Ma, Xiaojian;Wu, Chongde;Jun, Huang;Zhou, Rongqing;Shi, Bi
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권7호
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pp.1168-1177
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2018
The aim of this study was to investigate the microbial community of three tannery wastewater treatment plants (WWTPs) involved in nitrification by Illumina MiSeq sequencing. The results showed that highly diverse communities were present in tannery wastewater. A total of six phyla, including Proteobacteria (37-41%), Bacteroidetes (6.04-16.80), Planctomycetes (3.65-16.55), Chloroflexi (2.51-11.48), Actinobacteria (1.91-9.21), and Acidobacteria (3.04-6.20), were identified as the main phyla, and Proteobacteria dominated in all the samples. Within Proteobacteria, Beta-proteobacteria was the most abundant class, with the sequence percentages ranging from 9.66% to 17.44%. Analysis of the community at the genus level suggested that Thauera, Gp4, Ignavibacterium, Phycisphaera, and Arenimonas were the core genera shared by at least two tannery WWTPs. A detailed analysis of the abundance of ammonia-oxidizing bacteria (AOB) and nitrite-oxidizing bacteria (NOB) indicated that Nitrosospira, Nitrosomonas, and Nitrospira were the main AOB and NOB in tannery wastewater, respectively, which exhibited relatively high abundance in all samples. In addition, real-time quantitative PCR was conducted to validate the results by quantifying the abundance of the AOB and total bacteria, and similar results were obtained. Overall, the results presented in this study may provide new insights into our understanding of key microorganisms and the entire community of tannery wastewater and contribute to improving the nitrogen removal efficiency.
Unno, Tatsuya;Kim, Jungman;Guevarra, Robin B.;Nguyen, Son G.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권4호
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pp.431-438
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2015
Ever since the ban on antibiotic growth promoters (AGPs), the livestock death rate has increased owing to pathogenic bacterial infections. There is a need of developing AGP alternatives; however, the mechanisms by which AGP enhances livestock growth performance are not clearly understood. In this study, we fed 3-week-old swine for 9 weeks with and without AGPs containing chlortetracycline, sulfathiazole, and penicillin to investigate the effects of AGPs on swine gut microbiota. Microbial community analysis was done based on bacterial 16S rRNA genes using MiSeq. The use of AGP showed no growth promoting effect, but inhibited the growth of potential pathogens during the early growth stage. Our results showed the significant increase in species richness after the stabilization of gut microbiota during the post-weaning period (4-week-old). Moreover, the swine gut microbiota was divided into four clusters based on the distribution of operational taxonomic units, which was significantly correlated to the swine weight regardless of AGP treatments. Taxonomic abundance analysis indicated a negative correlation between host weight and the abundance of the family Prevotellaceae species, but showed positive correlation to the abundance of the family Spirochaetaceae, Clostridiaceae_1, and Peptostreptococcaeae species. Although no growth performance enhancement was observed, the use of AGP inhibited the potential pathogens in the early growth stage of swine. In addition, our results indicated the ecological succession of swine gut microbiota according to swine weight. Here, we present a characterization of swine gut microbiota with respect to the effects of AGPs on growth performance.
Fungal endophytes have been recorded in various plant species with a richness of diversity, and their presence plays an essential role in host plant protection against biotic and abiotic stresses. This study applied the Illumina MiSeq sequencing platform based on the amplification of fungal ribosomal ITS2 region to analyze fungal endophytic communities of two oak species (Quercus mongolica and Q. serrata) with different oak wilt disease susceptibilities in Korea. The results showed a total of 230,768 sequencing reads were obtained and clustered at a 97% similarity threshold into 709 operational taxonomic units (OTUs). The OTUs of Q. serrata were higher than that of Q. mongolica with the number of 617 OTUs and 512 OTUs, respectively. Shannon index also showed that Q. serrata had a significantly higher level of fungal diversity than Q. mongolica. Total of OTUs were assigned into 5 fungal phyla, 17 classes, 60 orders, 133 families, 195 genera, and 280 species. Ascomycota was the dominant phylum with 75.11% relative abundance, followed by Basidiomycota with 5.28%. Leptosillia, Aureobasidium and Acanthostigma were the most abundant genera detected in Q. serrata with the average relative abundance of 2.85, 2.76, and 2.19%, respectively. On the other hand, Peltaster, Cladosporium and Monochaetia were the most common genera detected in Q. mongolica with the average relative abundance of 4.83, 3.03, and 2.87%, respectively. Our results indicated that fungal endophytic communities were significantly different between two oak species and these differences could influence responses of host trees to oak wilt disease caused by Raffaelea quercus-mongolicae.
Objective: RNA epigenetic modifications play an important role in regulating immune response of mammals. Bovine mastitis induced by Staphylococcus aureus (S. aureus) is a threat to the health of dairy cattle. There are numerous RNA modifications, and how these modification-associated enzymes systematically coordinate their immunomodulatory effects during bovine mastitis is not well reported. Therefore, the role of common RNA modification-related genes (RMRGs) in bovine S. aureus mastitis was investigated in this study. Methods: In total, 80 RMRGs were selected for this study. Four public RNA-seq data sets about bovine S. aureus mastitis were collected and one additional RNA-seq data set was generated by this study. Firstly, quantitative trait locus (QTL) database, transcriptome-wide association studies (TWAS) database and differential expression analyses were employed to characterize the potential functions of selected enzyme genes in bovine S. aureus mastitis. Correlation analysis and weighted gene co-expression network analysis (WGCNA) were used to further investigate the relationships of RMRGs from different types at the mRNA expression level. Interference experiments targeting the m6 A demethylase FTO and utilizing public MeRIP-seq dataset from bovine Mac-T cells were used to investigate the potential interaction mechanisms among various RNA modifications. Results: Bovine QTL and TWAS database in cattle revealed associations between RMRGs and immune-related complex traits. S. aureus challenged and control groups were effectively distinguished by principal component analysis based on the expression of selected RMRGs. WGCNA and correlation analysis identified modules grouping different RMRGs, with highly correlated mRNA expression. The m6 A modification gene FTO showed significant effects on the expression of m6 A and other RMRGs (such as NSUN2, CPSF2, and METTLE), indicating complex co-expression relationships among different RNA modifications in the regulation of bovine S. aureus mastitis. Conclusion: RNA epigenetic modification genes play important immunoregulatory roles in bovine S. aureus mastitis, and there are extensive interactions of mRNA expression among different RMRGs. It is necessary to investigate the interactions between RNA modification genes regulating complex traits in the future.
Escherichia coli-specific phage, KFS-EC1, was isolated and purified from a slaughterhouse. The complete genome of the phage was obtained using Illumina MiSeq platforms. Its assembled genome consisted of a single chromosome of 164,715 bp with a GC content of 40.5%. The phage genome contained 170 hypothetical and 101 functional ORFs, and exhibited orthologous average nucleotide identity values of >95% with other E. coli phages belonging to the family Straboviridae. Additionally, phylogenetic analysis revealed that KFS-EC1 was finally classified into the family Straboviridae of the genus Caudoviricetes. The genome has been deposited in GenBank under the accession number NC_055757.1.
Objective: MicroRNAs are a class of endogenous small regulatory RNAs that regulate cell proliferation, differentiation and apoptosis. Recent studies on miRNAs are mainly focused on mice, human and pig. However, the studies on miRNAs in skeletal muscle of sheep are not comprehensive. Methods: RNA-seq technology was used to perform genomic analysis of miRNAs in prenatal and postnatal skeletal muscle of sheep. Targeted genes were predicted using miRanda software and miRNA-mRNA interactions were verified by quantitative real-time polymerase chain reaction. To further investigate the function of miRNAs, candidate targeted genes were enriched for analysis using gene ontology (GO) and Kyoto encyclopedia of genes and genomes (KEGG) enrichment. Results: The results showed total of 1,086 known miRNAs and 40 new candidate miRNAs were detected in prenatal and postnatal skeletal muscle of sheep. In addition, 345 miRNAs (151 up-regulated, 94 down-regulated) were differentially expressed. Moreover, miRanda software was performed to predict targeted genes of miRNAs, resulting in a total of 2,833 predicted targets, especially miR-381 which targeted multiple muscle-related mRNAs. Furthermore, GO and KEGG pathway analysis confirmed that targeted genes of miRNAs were involved in development of skeletal muscles. Conclusion: This study supplements the miRNA database of sheep, which provides valuable information for further study of the biological function of miRNAs in sheep skeletal muscle.
Objective: To explore the molecular mechanisms of fat metabolism and deposition in pigs, an experiment was conducted to identify hepatic mRNAs and miRNAs expression and determine the potential interaction of them in two phenotypically extreme pig breeds. Methods: mRNA and miRNA profiling of liver from 70-day Jinhua (JH) and Landrace (LD) pigs were performed using RNA sequencing. Blood samples were taken to detect results of serum biochemistry. Bioinformatics analysis were applied to construct differentially expressed miRNA-mRNA network. Results: Serum total triiodothyronine and total thyroxine were significantly lower in Jinhua pigs, but the content of serum total cholesterol (TCH) and low-density lipoprotein cholesterol were strikingly higher. A total of 467 differentially expressed genes (DEGs) and 35 differentially expressed miRNAs (DE miRNAs) were identified between JH and LD groups. Gene ontology analysis suggested that DEGs were involved in oxidation-reduction, lipid biosynthetic and lipid metabolism process. Interaction network of DEGs and DE miRNAs were constructed, according to target prediction results. Conclusion: We generated transcriptome and miRNAome profiles of liver from JH and LD pig breeds which represent distinguishing phenotypes of growth and metabolism. The potential miRNA-mRNA interaction networks may provide a comprehensive understanding in the mechanism of lipid metabolism. These results serve as a basis for further investigation on biological functions of miRNAs in the porcine liver.
Background: Rhizospheric fungi play an essential role in the plantesoil ecosystem, affecting plant growth and health. In this study, we evaluated the fungal diversity in the rhizosphere soil of 2-yr-old healthy Panax notoginseng cultivated in Wenshan, China. Methods: Culture-independent Illumina MiSeq and culture-dependent techniques, combining molecular and morphological characteristics, were used to analyze the rhizospheric fungal diversity. A diffusion test was used to challenge the phytopathogens of P. notoginseng. Results: A total of 16,130 paired-end reads of the nuclear ribosomal internal transcribed spacer 2 were generated and clustered into 860 operational taxonomic units at 97% sequence similarity. All the operational taxonomic units were assigned to five phyla and 79 genera. Zygomycota (46.2%) and Ascomycota (37.8%) were the dominant taxa; Mortierella and unclassified Mortierellales accounted for a large proportion (44.9%) at genus level. The relative abundance of Fusarium and Phoma sequenceswas high, accounting for 12.9% and 5.5%, respectively. In total,113 fungal isolates were isolated from rhizosphere soil. They were assigned to five classes, eight orders (except for an Incertae sedis), 26 genera, and 43 species based on morphological characteristics and phylogenetic analysis of the internal transcribed spacer. Fusarium was the most isolated genus with six species (24 isolates, 21.2%). The abundance of Phoma was also relatively high (8.0%). Thirteen isolates displayed antimicrobial activity against at least one test fungus. Conclusion: Our results suggest that diverse fungi including potential pathogenic ones exist in the rhizosphere soil of 2-yr-old P. notoginseng and that antagonistic isolates may be useful for biological control of pathogens.
배경: 최근 차세대염기서열분석법(Next Generation Sequencing: NGS)을 이용한 HLA 형별 분석에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 이에 HLA 고해상도 분석법의 내재적 한계인 위상 모호성의 문제를 해결하고, 대량 검체 처리가 가능한 NGS 기반 고해상도 HLA 형별 검사법을, 자체 기술로 개발하고자 본 연구를 실시하였다. 방법: HLA NGS를 위한 핵산 추출 조건, 라이브러리 제작 및 PCR 체계 확립, 그리고 생물정보학을 이용한 HLA 형별 분석법을 개발하였다. 본 기관에서 개발한 NGS 기반 HLA 형별 검사의 정확성을 알아보기 위해 SSOP법으로 HLA 형별을 알고 있는 192개 검체와 SBT법으로 HLA 형별을 알고 있는 28개 검체에 대해 NGS 기반으로 검사한 HLA-A, -B 그리고 -DR 형별 결과를 비교해 보았다. 결과: 두 단계의 PCR을 통한 DNA 라이브러리 제작과 MiSeq (Illumina Inc., San Diego, USA) 기기를 이용한 NGS 시퀸싱 그리고 데이터 분석 시스템을 구축하였다. 기존에 HLA 형별을 알고 있는 220개 혈액 검체에 대해 NGS 기반 HLA 형별검사 결과가 모두 일치함을 확인하였다. 결론: NSG 기반 HLA 형별 검사법은 많은 검체를 효율적인 시간 내에 처리가 가능하여 조혈모세포기증 희망자 HLA 검사 등에 유용할 것으로 기대된다.
목적 : 본 연구의 목적은 학령전기 아동의 감각처리 능력을 측정하기 위해 사용되고 있는 평가도구의 종류를 알아보고 심리측정학적 특성을 평가하는 것이다. 연구방법 : 감각처리 평가도구는 PubMed, Cochrane, CINAHL, PsycINFO와 같은 전자 데이터베이스를 사용하여 논문을 검색한 뒤, 초록과 원문 검토를 통해 포함기준에 적합한 평가도구를 최종적으로 선택하였다. 결과 : 총 38개의 논문이 최종적으로 분석되었으며, 8개의 평가도구가 확인되었다. 가장 많은 신뢰도와 타당도가 검증된 도구는 Sensory Processing Measure-Preschool(SPM-P)이었으며 신뢰도와 타당도 검증이 부족한 도구로 는 Sensory Experiences Questionnaire(SEQ), Sense & Self-Regulation Checklist(SSRC), 그리고 Sensory Processing Scale Assessment(SPSA)가 있었다. 결론 : 본 연구결과는 임상가와 연구자들이 학령전기 아동에게 적합한 감각처리 평가도구를 선정할 때 근거자료가 될 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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