증강 유도 여부를 파악하기 위하여 NO test에 따라 대식세포의 활성화 정도를 간접적으로 측정하였다. 그 결과 13종류의 허브추출물에서 일반적으로 medicinal 허브로 분류되고 있는 eucalyptus, peppermint, mate, sage, thyme, yarrow 등의 수퍼옥사이드 소거능이 다른 허브들에 비해 상대적으로 강한 것으로 나타났다. 또한 이들은 Hepa-1c1c7, KB-3-1과 같은 암세포주 및 L-929와 같은 정상세포주에 대하여도 세포독성을 나타냈으며 이때 각각의 허브추출물에 의해 측정된 암세포주에 대한 $IC_{50}$ 값들은 정상세포주에 대한 $IC_{50}$ 값들보다 크거나 유사한 경향을 나타내어 암세포주에만 선택적으로 세포독성을 나타내지 않았다. 면역증강 활성실험에 있어서는 수퍼옥사이드 소거능이 다른 허브들에 비해 상대적으로 강한 6종류의 허브추출물 중에서 sage 만이 표준시료의 37% 정도의 활성을 나타내어 각 시료의 수퍼옥사이드 소거능과 면역증강 활성과의 연관성은 크지 않은 것으로 나타났다.

• 동의생리병리학회지
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• 제18권4호
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• pp.1028-1035
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• 2004

Imperatorin, a biologically active furanocoumarin from the roots of Angelica dahurica (Umbelliferae), was mutagenic and induced transformation of mouse fibroblast cell lines, whereas it provided inhibiting effects on mutagenesis and carcinogenesis induced by various carcinogens. Furthermore, it has been suggested that imperatorin may have potential anticarcinogenic effects when administered orally in the diet. In addition to its anticarcinogenic properties, imperatorin has been shown to possess anticancer activities. We investigated the macro scale gene expression analysis on the HL-60 cells treated with imperatorin. Imperatorin (10μM) were used to treat the cells for 6h, 12h, 24h, 48h, and 72h. In a human cDNAchip study of 10,000 genes evaluated 6, 12, 24, 48, 72 hours after treated with imperatorin in HL-60 cells. Hierarchical cluster against the genes which showed expression changes by more than 2 fold. Three hundred eighty six genes were grouped into 6 clusters by a hierarchical clustering algorithm. Pathway analysis using gene microarray pathway prof Her that is a computer application designed to visualize gene expression data on screen representing biological pathways and groupings of genes.

• Nutrition Research and Practice
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• 제13권2호
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• pp.95-104
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• 2019

BACKGROUND/OBJECTIVES: Inflammatory Bowel Disease (IBD) has rapidly escalated in Asia (including Korea) due to increasing westernized diet patterns subsequent to industrialization. Factors associated with endoplasmic reticulum (ER) stress are demonstrated to be one of the major causes of IBD. This study was conducted to investigate the effect of Lycium barbarum (L. barbarum) on ER stress. MATERIALS/METHODS: Mouse embryonic fibroblast (MEF) cell line and polarized Caco-2 human intestinal epithelial cells were treated with crude extract of the L. chinense fruit (LF). Paracellular permeability was measured to examine the effect of tight junction (TJ) integrity. The regulatory pathways of ER stress were evaluated in MEF knockout (KO) cell lines by qPCR for interleukin (IL) 6, IL8 and XBP1 spliced form (XBP1s). Immunoglobulin binding protein (BiP), XBP1s and CCAAT/enhancer-binding homologous protein (CHOP) expressions were measured by RT-PCR. Scanning Ion Conductance Microscopy (SICM) at high resolution was applied to observe morphological changes after treatments. RESULTS: Exposure to LF extract strengthened the TJ, both in the presence and absence of inflammation. In polarized Caco-2 pretreated with LF, induction in the expression of proinflammatory marker IL8 was not significant, whereas ER stress marker XBP1s expression was significantly increased. In wild type (wt) MEF cells, IL6, CHOP and XBP1 spliced form were dose-dependently induced when exposed to $12.5-50{\mu}g/mL$ extract. However, absence of XBP1 or $IRE1{\alpha}$ in MEF cells abolished this effect. CONCLUSION: Results of this study show that LF treatment enhances the barrier function and reduces inflammation and ER stress in an $IRE1{\alpha}$-XBP1-dependent manner. These results suggest the preventive effect of LF on healthy intestine, and the possibility of reducing the degree of inflammatory symptoms in IBD patients.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제35권1호
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• pp.123-129
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• 2011

The pig has been considered to serve as an appropriate model of human disease. Therefore, establishment of porcine embryonic stem cell lines is important. The purpose of the present study was to further work in this direction. We produced porcine parthenogenetic embryos, and separately aggregated two of each of two-cell ($2{\times}2$), four-cell ($2{\times}4$), and eight-cell ($2{\times}8$) embryos derived by parthenogenesis. After culture for 4 days, the developmental ability of the aggregates and total blastocyst cell numbers were evaluated. The percentage of blastocysts was significantly higher in both $2{\times}4$- and $2{\times}8$-aggregated embryos ($58.3{\pm}1.9%$ and $37.2{\pm}2.8%$, respectively) than in the control or $2{\times}2$-aggregated embryos ($23.6{\pm}1.1%$ and $12.5{\pm}2.4%$, respectively). Total blastocyst cell numbers were increased in the $2{\times}4$- and $2{\times}8$-aggregated embryos (by $44{\pm}3.0%$ and $45{\pm}3.3%$, respectively) compared with those of control or $2{\times}2$-aggregated embryos ($30.5{\pm}2.1%$ and $30.7{\pm}2.6%$, respectively; p<0.05). The levels of mRNA encoding Oct-4 were higher in both the $2{\times}4$- and $2{\times}8$-aggregated embryos than in the control. When blastocysts derived from $2{\times}4$- aggregated embryos or intact normal embryos were cultured on mouse embryonic fibroblast feeder cells to obtain porcine stem cells, blastocysts from aggregated embryos formed colonies that were better in shape compared with those derived from intact blastocysts. Together, the data show that aggregation of porcine embryos not only improves blastocyst quality but also serves as an efficient procedure by which porcine embryonic stem cells can become established.

• 혜화의학회지
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• 제15권2호
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• pp.135-148
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• 2006

Sophorae Radix (SFR) is known as a therapeutic drug that has been used in Oriental traditional medicine for the treatment of skin and mucosal ulcers, gastrointestinal hemorrhage, diarrhea, inflammation and arrhythmia. In the present study, we examined the effects of the aqueous extract of SFR on anti-inflammation, anti-allergic and anti-oxidant effect in various cell lines; they include mouse lung fibroblast cells (hFCs), human mast cells (HMC-1), human monocytic cells (THP-1), and RAW 264.7 cells. Treatment with SFR extract at a concentration of 250 ${\mu}g$/ml for 24h showed no significant decrease in the survival rate of the hFCs. SFR decreased the mRNA expression of IL-8, TNF-$\alpha$, and IL-6 in HMC-1 cells. SFR extract treatment significantly inhi-bited the protein expression of IL-6 and, IL-8 induced by mite in THP-1 cells and it also did MCP-1 expression. We examined the alternation of histamine release in HMC-1 cells for investigating anti-allergic effect of SFR. Histamine secretion decreased after the treatment with SFR. In addition, SFR extract treatment at a concentration of 10 ${\mu}g$/ml, 100 ${\mu}g$ /ml, and 200 ${\mu}g$/ml lowered the $\beta$-hexosaminidase to 10.3%, 21.7%, and 50.8%, respectively. IC50 of SFR extract in RBL-2H3 cells was 196.85 ${\mu}g$/ml. Both activity of NF-$\kappa$B promoter in RBL-2H3 cells significantly diminished after the dose-dependent treatment of SFR. Therefore, our results indicate that SFR has anti-inflammatory and it may be useful for treating allergic diseases such as atopic dermatitis.

• 대한화장품학회지
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• 제32권1호
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• pp.59-64
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• 2006

문주란(Crinum asiaticum Linne var. japonicum)은 한국, 말레이지아 등 동남아시아 지역에서 관절통, 해열, 궤양 치료, 국부의 소염 및 해열 등의 목적에 민간요법 등으로 오래 전부터 사용되어 오고 있다. 본 연구에서는 이러한 문주란의 화장료 조성물로서의 가능성을 확인하기 위하여 iNOS (inducible nitric oxide synthase) 억제 그리고 PGE2, IL-6, and IL-8 방출 억제에 의한 항염 효능을 측정하였다. pH를 3.5로 조절하고 95% ethanol을 사용하여 추출한 후, HPLC 실험으로 문주란의 주성분이 면역조절물질로 잘 알려진 lycorine이며 대략 1% 정도 함유한 것을 확인하였고 그 함량은 문주란의 추출 부위 및 추출방법에 따라 달랐다. 리포다당(lipopolysaccharide, LPS)에 의해 활성화된 생쥐 대식세포(RAW 264.7 cells)에서 생성되는 NO 형성의 억제능을 측정한 항염실험에서, 문주란 에탄을 추출물은 투여량에 비례하는 저해능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다($IC_{50} = 83.5 {\mu}g/mL$). 또한 RT-PCR법을 이용하여 문주란 에탄을 추출물이 iNOS 유전자 발현도 억제함을 확인하였다. 또한, 문주란 추출물은 전혀 세포독성을 보이지 않았으며 오히려 LPS에 대하여 세포증식효과를 나타내었다(세포생존율 약 $10{\sim}60%$ 증가). 인간의 섬유아세포에서 과산화수소에 의해 활성화된 PGE2, IL-6 및 IL-8 방출 억제효능 측정 실험에서는 0.05%와 1% 농도 이상에서 (PGE2와 IL-6의 분비가) 거의 완전히 억제됨을 확인할 수 있었고, 나아가서 IL-8의 경우는 모든 실험농도 범위에서 완전히 억제되었다(>0.0025%). 이러한 결과로부터 문주란의 추출물이 충분한 항염 효과를 가지고 있음을 확인할 수 있었다.