We sequenced a 522 bp fragment including the $tRNA^{Thr}$, $tRNA^{Pro}$ gene and the first half of the control region from 29 wild and cultured olive flounder specimens from Korea. Out of 522 nucleotide sites, 49 (9.4%) were variable, 23 haplotypes being found. Most haplotypes are unique in the wild population and only four were shared by cultured specimins. The nucleotide diversity and differences between wild and cultured populations were $0.025{\pm}0.013$ and $0.015{\pm}0.008$, and $12.94{\pm}6.00$ and $7.83{\pm}3.75$, respectively. Haplotype diversity was $0.98{\pm}0.02$ and $0.49{\pm}0.09$ in the wild and cultured populations, respectively. These results show that marked reductions of genetic variability in the hatchery strains were observed in the number of mitochondrial DNA haplotypes and haplotype diversity when compared to the wild populations. Furthermore, we detected significant population differentiation between both populations. The mtDNA sequencing technique used to evaluate the genetic variability of hatchery strains compared to that of the wild population is potential for genetic monitoring of olive flounder hatchery stocks.
We found skin flukes in snubnose pompano (Trachinotus blochii) from a public aquarium and attempted clear identification of them to the species level by morphology and molecular analyses. Skin flukes were collected from snubnose pompano showing dyspnea, anorexia and mild hemorrhage on the skin. All the fish samples (n=2) were infected with the flukes on the skin, gill and eyes, covered with excessive mucus. The isolated worms were transferred for making slide specimen and PCR amplification targeting 18S rDNA, 28S rDNA, mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (mt cox1) and cytochrome b (Cytb) genes for further analyses. Morphology and measurements data of our slide specimen coincided with those of Neobenedenia girellae. The sequence data of 2 genes (28S rDNA and Cytb) and the phylogenetic trees revealed that our specimen consistently belonged to the N. girellae clade. For 18S rDNA and mt cox1 genes, there was no sequence of either of these 2 Neobenedenia species from the type host available in GenBank. This is the first record of N. girellae in snubnose pompano, but it is still unclear if the snubnose pompano is a natural host for N. girellae or not because N. girellae is known to have an unusual broad host range and the host-switching can occur particularly in captive conditions such as aquarium or aquaculture facilities.
Hwang, Il Ki;Kim, Seung-Oh;Hwang, Mi Sook;Park, Eun-Jeong;Ha, Dong-Soo;Lee, Sang-Rae
ALGAE
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v.33
no.1
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pp.49-54
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2018
Red algal mitochondrial genomes (mtDNAs) can provide useful information on species identification. mtDNAs of Pyropia / Porphyra (Bangiales, Rhodophyta) have shown diverse variation in their size and gene structure. In particular, the introns and intronic open reading frames found in the ribosomal RNA large subunit gene (rnl) and cytochrome c oxidase subunit 1 gene (cox1) significantly vary the mitochondrial genome size in Pyropia / Porphyra species. In this study, we examined the exon / intron structure of rnl and cox1 genes of Pyropia yezoensis at the intraspecific level. The combined data of rnl and cox1 genes exhibited 12 genotypes for 40 P. yezoensis strains, based on the existence of introns. These genotypes were more effective to identify P. yezoensis strains in comparison to the traditional DNA barcode cox1 marker (5 haplotypes). Therefore, the variation in gene structure of rnl and cox1 can be a novel molecular marker to discriminate the strains of Pyropia species.
China has a long history of sheep (Ovis aries [O. aries]) breeding and an abundance of sheep genetic resources. Knowledge of the complete O. aries mitogenome should facilitate the study of the evolutionary history of the species. Therefore, the complete mitogenome of O. aries was sequenced and annotated. In order to characterize the mitogenomes of 3 Chinese sheep breeds (Altay sheep [AL], Shandong large-tailed sheep [SD], and small-tailed Hulun Buir sheep [sHL]), 19 sets of primers were employed to amplify contiguous, overlapping segments of the complete mitochondrial DNA (mtDNA) sequence of each breed. The sizes of the complete mitochondrial genomes of the sHL, AL, and SD breeds were 16,617 bp, 16,613 bp, and 16,613 bp, respectively. The mitochondrial genomes were deposited in the GenBank database with accession numbers KP702285 (AL sheep), KP981378 (SD sheep), and KP981380 (sHL sheep) respectively. The organization of the 3 analyzed sheep mitochondrial genomes was similar, with each consisting of 22 tRNA genes, 2 rRNA genes (12S rRNA and 16S rRNA), 13 protein-coding genes, and 1 control region (D-loop). The NADH dehydrogenase subunit 6 (ND6) and 8 tRNA genes were encoded on the light strand, whereas the rest of the mitochondrial genes were encoded on the heavy strand. The nucleotide skewness of the coding strands of the 3 analyzed mitogenomes was biased toward A and T. We constructed a phylogenetic tree using the complete mitogenomes of each type of sheep to allow us to understand the genetic relationships between Chinese breeds of O. aries and those developed and utilized in other countries. Our findings provide important information regarding the O. aries mitogenome and the evolutionary history of O. aries inside and outside China. In addition, our results provide a foundation for further exploration of the taxonomic status of O. aries.
Genetic diversities, population genetic structures and demographic histories of the thread-sail filefish Stephanolepis cirrhifer were investigated by nucleotide sequencing of 336 base pairs of the mitochondrial DNA (mtDNA) control region in 111 individuals collected from six populations in Korean coastal waters. A total of 70 haplotypes were defined by 58 variable nucleotide sites. The neighbor-joining tree of the 70 haplotypes was shallow and did not provide evidence of geographical associations. Expansion of S. cirrhifer populations began approximate 51,000 to 102,000 years before present, correlating with the period of sea level rise since the late Pleistocene glacial maximum. High levels of haplotype diversities ($0.974{\pm}0.029$ to $1.000{\pm}0.076$) and nucleotide diversities (0.014 to 0.019), and low levels of genetic differentiation among populations inferred from pairwise population FST values (-0.007 to 0.107), support an expansion of the S. cirrhifer population. Hierarchical analysis of molecular variance (AMOVA) revealed weak but significant genetic structures among three groups ($F_{CT}$ = 0.028, p<0.05), and no genetic variation within groups (0.53%; $F_{SC}$ = 0.005, p = 0.23). These results may help establish appropriate fishery management strategies for stocks of S. cirrhifer and related species.
In order to clarify intra-and inter-specific variation of Korean Rana species, the partial DNA sequences of mitochondrial 16S rDNA gene were determined from 6 Korean and 1 Japanese Rana species, DNA sequences from Korean and Japanese species were comparison-analysed within, and also with the sequences from three species of Japanese brown frogs. DNA similarities were calculated as 91.3∼97.3% among brown frog (R. amurensis coreana, R. dybowskii and R. huanrenensis), as 96.11∼97.26% among pond frogs (R. nigromaculata and R. planeyi chosenica). Genetic distance of pond frog and wrinkle fyog (R. rugosa) were near than that of pond frog and brown frog. Two clusters were formed brown frogs and the other group by neigh-bor-joining and maximum-likelihood analysis, also the populations of R. nigromaculata were well distinguished between Korean peninsula and Korean island. But result from maximum-likelihood analysis slightly differed from neighbor-joining to cluster of R. rugosa. Further analyses for their population will be necessary to study the phylogenetic status.
Ten specimens of Brama dussumieri (family Bramidae) were collected from waters off Jeju Island, Busan, and Gangneung, Korea, during 2013-2014. The specimens were characterized by having 58-64 lateral line scales and 13-15 gill rakers. An analysis of 567 base pair sequences of mitochondrial DNA cytochrome c oxidase subunit I showed that sequences in our ten specimens are concordant with those of B. dussumieri from the USA, India, and Japan, although with slight differences (genetic distance = 0.000-0.018). Brama dussumieri was distinguished from the most similar species, Brama japonica, by the number of lateral line scales (57-65 in B. dussumieri vs. 65-75 in B. japonica) and the number of gill rakers (13-15 in B. dussumieri vs. 17-20 in B. japonica). We propose the new Korean name "Wae-sae-da-rae" for B. dussumieri in Korea.
Thirty five juveniles belonging to the genus Collichthys were collected using a bag net at Gang-wha-do, in the eastern Yellow Sea, between July and September, 2012, and identified using combined genetic and morphological methods. We sequenced 316 base pairs of mitochondrial DNA cytochrome c oxidase subunit I of 35 individuals, of which 22 individuals were identified as Collichthys niveatus (12.9-47.6 mm in SL) and 13 as Collichthys lucidus (13.4-40.3 mm SL). Morphologically, the number of occipital crests, an important taxonomic character during the adult stage, could not distinguish the two species during the juvenile stage, but the shape of the first anal fin spine clearly distinguished the two species even among juveniles.
MicroRNAs (miRNAs) have been reported to be involved in many neurodegenerative diseases. The present study focused on the role of hsa-miR-144-3p in one of the neuro-degenerative diseases, Parkinson's disease (PD). Our study showed a remarkable down-regulation of miR-144-3p expression in 1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine (MPTP)-treated SH-SY5Y cells. MiR-144-3p was then overexpressed and silenced in human SH-SY5Y cells by miRNA-mimics and miRNA-inhibitor transfections, respectively. Furthermore, ${\beta}$-amyloid precursor protein (APP) was identified as a target gene of miR-144-3p via a luciferase reporter assay. We found that miR-144-3p overexpression significantly inhibited the protein expression of APP. Since mitochondrial dysfunction has been shown to be one of the major pathological events in PD, we also focused on the role of miR-144-3p and APP in regulating mitochondrial functions. Our study demonstrated that up-regulation of miR-144-3p increased expression of the key genes involved in maintaining mitochondrial function, including peroxisome proliferator-activated receptor ${\gamma}$ coactivator-$1{\alpha}$(PGC-$1{\alpha}$), nuclear respiratory factor 1 (NRF-1) and mitochondrial transcription factor A (TFAM). Moreover, there was also a significant increase in cellular ATP, cell viability and the relative copy number of mtDNA in the presence of miR-144-3p overexpression. In contrast, miR-144-3p silencing showed opposite effects. We also found that APP overexpression significantly decreased ATP level, cell viability, the relative copy number of mtDNA and the expression of these three genes, which reversed the effects of miR-144-3p overexpression. Taken together, these results show that miR-144-3p plays an important role in maintaining mitochondrial function, and its target gene APP is also involved in this process.
Kwon, Han-Sol;Park, Hyun-Chul;Lee, Kyungmyung;An, Sanghyun;Oh, Yu-Li;Ahn, Eu-Ree;Jung, Ju Yeon;Lim, Si-Keun
Analytical Science and Technology
/
v.29
no.2
/
pp.79-84
/
2016
A small and inexpensive thermal cycler (PCR machine), known as the MiniPCRTM Mini8 Thermal Cycler (Amplyus, Cambridge, MA, USA), was developed. In this study, the performance of this PCR machine was compared with the GeneAmp® PCR system 9700 (Applied Biosystems) using four autosomal short tandem repeat (STR) kits, a Y-chromosome STR kit, and a mitochondrial DNA HV1/HV2 sequence analysis. The sensitivity and stochastic effects of the STR multiplex kits and the quality of the DNA sequence analysis were similar between the two PCR machines. The MiniPCRTM Mini8 Thermal Cycler could be used for analyses at forensic DNA laboratories and crime scenes. The cost of the PCR is so economical that school laboratories and individuals could use the machines.
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