Involuntary hand tremor has been a serious challenge in micromanipulation tasks and thus draws a significant amount of attention from related fields. To minimize the effect of the hand tremor, a variety of mechanically assistive solutions have been proposed. However, approaches increasing human awareness of their own hand tremor have not been extensively studied. In this paper, a head mount display based virtual reality (VR) system to increase human self-awareness of hand tremor is proposed. It shows a user a virtual image of a handheld device with emphasized hand tremor information. Provided with this emphasized tremor information, we hypothesize that subjects will control their hand tremor more effectively. Two methods of emphasizing hand tremor information are demonstrated: (1) direct amplification of tremor and (2) magnification of virtual object, in comparison to the controlled condition without emphasized tremor information. A human-subject study with twelve trials was conducted, with four healthy participants who performed a task of holding a handheld gripper device in a specific direction. The results showed that the proposed methods achieved a reduced level of hand tremor compared with the control condition.
This study was conducted to examine the effect of oocyte donor age and micromanipulation medium on the development of mouse cloned embryos receiving cumulus cells. Mouse oocytes were obtained from 6 to 11 week-old mice BDF1 female mice(experiment 1) and cumulus cells were used as donor cells. Micromanipulation procedures for nuclear transfer(NT) were performed in FHM, M2 or Hepes-buffered TCM199(TCM199) medium(experiment 2). After nuclear transfer, the reconstructed oocytes were activated by 10 mM $SrCl_2$ in Ca-free CZB medium in the presence of 5 II ${\mu}$g/ml cytochalasin B for 5 h and cultured in KSOM medium for 4 days. In experiment 1, the survival rate of oocytes after injection of cumulus cells were significantly(p<0.05) lower in oocytes from 6~7 week-old mice(53.3%) than in oocytes from 8~9(80.9%) and 10~11 week-old mice(77.1%). In experiment 2, the survival rate of oocytes after cell injection were significantly(p<0.05) higher in FHM and M2 medium(71.7% and 76.9%) than in TCM199 medium(51.2%). The activation rates of cloned embryos were not different among the micromanipulation media. However, the embryos developed to blastocyst stage were significantly(p<0.05) higher in FHM medium(13.9%) than in M2 and TCM199 medium(0.0% and 0.0%). In conclusion, the present study suggest that oocytes from above 8 week-old mice are superior to oocytes from 6~7 week-old mice as a source of recipient cytoplasm and FHM is superior to M2 and TCM199 as a micromanipulation medium for mouse somatic cell cloning.
Micromanipulation and fusion are essential to generate nuclear transfer embryos. In this process cytoplasmic damage is unavoidable. This study investigated the hypothesis that higher osmolarity than normal culture medium could help oocytes recover from cytoplasmic damage from micromanipulation and electric pulse. Oocytes derived from a local slaughter house were matured for 42 ∼ 44 h and enucleated. (omitted)
This study was conducted to develop a method for production of nuclear transplant bovine embryos using in vitro-matured (IVM) oocytes and to examine the effect of different conditions of electrofusion on fusion rate and developmental capacity of donor nucleus transplanted to enucleated oocytes. Eight- to sixteen-cell embryos derived from oocytes matured and fertilized in vitro used as donor blastomeres and IVM oocytes were used as recipient oocytes. Oocytes were enucleated immediately after 23-24 h IVM and then reconstituted with a donor blastomere in two different micromanipulation media. Fusion rate and subsequent development of the reconstituted oocytes was compared under the different electric stimuli and recipient oocyte ages. Success rate of enucleation was significantly higher in TCM-199 medium containing FCS than in DPBS. The high fusion rate(75-94%) and development (6.4-14.8%) to morulae and blastocyst (M + B) were obtained from 0.6-0.75 kV/cm DC voltage, although total cleavage was not different among the electric pulses. Most optimal condition of electric stimulation for fusion and development was 1 DC voltage of 0.75 kV/cm, in which 80.5% of oocytes were fused, 80.0% and 31.7% of which was cleaved and developed to M + B, respectively. No M + B was obtained from 1.2 kV/cm DC voltage regardless of pulse frequency. Recipint oocyte age at electrofusion greatly affected the cleavage and subsequent development to M + B, showing high rate at 40-41 h oocyte maturation. These results suggest that a suitable condition of electrofusion for donor nuclei derived from IVF may be 1-2 DC pulses of 0.7 kV/cm for $70{\mu}sec$ and that processing of a transplanted nucleus in IVM oocytes may be affected by maturation age of recipient oocytes.
Kim, Mi-Jeong;Jung, Bae-Dong;Park, Choon-Keun;Cheong, Hee-Tae
한국발생생물학회지:발생과생식
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제25권1호
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pp.43-53
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2021
We examine the effect of endoplasmic reticulum (ER) stress inhibitor treatment time on the in vitro development of porcine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos. Porcine SCNT embryos were classified by four groups following treatment time of ER stress inhibitor, tauroursodeoxycholic acid (TUDCA; 100 µM); 1) non-treatment group (control), 2) treatment during micromanipulation process and for 3 h after fusion (NT+3 h group), 3) treatment only during in vitro culture after fusion (IVC group), and 4) treatment during micromanipulation process and in vitro culture (NT+IVC group). SCNT embryos were cultured for six days to examine the X-box binding protein 1 (Xbp1) splicing levels, the expression levels of ER stress-associated genes, oxidative stress-related genes, and apoptosis-related genes in blastocysts, and in vitro development. There was no significant difference in Xbp1 splicing level among all groups. Reduced expression of some ER stress-associated genes was observed in the treatment groups. The oxidative stress and apoptosis-related genes were significantly lower in all treatment groups than control (p<0.05). Although blastocyst development rates were not different among all groups (17.5% to 21.7%), the average cell number in blastocysts increased significantly in NT+3 h (48.5±2.3) and NT+IVC (47.7±2.4) groups compared to those of control and IVC groups (p<0.05). The result of this study suggests that the treatment of ER stress inhibitor on SCNT embryos from the micromanipulation process can improve the reprogramming efficiency of SCNT embryos by inhibiting the ER and oxidative stresses that may occur early in the SCNT process.
Abnormalities of structure and morphology of chromosomes concentrated with genetic materials, DNA, are directly related to phenotypical performances of animals. So, cytogenetical research in domestic animals is important to prevent congenital deformity and improve genetic performances. Especially utilities of egg transfer technique combined with cytogenetical study can be accelerated by the wide spread of the best genetic sources dependent on the micromanipulation and sexing of eggs.
The purpose of this study is to improve fertilization rate in IVF-ET program of patients with male infertility used micromanipulation technique, partial zona dissection (PZD) or micro-insemination by sperm transfer (MIST). The results were as follows 1. The fertilization rate of non-micromanipulated oocytes and micromanipulated (PZD) oocytes were 12.5% (n=2) and 42.2% (n=19), respectively, and showed significant differences between two groups (p<0.05). 2. The fertilization rate of micromanipulated (MIST) oocytes was 30% (n=27). 3. The damage rate of Group 1 (PZD) and Group 2 (MIST) were 15.7% (3/19) and 29.6% (8/27), respectively. 4. One pregnancy resulted following replacement of micromanipulated (MIST) embryos in 4 patients.
The possible use of micromanipulative biopsy and PCR of the biopsied embryonic cells was tested to produce sexed bovine embryos in practical terms. By micromanipulation and PCR techniques, higher survival rate and accurate sexing of demi-embryos were btained. Bovine oocytes matured and fertilized in vitro were co-cultured with bovine oviductal epithelial cell (BOEC) monolayer in USU-6 medium supplemented with 15% FBS, and the embryos of 37% (327/885) were developed to blastocysts. Among 111 blastocysts produced by invitro, only 7 (6.3%) embryos were found unable to determine their sex, probably due to the loss of cells, since no PCR product was found from those cells. All the remaining 104 (93.7%) demi-embryos survived micromanipulation and demonstrated male-specific product or bovine-specific product alone suggesting that correct sexing of the sample. Forty-three point one percent(25/58) of manipulated and cryopreserved demi-embryos after thawing were survived. Final verification of the sexed embryos is necessary to make sure the same sex in fetus and newborn calf upon embryo transfer. The established sexing method on a large number of bovine embryos from previous and this study suggests that this a could be used practically in the field.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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