• 한국잠사곤충학회지
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• 제27권1호
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• pp.1-11
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• 1985

1979년 경북지방에서 발생한 병잠으로부터 분리된 새로운 미포자충 K79의 형태, 성장, 발육경과 및 분류학적 위치를 구명하기 위하여 포자의 병원성, 광학현미경에 의한 감염조직의 소견, 전자현미경적 소견을 조사한 결과는 다음과 같다. K79포자의 병원성은 N. bombycis 보다 약하였고 누에에 대한 K79의 감염부위는 중양피막세포, 혈구, 기관피막, 지방조직, 견사선이었다. K79의 발육과정은 sporoplasm, schizont, sporont, sporoblast, spore의 단계로서 N. bombycis와 유사하였으나 발육속도는 늦었다. 미포자충 포자의 전자현미경적인 미세구조는 포자외각의 돌출부와 돌출부사이가 44.28mm였다. 또한 anchoring disk는 우산형이었고 polaroplast, lamellae는 manubroid 상단부에 부착되어 있었다. 극사의 coil 전회수는 K79 16회이고 coil 각도는 75$^{\circ}$였고, 핵은 두 개의 연핵으로 되어 있어 분류학적으로 보면 Nosema 속에 속하는 신종의 미포자충이라고 사료되며 그 표기는 Nosema sp. K79로 기록함이 타당하다고 본다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제48권4호
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• pp.297-301
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• 2010

Recently, emerging waterbome protozoa, such as microsporidia, Cyclospora, and Cryptosporidium, have become a challenge to human health worldwide. Rapid, simple, and economical detection methods for these major waterborne protozoa in environmental and clinical samples are necessary to control infection and improve public health. In the present study, we developed a multiplex PCR test that is able to detect all these 3 major waterborne protozoa at the same time. Detection limits of the multiplex PCR method ranged from $10^1$ to $10^2$ oocysts or spores. The primers for microsporidia or Cryptosporidium used in this study can detect both Enterocytozoon bieneusi and Encephalitozoon intestinalis, or both Cryptosporidium hominis and Cryptosporidium paNum, respectively. Restriction enzyme digestion of PCR products with BsaBI or BsiEI makes it possible to distinguish the 2 species of microsporidia or Cryptosporidium, respectively. This simple, rapid, and cost-effective multiplex PCR method will be useful for detecting outbreaks or sporadic cases of waterborne protozoa infections.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제28권1호
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• pp.54-60
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• 1986

야외곤충에 대한 미포자충의 감염여부와 곤충에서 검출된 미포자충의 누에에 대한 감영성 조사 결과는 아래와 같다. 1. 채집한 66종의 야외곤충으로부터 미포자충이 검출된 야외곤충은 똥쉬파리, 꿀벌, 배추흰나비(유충), 아이노각다구, 등록색잎벌레, 벗나무풍뎅이, 노랑테불나방, 밀잠자리, 먼지벌레 및 벼잎벌레 등 10종이었다. 2. 추출된 미포자들을 크기에 따라 분류한 바 똥쉬파리로부터는 3종, 그리고 다른 곤충으로 부터는 각기 다른 1종의 미포자충이 검출됨으로써 총 12종의 미포자충이 분리되었다. 3. 똥쉬파리, 꿀벌 및 배추흰나비(유충)에서 검출된 미포자충들을 누에에의 교우감영성을 실험한 바 어느 것도 교유감염이 나타나지 않았다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제11권2호
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• pp.107-111
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• 2005

Impact of microsporidian infection and season on reproductive potential of Bombyx mori L. was investigated in the laboratory. Microsporidian infection significantly (P<0.01) reduced fecundity and hatching and increased sterility and mortality of eggs. Among the microsporidia, Nosema sp. 2 infected silkworm produced eggs with least fecundity and hatching percent as well as highest dead and sterile eggs followed by Nosema sp. 1 and N. bombycis. Microsporidia, in general, significantly reduced fecundity and hatching percent of eggs and increased number of dead and sterile eggs in all the three seasons except N. bombycis in July - August (S3) and Nosema sp. 2 in January February (S1). Since, seed production is the anchor sheet of mulberry sericulture, coefficient of egg lying is considered as an important aspect and the industry quite often facing shortage of disease free layings. The present study indicates that B. mori is more susceptible to microsporidia during S2 followed by S3 and S1 and Nosema sp2. is most virulent followed by Nosema spl. and N. bombycis.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제18권2호
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• pp.83-89
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• 2009

Multiplication and spore production of three microsporidia(Nosema bombycis, Nosema sp. 1 and Nosema sp. 2) in selected tissues of pupa and adult of silkworm, Bombyx mori L. were studied in two seasons (SI, SII) with distinct temperature (SI: $20.1{\pm}0.8^{\circ}C$ and SII: $25.1{\pm}0.7^{\circ}C$) regimes. Multiplication of the microsporidia followed a logistic pattern with a lag phase, an exponential phase and a stationary phase. In SII, spore production was significantly (P<0.01) higher in various tissues. Highest spore production was observed 30 days post inoculation (p.i.) in SI and in SII, it was $21{\sim}23$ days p.i. Spore production was significantly (P<0.01) higher in the gut tissues than other tissues. Nosema sp. 2 registered significantly (P<0.01) higher spore production in both the seasons compared to Nosema bombycis and Nosema sp. 1. Results indicate that the multiplication and spore production of microsporidia are tissue specific and extremely sensitive to the temperature at which the host is reared. Through this study, the precise day that the spore numbers of the microsporidia are maximized can be predicted in both pupa and adult in case the infection is initiated in the first instar.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제26권2호
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• pp.1-6
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• 1984

미포자충 포자의 정제법을 개발하고 포자표면의 혈청학적 반응을 구명하기 위하여 수행한 시험결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 미포자충 포자의 분리정제는 예비원심-percoll 평형밀도원심-세척의 3단계법이 우수하였고, 분리정제된 포자는 극사추출에 나쁜 영향도 받지 않았다. 2. 포자의 형태는 K79 포자가 장타원형(장단경비 2.76)이고 N. bombycis는 단타원형(장단경비 2.07)으로 양포자가 상이하였다. 3. 형광항체 간접법에 의하여 항 N. bombycis 포자혈청에 대하여는 N. bomvycis 포자만이 강한 형광을 발현하였으나 항 K79 포자의 혈청에 대하여는 10배희석구에서는 양포자 모두 강하게, 20배 이상 희석구에서는 약하게 형광을 발현하였고 K79 포자의 특이항체가 포자외각에 인정되었다.

• Current Research on Agriculture and Life Sciences
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• 제1권
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• pp.67-83
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• 1983

1980년(年) 한국(韓國)에서 발견(發見)된 Microsporidia S 80은 포자(胞子)의 길이가 $2.9{\pm}0.28{\mu}$ 폭(幅)이 $1.7{\pm}0.29{\mu}$으로 난원형(卵圓形)인데 그 크기가 형태(形態)로 보아 누에에 기생(寄生)하는 Microsporidia로서 지금까지 한국(韓國)이나 일본(日本)에서 알려진 것 들과는 다른 것이다. 과산화수소(過酸化水素) 원액(原液)으로 처리(處理)하였을때에 추출(抽出)된 극사(極絲)의 길이는 평균(平均) $26{\mu}$이었고 극사(極絲)의 선단(先端)에서 둥근 모양의 sporoplasm이 돌출(突出)되어 있는 것이 관찰(觀察)되었다. 한편 포자(胞子)는 Giemsa, Safranin-O, Gram 등(等)의 염색(染色)에서 부분적(部分的)으로 염색(染色)되는 특징(特徵)이 나타났으며, 전자현미경(電子顯微鏡)으로 관찰(觀察)한 포자(胞子)의 미세구조(微細構造)는 제일 바깥 부분(部分)이 전자밀도(電子密度)가 높고 요철(凹凸)이 있는 얇은 exospore로 둘러싸여 있고 그 안쪽에는 투명(透明)하고 두꺼운 endospore가 있는데 endospor는 포자(胞子)의 정단부(頂端部)가 다른 부위(部位)보다 상당히 얇은데 이곳으로 극사(極絲)가 추출(抽出)되는 것으로 생각된다. endospore와 cytoplasm과의 경계부(境界部)에는 세포질(細胞質)을 싸고 있는 한층(層)의 한계막(限界膜)인 inner limitting layer가 있다. 세포질(細胞質)의 전단부(前端部)에는 polar cap이 있고 그 밑에는 lamellar 구조(構造)의 발달(發達)된 polaroplast가 있으며 polaroplast의 후부(後部)는 vesiculate part로 되어 있는 것으로 보인다. polar filament는 anchoring disc인 polar cap에서 곧게 뻗어 나아가다가 포자(胞子)의 내벽(內壁)을 따라 돌면서 용수철 처럼 말려 있는데 polar filament의 coiled part 중앙(中央)에 2중막(重膜)에 싸여진 전자밀도(電子密度)가 높은 후형질(厚形質)로된 2핵(核)이 인접(隣接)하여 있으며 포자(胞子)의 부단부(部端部)에는 posterior vacuole이 있을 것이다. 이러한 포자(胞子)의 크기와 형태(形態) 및 미세구조(微細構造)로 보아 Microsporidia인 것을 확인(確認)할 수 있으며 분류학(分類學) 상(上)의 위치(位置)는 Microsporea 강(綱), Microsporidia 일(日)에 소속(所屬)시킬 수 있고 아목(亞目) 및 속(屬)을 규명(糾明)하기 위(爲)해서는 그 생활사(生活史)가 밝혀져야 한다. Mcrosporidia S80을 2령(齡) 기잠(起蠶)에 경구접종(經口接種)한 경우(境遇)의 LD50은 $7.1{\times}10^7/ml$로서 $1.2{\times}10^7/ml$인 Nosema bombycis와 비교(比較)할때 병원성(病原性)이 낮은 것으로 나타났으나 그 발생지역(發生地域)이 경기도(京畿道)를 중심(中心)으로 인접지역(隣接地域)인 강원(江原), 충북(忠北) 충남(忠南) 및 전남(全南)에서도 발생(發生)되고 있는 점(點)과 4령기(齡期) 접종시(接種時) 전견중(全繭重)과 견층중(繭層重)에 나쁜 영향(影響)을 미칠뿐 아니라 화아비율(化蛾比率)이 낮고, 감염(感染)된 모아(母蛾)는 물론 감염(感染)된 웅아(雄蛾)와 교미(交尾)한 모아(母蛾)에서도 산란불능아(産卵不能蛾)가 발생(發生)하거나 산란수(産卵數)가 건전구(健全區)에 비(比)하여 떨어지는 동시(同時)에 부수정란(不受精卵) 비율(比率)도 높은 것으로 볼 때 사견양잠(絲繭養蠶)은 물론 종견양잠(種繭養蠶)에 있어서도 피해(被害)를 입고 있을 것으로 본다. 감염모아(感染母蛾) 21마리에서 얻은 차대잠(次代蠶)의 검사결과(檢査結果) 경란전달(徑卵傳達)은 되지 않는 것으로 나타났으나 혹시 경란전달(徑卵傳達)이 된다고 해도 그 빈도(頻度)는 매우 낮을 것이며 1/21 미만(未滿)일 것으로 생각된다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제12권2호
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• pp.87-93
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• 2006

Multiplication and spore production of three microsporidia viz., Nosema bombycis, Nosema sp. 1 and Nosema sp. 2 in fifth instar larval tissues of silkworm, Bombyx mori L. in two seasons with distinct temperature regimes were studied. Nosema sp. 2 produced significantly (P < 0.01) higher number of spores in various tissues. Among the tissues, spore production was highest in silk gland, followed by fat body and gut. Spore production was significantly (P < 0.01) higher in season-II (Average temperature $29.4{\pm}1.1^{\circ}C$). Maximum spore production was observed 25 days post inoculation (p. i.) in season-I (Average temperature $18.9{\pm}1.1^{\circ}C$), whereas in season-II, it was 14 days p. i. In season-I, spore production was low up to 21 days p. i., then increased sharply. In season-II, there was a steady increase in spore production. The results indicate that the microsporidian multiplication is tissue specific and extremely sensitive to temperature at which the host is reared. It also reveals that, silk gland, fat body and gut are the most appropriate tissues for microscopic identification of microsporidia in the larval stage.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제31권2호
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• pp.113-120
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• 1989

가잠에서 분리된 새로운 미포자충(S85)의 특성을 구명하기 위한 일환으로 포자의 미세구조를 전자현미경으로 관찰한 결과는 아래와 같다. 1. 포자는 전자밀도가 상이한 3층의 피각으로 되어 있으며 그 외각은 전자밀도가 높고 요철이 다소 심한 편이고 내각은 전자밀도가 낮으며 포자피각 두께의 대부분을 차지하였다. 2. 극막층은 그 배열이 조밀하고 성긴 두 부분의 Lamellae 구조로 되어 있었다. 3. 극사는 13개의 coil을 가지고 있으며 전자밀도가 서로 다른 8개의 동심원층으로 되어 있었다. 4. 포자는 1개의 핵을 가지고 있으며 다포자아막을 형성하고 막내에 16개 이상의 포자를 가지고 있었다. 5. 포자의 표면은 거칠고 주름이 있으며 다포자 아막은 고무풍선처럼 생긴 얇은 막구조로서 표면에는 약간의 주름이 있었다.

• International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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• 제27권2호
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• pp.219-227
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• 2013

The purpose of this study was to quickly and effectively identify the Nosema disease of bumblebees in Gangwon Province in Korea. Bumblebees are crucial pollinators of various crops, and microsporidia are the critical pathogens of these hosts. When bumblebees are infected with Nosema bombi, their abdomens can become distended. Paralyzed and infected workers often become sluggish and die early. We have identified the morphology of the microsporidium by light and electron microscopy, and found it to have fairly small oval spores, as has been described previously in many other articles. For the specific and sensitive diagnosis of the microsporidian parasite N. bombi in bumblebees, we have developed an improved method of the polymerase chain reaction (PCR) for expeditious diagnosis. Two pairs of primers were tested on N. bombi and the related microsporidia Nosema apis and Nosema sp., both of which infect Bombus ignitus and Bombus hypocrita sapporoensis. Furthermore, we have verified and analyzed the 16SrRNA sequence data of N. bombi in bumblebees by using the Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) server at the National Center for Biotechnology Information.