본 연구는 P. japonira의 액체배양을 통해 HPLC를 이용하여 유용물질인 cordycepin의 농도를 분석하였다. 배지성분중 무기질소원, 아미노산, 무기염류 및 금속이온의 영향을 검토하였다. 그 결과 균사체의 경우에서는 cordycepin의 농도가 매우 낮음을 알 수 있었고, 배양여액의 경우에서는 $(NH_4)_2HPO_4$. histidine. $CaCO_3$ 등을 첨가했을 때 control에 비해 높은 농도의 cordycepin의 생성을 확인할 수 있었다.
Serratiopeptidase (SRP), a 50 kDa metalloprotease produced from Serratia marcescens species, is a drug with potent anti-inflammatory property. In this study, a powerful statistical design, evolutionary operation (EVOP), was applied to optimize the media composition for SRP production in shake-flask culture of Serratia marcescens NRRL B-23112. Initially, factors such as inoculum size, initial pH, carbon source, and organic nitrogen source were optimized using one factor at a time. The most significant medium components affecting the production of SRP were identified as maltose, soybean meal, and $K_2HPO_4$. The SRP so produced was not found to be dependent on whey protein, but rather was notably induced by most of the organic nitrogen sources used in the study and free from other concomitant protease contaminant, as revealed by protease inhibition study. In addition, experiments were performed using different sets of EVOP design with each factor varied at three levels. The experimental data were analyzed with a standard set of statistical formula. The EVOP-optimized medium, with maltose 4.5%, soybean meal 6.5%, $K_2HPO_4$ 0.8%, and NaCl 0.5% (w/v), gave a SRP production of 7,333 EU/ml, which was 17-fold higher than the unoptimized media. The application of EVOP resulted in significant enhancement of SRP production.
Statistical design of experiments was employed to optimize the media composition for the production of laccase from Bacillus sp. PK4. In order to find the key ingredients for the best yield of enzyme production from the selected eleven variables viz yeast extract, glucose, zinc sulphate, copper sulphate, potassium chloride, magnesium sulphate, calcium chloride, ferrous sulphate, sodium chloride, potassium dihydrogen phosphate ($KH_2PO_4$) and dipotassium hydrogen phosphate ($K_2HPO_4$), Plackett-Burman design was applied. The $MgSO_4$, $FeSO_4$, and $CuSO_4$ showed positive estimate, and their concentration optimized further. The steepest ascent method and Box-Behnken method revealed that 1.5 mM $MgSO_4$, 0.33 g/l $FeSO_4$ and 1.41 mM $CuSO_4$ were optimal for the laccase production by Bacillus sp. PK4. This optimization strategy leads to enhancement of laccase production from 2.13 U/ml to 40.79 U/ml. Agro-wastes residues replace the carbon source glucose in the optimized media namely sugarcane bagasse, wheat bran, rice husk, and groundnut shell, among these groundnut shells (117 U/ml) was found to enhance the laccase production significantly. The laccase produced by Bacillus sp. PK4 was found to have the potential to degrade persistent organic pollutant benzo[a]pyrene.
The optimum medium composition for the production of L-tryptophan with Klebsiella pnuemoniae pheA tyrA trpE trpR/pSC 101-trp$^{+}$ and the effect of precusors in the optimum medium were studied. The specific growth rate in the optimum medium was almost the same as that in the basal medium, the former showing 1.01 and the latter 1.07 hr $$^{-1}$, but the produced tryptophan was increased 45% in the optimum medium. The maximum amount of produced tryptophan was 159 mg/l within 14 hours. Tryptophan production was ceased by casamino acid addition over 4 g/l in medium, but cell maSS increased with its addition. Indole and anthranilate as precusors had toxic effect on growth and tryptophan production at experimented concentration range (over 20 mg/l), but L-serine had good effect on tryptophan production, resulting in 175 mg/l tryptophan within 14 hours.
Shin, Joong-Han;Kim, Kyoung-Heon;Kim, Tae-Hwan;Lee, James M.;Lee, Hyong-Joo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권2호
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pp.256-262
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2003
To enhance the production of heavy chain immunoglobulin G (HC IgG) in the suspension cultures of transgenic tobacco cells (Nicotiana tabacum), the effects of adding various cytokinins (i.e., growth regulators) and organic nitrogen sources to culture media were investigated. Four different cytokinins including kinetin, isopentenyladenine (IPA), 6-benzylaminepurine (BA), and zeatin were tested with or without dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), which is a typical growth regulator supplemented in the standard Murashige and Skoog (MS) medium. The productivity of intracellular HC IgG was increased by 36 and $42\%$, compared to the control, especially when IPA (2 mg/l) or BA (0.2 mg/l) was added to the media in the presence of 2,4-D, respectively. In the study of organic nitrogen sources, addition of each casein hydrolysate and tryptone to the culture media at a final concentration of 0.01 and 1 g/l, respectively. increased the productivity or he IgG as much as 68 and $67\%$, respectively, in comparison with the control, which was is MS medium without supplementation of any organic nitrogen sources. This study shows that the optimization of media composition could offer significant improvements in the production of foreign proteins in the suspension cultures of transgenic plants.
길항균을 생물 농약으로 개발하기 위해서는 저렴한 산업용 배지를 이용한 대량 생산 체계를 확립하는 것이 중요하다. 본 연구에서는 풋마름병 방제 효과가 뛰어난 Bacillus amyloliquefaciens SKU-78 균주의 배양조건을 확립하였다. 저가의 산업용 기질로는 콩가루와 옥수수 전분 배지가 균 생장에 가장 효과적이었고, 최초 pH 5.5, 배양 온도 $30^{\circ}C$, 교반속도 150-250 rpm의 조건으로 30 L fermenter를 이용한 배양에서 20 시간째에 최대 생균수($1.2{\times}10^{11}$ CFU/ml)에 도달하였다. 저가의 산업용 배지로 배양한 배양액을 관주 처리하였을 때 65%의 발병 억제 효과를 나타냄으로써 SKU-78 균주의 산업용 배지를 이용한 대량배양의 기초가 마련되었다.
본 연구는 반응표면분석법을 이용하여 L(+)형 젖산 생산향상을 위한 배지조성을 확립하기 위해 수행되었다. L(+)형 젖산을 선택적으로 고생산하는 것으로 알려진 9종의 Lactobacillus paracasei 균주를 전국에서 수집한 김치 시료로부터 선별하였으며, 젖산 생산량과 glucose로부터의 전환률 분석을 통하여 젖산 생산 배지 최적화를 수행하기 위한 균주로 SRCM201474를 선발하였다. 선택된 11개의 배지 조성 중 젖산 생산에 가장 큰 영향을 미치는 요인을 분석하기 위한 방법으로 Plack-Burman design (PBD)을 설계하였으며, 통계분석을 통해 탄소원으로는 glucose, sucrose, molasses, 질소원으로는 peptone을 최종 선정하였다. 젖산 생산 배지 최적화를 위한 각 변수들의 농도 최적화를 수행하기 위한 방법으로 반응표면분석법 중 적은 실험수로도 최적값을 산출할 수 있는 hybrid design 설계 하였다. 실험 모델에 의한 L. paracasei SRCM201474 균주를 이용한 젖산 생산배지 조성과 최적 농도는 glucose 15.48 g/l, sucrose 16.73 g/l, molasses 39.09 g/l, peptone 34.91 g/l로 나타났으며, 이때의 젖산 생산량은 33.38 g/l로 예측되었다. ANOVA 분석을 통해 가정된 실험 모델의 적합성과 유의성을 확인하였으며, 최종적으로 분석된 최적배지에서의 반복실험을 통한 젖산 생산량을 측정하여 모델에 의해 예측된 젖산생산량과 동일함을 검증하였다. 본 연구를 통해 L(+)형 젖산을 선택적으로 고생산하는 균주를 선발하였으며, 배지 최적화를 수행하여 생분해성 플라스틱 생산을 위한 산업적 젖산 생산에 적용할 수 있는 연구자료로 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
In order to elucidate the possibility of artificial production of p. ferulae by solid-state culture, the optimization of culture conditions was carried out. When $NH_4H_2PO_4$ and $CaCO_3$ were used in the cultures using test tube with 30 g of Populus sawdust at $25^{\circ}C{\pm}1$ in the dark, the favored mycelial growth was observed with $1\%$ of $NH_4H_2PO_4$ and the production of polysaccharide was 7.85 mg/100 mg of mycelium with $1\%$ of $CaCO_3$. The mixtures of $80\%$ of Populus Sawdust and $20\%$ of rice bran at $60\%$ of water content were determined to be optimal for the production of fruiting bodies in the sawdust culture. When three treatments containing various ratios of garlic powder were conducted, yields of fruiting bodies were drasti[ally higher than those of Synthetic mixture without garlic powder The highest yield (143 g/bag) was obtained with $7\%$ garlic powder. The yield of synthetic mixture containing $7\%$ of garlic powder was $83\%$ higher than that of Sawdust culture. The reason why garlic powder did support growth was not clear but it is possible that garlic powder might contain effective components for the formation of fruiting body. The optimal synthetic mixture composition consisted of cotton seed $77\%$, lime $6.4\%,\;K_2HPO_4\;0.2\%,\;KH_2PO_4\;0.2\%,\;CaHPO_4\;0.2\%$, corn flour $4\%$, wheat flour $5\%$, and garlic pow-der $7\%$.
Sourdough 빵을 생산하기 위해 사용되는 유산균중 Lb. brevis는 높은 산 생성율과 단백질 분해 활성과 sourdough 발효중 발생되는 휘발성 화합물의 합성에 뚜렷하게 기여를 하여 많이 사용되고 있다. 따라서 본 실험은 김치에서 분리한 유산균을 sourdough starter로 사용하기 위한 첫 번째 단계로서 Lactobacillu brevis UC-22의 배양 특성 및 최적 성장조건을 조사하였다. 온도에 따른 증식은 35$^{\circ}C$에서 배양한 것이 PH의 저하 및 증식이 가장 양호하였으며 이에 병행하여 산 생성량도 균주의 대수 증식기에서 활발하게 분비되는 것을 알 수 있었다. 배지내의 pH에 따른 균의 생장은 pH 5.5와 pH6.5일 때 증식이 우수하게 나타났다. Lb. brevis의 특징적인 탄소원 이용은 glucose보다는 오히려 maltose를 더 선호하는 경향이 있다고 하였으나 본 실험에 사용된 Lactobacillus brevis UC-22는 maltose와 glucose의 첨가에 따른 성장 정도는 큰 차이점을 보이지 않았다.
Singh, Rashmi R.;Tipre, Devayani R.;Dave, Shailesh R.
Advances in environmental research
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제3권4호
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pp.283-292
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2014
Iron precipitating organisms play a significant role in the formation of ferric hydroxide precipitate, which acts as strong adsorbent for toxic metal. In this respect four different iron precipitating cultures were isolated from Hutti gold mine surface winze water sample on citrate agar medium. The best isolate was screened out for metal removal study on the basis of fast visual iron precipitation. The selected isolate was identified as Enterobacter sp. based on routine biochemical tests and Biolog GN microplate results and as Enterobacter cloacae subsp. dissolvens by 16S rRNA gene sequence analysis (GenBank accession number EU429448). Influence of medium composition, medium initial pH, the influence of inoculum size, effect of various media and ferric ammonium citrate concentration were studied on metal removal in shake flask experiments. Under the optimized conditions studied, E. cloacae showed $94{\pm}2$, $95{\pm}2$ and $70{\pm}2%$ of cadmium, copper and mercury removal from a simulated waste in shake flask studies. In lab scale column reactor more than 85% of copper and mercury removal was achieved.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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