human renin binding protein (hRnBp), showing N-acetylglucosamine-2-epimerase activity, was over-expressed in E. coli, but was mainly present as an inclusion body. To improve its solubility and activity, ubiquitin (Ub), thioredoxin (Trx), maltose binding protein (MBP) and NusA, were used as fusion partners. The comparative solubilities of the fusion proteins were, from most to least soluble: NusA, MBP, Trx, Ub. Only the MBP fusion did not significantly reduce the activity of hRnBp, but enhanced the stability. The Origami (DE3), permitting a more oxidative environment for the cytoplasm in E. coli; helped to increase its functional activity.
Alkali metal salts were introduced to enhance the ionization efficiency of glucose and maltooligoses in electrospray ionization-mass spectrometry (ESI-MS). A mixture of the same moles of glucose, maltose, maltotriose, maltotetraose, maltopentaose, maltohexaose, and maltoheptaose was used. Salts of lithium, sodium, potassium, and cesium were employed as the cationizing agent. The ionization efficiency varied with the alkali metal cation types as well as the analyte sizes. Ion abundance distribution of the [M+$cation]^+$ ions of the carbohydrates varied with the fragmentor voltage. The maximum ion abundance at low fragmentor voltage was observed at maltose, while the maximum ion abundance at high fragmentor voltage shifted to maltotriose or maltotetraose for Na, K, and Cs. Variation of the ionization efficiency was explained with the hydrated cation size and the binding energy of the analyte and alkali metal cation.
Optimization of submerged culture conditions for the production of exo-biopolymer from Paecilomyces japonica was studied. Maltose, yeast extract and potassium phosphate were the most suitable sources of carbon, nitrogen, and inorganic salt, respectively, for both production of the exo-biopolymer and mycelial growth. The optimal culture conditions in flask culture were pH 5.0, $25^{\circ}C$ and 150 rpm in a meidum containing of 30 g maltose, 6 g yeast extract, 2 g polypeptone, 0.5 g $K_2HPO_4$, 0.2 g $KH_2PO_4$, 0.2 g $MnSo_4\;{\cdot}\;5H_2O$, 0.2 g $MgSO_4\;{\cdot}\;7H_2O$ in 1-L distilled water. Exo-biopolymer production and mycelial growth in the suggested medium were significantly increased in a 2.5-L jar fermentor, where the maximum biopolymer concentration was 8 g/1.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.6
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pp.1145-1150
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2000
면역증강물질을 생산하는 균주를 해수로부터 분리하여 동정한 결과 크림색의 둥근 점질성의 집략을 나타내었으며, Gram 음성의 간산형이고, 미약한 운동성을 가지며 catalase 양성과 oxidase 음성 반응을 보였다. 균주를 6시간 , 20시간, 72시간, 및 144시간 뱅양하여 전자 현미경사에서 관찰한 결과 20시간 배양한 영양세포는 1.25~0.6$\times$0.6$\mu\textrm{m}$ 크기의 간균 형태를 갖추었으며 시간이 흐를수록 세포내 관립의 밀도가 증가하면서 세포형태가 다형태성으로 변하였다. 세포내 과립의 존재를 확인하기 위해 sudan black B로 염색한 결과 양성으로 polyhy-droxy butyrate로 예상되었다. 생육을 위한 최적 온도는 3$0^{\circ}C$, pH는 3.0~10.0이었으며, 호기성균이었다. D-Glu-cose, D-mannose, D-mannitiol. insitol, maltose 등의 당과 L-asparagine, L-glutamate 등의 아미노산을 이용하였고 특시, O/F test에서 glucose와 maltose를 산화 하였다. 이상과 같은 결과로 해양세균 유래인 Pseudo-mallei group의 Burkholderia 속으로 확인되었음로 본 균주를 Burkholderia sp. IS-203으로 명명하였다.
Sikhye is a traditional sweet rice drink in Korea by $\beta$-amylase's saccharifing action. Sikhye has great potentiality for commercial beverage because of It's characteristic taste and flavors. But, the chemical compositions and production methods of Sikhye are little known. The total amount of carbohydrate of sixteen Sikhye selected in Korean market was 11~15%. The reducing sugar by the Somogyi-Nelson's method was measured 0.4~2% as maltose, which has little influence on the sweetness of Sikhye. While sucrose content was about 10% by the TLC and Seliwanoff analysis. It means that carbohydrate in Sikhye was almost sucrose. Furthermore the most of Sikhye has brown color and turbidity. To improve the quality of Korean Sikhye, it is necessary to increase the production of maltose and to reduce brown color and turbidity, without adding sucrose.
Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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1994.04a
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pp.183-183
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1994
HIV-1 protcase 를 이용한 in vitro assay system을 개발하기 위하여HIV-1 protease유전자를 Ecoli 발현 벡터를 이용하여 발현시켰다. 가능성있는 Protease유전자의 생간 및 분래를 용이하게 하기위하여 maltose binding protein 의 fusion protein을 이용하였으며 protease 의 autoprocessing을 maltose binding protein 의 polyclonal 항체로 확인하였다, 발현된 protease는 일련의 chromatography 방법 (DEAE, SE cellulose, Superose 12, Mono S) 으로 순수하게 분리되었다. 정제된 protease 는 SDS-PAGE분석으로 단일밴드를 보여주었고, 합성된 undecapeptide를 기질로 하였을때 Km 이 9.8$\mu$M 이었다. 효소 assay 를 위해 기질이 protease 에 의해 절단된 생성물을 HPLC를 사용하여 분석하였다. Protease의 억제제 탐색을 위해 유기합성한 몇개의 기질유사체와 HIV-1 증식을 억제하는 것으로 알려진 천연물의 억제정도를 조사하여 보았다. 이들 test 에 사용한 물질들은 높은 농도에서 protease 의 활성을 저해하는 것으로 보아 좋은 억제제는 아닌것으로 시료되나 본 연구를 통하여 확립된 in vitro assay system 은 추후에도 억제제 탐색을 위하여 계속 활용될 수 있을 것이다.
The rheological properties of seven mixed sugar solutions of glucose, fructose, maltose, sucrose, and two kinds of honey, the chestnut and the acacia, were discussed. The fluidity of the above samples were studied by using the applied pressure horizontal viscometer with which glycerine was confirmed to be a Newtonian flow at $25^{\circ}C$. Time required to pass the constant volume of the sample fluids through the capillary was measured at various pressure differences, ${\Delta}p$, and the ${\Delta}p$ vs ${\Delta}p{\cdot}t$ in the Poiseuille equation was plotted. Shear rate against shearing stress, on the other hand, was plotted for the sample fluids and it was found that all the sample fluids have shown a Newtonian behavior. It was interesting to note that the shear viscosity increased as the concentration of sugar solutions increased, and as the concentration of sucrose became higher than that of maltose, although the total concentration of sugar solution is constant.
We estabilished the procedure for isolation of Streptococcus salivarius subsp. thermophilus from raw milk. First, urease-producing lactic acid bacteria in raw milk were screened on the HY agar medium containing urea. Thereafter the urease-producing colonies were tested the ability to ferment maltose and to grow at43$\circ $C. We obtained about 400 maltose-negative colonies that grew at 43$\circ $C. No significant difference in carbohydrate fermentation test for isolated and type strains(S. salivarius subsp. thermophilus ATCC 19258 and ST-4) was found. And all of the isolated strains were able to ferment galactose. Furthermore, it was investigated that the cellular fatty acid profiles of isolated strains were similar to that of type strains. These results indicated that the isolated strains from raw milk were S. salivarius subsp. thermophilus. But when the isolated and type strains were incubated in 12% reconstituted skim milk at 43$\circ $C, the isolates produced lactic acid more slowly than the type strains.
The isolated strain, SC2-1 was Gram-positive, catalase positive, facultatively anaerobic, oxidase negative, motile and small rods. The strain utilized sucrose, dextrose, fructose, mannitol and maltose as a sole carbon and energy source and sodium chloride required for the bacteria growth. The radical scavenging activity of the culture supernatants was determined by DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method. This bacterium was identified based on cellular fatty acids analysis and 16S rDNA sequencing then named Exiguobacterium sp. SC2-1. The optimum culture conditions for production of antioxidant were $25^{\circ}C,$ pH 7.8 and NaCl concentration were 4%. The modified optimal medium compositions were maltose 2.5% (w/v), yeast extract 1.5% (w/v) and $KH_2PO_4$ 0.05% (w/v). Free radical scavenging activity of under optimal culture conditions were 93%.
In the previous report (Choi et al., 1997), the angiogenin binding peptides identified from a phage-peptide library were analyzed by using the fusion proteins composed of the Escherichia coli maltose binding protein and its corresponding peptides. However, it was difficult to obtain a sufficient amount of the fusion proteins required for further analysis because of the low expression level. We now report a high level expression of the fusion protein and analysis of its anti-angiogenin activity. The use of strong T7 promoter and removal of signal sequence allowed about a 20-fold increase in the expression efficiency of the fusion protein. We were able to obtain about 10 mg of purified fusion protein from one liter of culture. The purified fusion protein showed angiogenin-specific affinity and inhibited the binding of biotinylated actin to human angiogenin at $IC_{50}$ of 0.6 mM. Its anti-angiogenin activity was also revealed by the chorioallantoic membrane assay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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