• 한국동물학회지
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• 제15권3호
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• pp.101-104
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• 1972

간편하고 경제적이며 재현성도 우수한 cellulose acetate 전기영동장치를 제작하였다. 본 장치를 사용하여 몇가지 동물 조직의 lactate 및 malate dehydrogenase isozyme 을 분리 검출하여 본 결과, 기존 제품으로 실험한 결과와 별로 차이가 없음을 알았다. 흔히 cellulose acetate 전기영동은 일정한 정전류에서 실시하는데, 본 장치에서는 약간의 전류변동이 있는 것이 사실이나 실험결과는 충분히 실용적인 것이었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제17권9호
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• pp.1255-1259
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• 2004

The objective of this study was to evaluate the effects of halogenated compounds, organic acids, unsaturated fatty acids and their mixtures on in vitro methane production and fermentative characteristics of mixed rumen microorganisms. Agents used in two in vitro experiments were bromoethanesulfonic acid (BES) and pyromellitic diimide (PMDI) as halogenated compound, fumarate and malate as organic acid, and linoleic acid and linolenic acid as unsaturated fatty acid sources. Ruminal fluid collected from a Holstein steer fed tall fescue and concentrate mixtures was incubated at $39^{\circ}C$ for 48 h with addition of those materials. Single supplementation of halogenated compounds, organic acids or unsaturated fatty acids decreased in vitro methane production (p<0.05). The second experiment was designed to investigate effects of combination of one of halogenated compounds and either organic acids or fatty acids on methane production. Lower concentration of methane and lower A:P ratio were observed with PMDI compared with BES (p<0.01). In general medium pH, VFA, total gas and hydrogen production, and dry matter degradability were affected by addition of the same compounds. In addition, PMDI+malate treatment resulted in the highest molar proportion of propionate, and lowest A:P ratio and methane production (p<0.01). Hydrogen production was highest in PMDI+linolenic acid and lowest in BES+malate treatment (p<0.01). PMDI+malate combination was the most recommendable in reducing methane production without too much influence on digestibility under conditions of present studies.

• Journal of Pharmaceutical Investigation
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• 제40권1호
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• pp.15-21
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• 2010

Sibutramine is an orally administered centrally-acting antiobesity agent and inhibits both noradrenaline(norephinephirine) and serotonin(5-HT) reuptake. These effects are contributed by its active metabolites, M1 and M2. However, as the free base form of sibutramine is an oil form in room temperature, it had the problem of handling and stability. Thus, this drug should be used in the form of acid salt form in the pharmaceutical application. Unfortunately, anhydrous sibutramine hydrochloride is highly hygroscopic and unstable. In order to solve the hygroscopicity of the anhydrous salt form, another sibutramine acid salt form must be developed as a hydrate form. In this study. to overcome these problems, various of sibutramine acid salt forms were prepared with the pharmaceutically available salts such as maleate, esylate, mandelate, camsylate, besylate, salicylate, tartrate, isethionate and malate forms, and their physicochemical properties were investigated. Sibutramine malate was selected for excellent solubility and stability among the listed salt forms above. Its pharmacokinetic parameters were evaluated in rats comparing with sibutramine HCl, resulting in similar parameters. In vitro dissolution study of sibutramine malate-loaded capsule was performed comparison with commercial product ($Reductil^{(R)}$) in pH 1.2, pH 4.0, pH 6.8 and water medium. Our results indicated that there were no significant differences in their dissolution profiles were similar in all tested medium. Thus, sibutramine malate-loaded capsule should be a potential candiate due to its excellent solubility, good stability and biosimilar absorption.

• 한국환경성돌연변이발암원학회지
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• 제16권1호
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• pp.13-18
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• 1996

One mechanism of free-radical production by ethanol is suggested to be through the intracellular conversion of XDH to XO by increased ratio of NADH to NAD. The major mechanism for physiological compensation of cytosolic NADH/NAD balance is the malate/aspartate shutfie. Therefore, it is important to develop the method to improve the efficiency of malate/aspartate shuttle in ethanol metabolism. In the present study, various amino acids and organic acid involved in the shuttle were tested for their functional efficiency in modulating shuttle in the ethanol-perfused rat liver. The rate of ethanol oxidation in the liver perfused with aspartate alone or aspartate in combination with pyruvate, respectively, was increased by about 10% compared to control liver, but not in the tissues perfused with glummate, cysteine or pyruvate alone. Though glummate, cysteine and pyravate did not affect the ethanol oxidation significanfiy, they showed some suppresive effect on the ethanol-induced radical generation monitored by protein carbonylation analysis. Among the tested components, aspartate is confirmed to be the most efficient as a metabolic regulator for both ethanol oxidation and ethanol-induced oxidative stress in our perfusion system. These effects of aspartate would result from NAD recycling by its supplementation through the coupled aspartate aminotransferase/malate dehydrogenase reactions and the malate-aspartate shuttle.

• Nutrition Research and Practice
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• 제2권2호
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• pp.80-84
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• 2008

Beneficial effects of dehydroepiandrosterone (DHEA) supplement on age-associated chronic diseases such as cancer, cardiovascular disease, insulin resistance and diabetes, have been reported. However, its mechanism of action in hepatocellular carcinoma in vivo has not been investigated in detail. We have previously shown that during hepatocellular carcinogenesis, DHEA treatment decreases formation of preneoplastic glutathione S-transferase placental form-positive foci in the liver and has antioxidant effects. Here we aimed to determine the mechanism of actions of DHEA, in comparison to vitamin E, in a chemically-induced hepatocellular carcinoma model in rats. Sprague-Dawley rats were administered with control diet without a carcinogen, diets with 1.5% vitamin E, 0.5% DHEA and both of the compounds with a carcinogen for 6 weeks. The doses were previously reported to have anti-cancer effects in animals without known toxicities. With DHEA treatment, cytosolic malate dehydrogenase activities were significantly increased by ${\sim}5$ fold and glucose 6-phosphate dehydrogenase activities were decreased by ${\sim}25%$ compared to carcinogen treated group. Activities of Se-glutathione peroxidase in the cytotol was decreased siguificantly with DHEA treatment, confirming its antioxidative effect. However, liver microsomal cytochrome P-450 content and NADPH-dependent cytochrome P-450 reductase activities were not altered with DHEA treatment. Vitamin E treatment decreased cytosolic Se-glutathione peroxidase activities in accordance with our previous reports. However, vitamin E did not alter glucose 6-phosphate dehydrogenase or malate dehydrogenase activities. Our results suggest that DHEA may have decreased tumor nodule formation and reduced lipid peroxidation as previously reported, possibly by increasing the production of NADPH, a reducing equivalent for NADPH-dependent antioxidant enzymes. DHEA treatment tended to reduce glucose 6-phosphate dehydrogenase activities, which may have resulted in limited supply for de novo synthesis of DNA via inhibiting the hexose monophophaste pathway. Although both DHEA and vitamin E effectively reduced preneoplastic foci in this model, they seemed to fimction in different mechanisms. In conclusion, DHEA may be used to reduce hepatocellular carcinoma growth by targeting NADPH synthesis, cell proliferation and anti-oxidant enzyme activities during tumor growth.

• 한국동물학회지
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• 제23권4호
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• pp.263-272
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• 1980

개구리 2種 (Rana nigromaculata와 Rana plancyi chosenica)과 도룡뇽 (Hynobius leechii)의 胚發生에 EK른 lactate dehydrogenase (LDH)와 malate dehydrogenase (MDH)의 isozyme 組成變化를 polyacrylamide 電氣泳動法으로 조사 분석하고 이를 成體의 몇 器官과 비교하였다. R. nigromaculata에서 LDH의 B subunit의 合成을 지배하는 유전자는 heterozygous이고 H. leechii에서는 A subunit의 合成을 지배하는 유전자가 heterozygousfk고 추정된다. 위의 3種의 兩棲類\ulcorner 胚에서 發生初期에는 LDH-1 (심장형)의 活性이 높으나 發生이 진행됨에 따라 LDH-5 (근육형)의 活性도 점차 증가된다. MDH의 경우 發生初期부터 MDH-m과 MDH-s가 존재하고 발생 全段階를 통하여 그 組成에는 변화가 없으나 MDH-m의 活性이 점차 증가하는 경향을 보인다.

• International Journal of Oral Biology
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• 제40권2호
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• pp.103-109
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• 2015

Growing evidence suggests that mitochondrial reactive oxygen species (ROS) are involved in various pain states. This study was performed to investigate whether ROS-induced changes in neuronal excitability in trigeminal subnucleus caudalis are related to ROS generation in mitochondria. Confocal scanning laser microscopy was used to measure ROS-induced fluorescence intensity in live rat trigeminal caudalis slices. The ROS level increased during the perfusion of malate, a mitochondrial substrate, after loading of 2',7'-dichlorofluorescin diacetate ($H_2DCF-DA$), an indicator of the intracellular ROS; the ROS level recovered to the control condition after washout. When pre-treated with phenyl N-tert-butylnitrone (PBN) and 4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidene-1-oxyl (TEMPOL), malate-induced increase of ROS level was suppressed. To identify the direct relation between elevated ROS levels and mitochondria, we applied the malate after double-loading of $H_2DCF-DA$ and chloromethyl-X-rosamine (CMXRos; MitoTracker Red), which is a mitochondria-specific fluorescent probe. As a result, increase of both intracellular ROS and mitochondrial ROS were observed simultaneously. This study demonstrated that elevated ROS in trigeminal subnucleus caudalis neuron can be induced through mitochondrial-ROS pathway, primarily by the leakage of ROS from the mitochondrial electron transport chain.

• 한국잡초학회지
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• 제8권3호
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• pp.250-257
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• 1988

Bensulfuron에 대표적인 내성군(耐性群)(UCP-28, Chinsurah Boro II, Fukunohama, Fadehpur-2, IR 14252-13-2-2-5)과 감수성품종군(感受性品種群)(HP93(3) FA, HP94(9) FA, Padilabou Alumbis. KH-17854, IR 1846-2841-1)을 공시(供試)하여 종실(種實) 단백질(蛋白質)(SDS-PAGE)과 유묘(幼苗) 동위효소(同位酵素)(malate dehydrogenase, acid phosphatase, peroxidase, esterase: 7% PAGE)의 전기영동(電氣泳動) profile을 분석(分析)하고, bensulfuron 0, $10^{-6}$, $10^{-5}$, $3{\times}10^{-5}M$ 용액에서 생장(生長)한 두 대표 품종(品種)(cv. Chinsurah Boro II와 cv. IR 1846)의 5 일령(日齡) 유묘(幼苗)의 동위효소(同位酵素) profile 변화양상(變化樣相)을 비교(比較)하므로써, bensulfuron에의 내성차이(耐性差異)와 이들 전기영동(電氣泳動) profile 차이(差異)가 갖는 연관성(聯關性)을 알고저 하였다. 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 종실단백(種實蛋白)의 전기영동(電氣泳動)으로 16개(個) band를 확인(確認)할 수 있었고, 이를 근거(根據)로 clustering한 결과(結果), 내성(耐性)에서의 M, O, P band가 높게 나타났고 또한 전체 peak 면적(面積)이 크다는 특이성(特異性)에 기인(起因)하여 두 품종군간(品種群間)에 비유사성(非類似性)이 인정(認定)되는 정도(程度)로 분류(分類)되었다. 2. 무처리(無處理)된 유묘(幼苗)의 동위효소(同位酵素) 가운데, peroxidase로는 4개(個) band가 얻어졌고, 내성군(耐性群)의 특이성(特異性)은 D band에서의 활성(活性)이 높은 데 있었다. Malate dehydrogenase는 3개(個) band로 분리(分離)되었고, 내성군(耐性群)만이 A band를 나타내며 B 및 C band도 내성군(耐性群)에서 선명하였다. Esterase는 3~4개(個) band로 구분(區分)되었고 내성군(耐性群)이 A 및 B band에서 높은 활성(活性)을 보였다. Acid phosphatase는 하나의 major band와 2~3개(個)의 minor band로 나타났으며 내성군(耐性群)만은 B band를 갖는 경향(傾向)이었다. 3. Bensulfuron의 처리농도(處理濃度)에 따라, 동위효소(同位酵素) 가운데 peroxidase는 감수성(感受性)에서만 C band의 생성(生成)과 D band의 소실현상(消失現象)이 야기(惹起)되었고, 내성품종(耐性品種)에서는 C band가 나타나지 않았으며, 다른 band에서의 변화(變化)도 없었다. Malate dehyrogenase의 경우, major band인 D, E, F는 감수성(感受性)에서 활성(活性)이 컸고 변화(變化)는 없었으며, minor band인 A, B, C는 감수성(感受性)에서만 민감(敏感)하게 소실(消失)되었다. Esterase는 5개(個) band로 표현(表現)되었으며 내성(耐性)에서는 A, B, C, D 감수성(感受性)에서는 A, B, C, E만 나타났으며, 약처리농도증가(藥處理濃度增加)로 감수성품종(感受性品種)은 A, C, E band의 활성(活性)이 민감(敏感)하게 소실(消失)되었다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제11권3호
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• pp.263-272
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• 2007

생쥐의 난자는 특별한 첨가물이나 난구세포 없이 체외 배양해도 성숙율이 높은 반면 돼지 난자의 체외성숙율은 매우 낮다. 본 연구는 이러한 차이의 원인을 연구하기 위하여 생쥐와 돼지 난자의 에너지 생성에 관여하는 유전자인 malate dehydrogenase(Mor2)의 기능을 RNAi를 이용하여 비교 분석하였다. 생쥐와 돼지 각각의 Mor2 double-stranded RNA(dsRNA)를 제작하고, 생쥐는 난구세포를 제거한 미성숙(GV) 난자의 세포질에 mMor2 dsRNA를 미세 주입한 후 16시간 동안 배양하였고, 돼지는 난구세포를 제거하거나(DO) 혹은 그대로인 상태(COCs)로 pMor2 dsRNA를 미세 주입한 후 48시간 동안 배양하였다. 사용한 배양액은 M199에 10%의 porcine follicular fluid, pyruvate, p-FSH, EGF, cystein, estradiol-$17{\beta}$ 등이 첨가된 배양액을 사용하였고, 배양 후 난자의 형태학적 변화를 관찰하고, Mor2 mRNA양의 변화를 RT-PCR로 확인하여 RNAi 결과, 염기서열 특이적으로 Mor2 발현이 억제됨을 확인하였다. 돼지 난자의 pMor2 RNAi 결과, DO 난자에서는 약 58%의 난자가 MI에서 성숙이 억제되었으나, COCs에선 84.4%가 MII로 성숙하는 것을 볼 수 있었다. 이는 돼지의 난구세포가 난자 성숙에 매우 중요하며, 특히 malate 공급에 관여할 것임을 시사한다. 선행 연구 Mor2 RNAi 결과, 생쥐는 GV에서, 본 연구에서 돼지는 MI에서 성숙이 정지되었기 때문에 이러한 차이가 배양액의 차이인지 다시 mMor2 RNAi 후 생쥐 난자를 M199 배양액에 16시간 동안 배양한 후 성숙율을 관찰하였더니 MII로의 성숙율은 62%로 대조군과 비교하여 큰 차이가 없었다(non-injected: 76.8%, buffer-injected: 73.3%). 이는 mMor2 RNAi 결과가 배양액의 조성에 의해 극복될 수 있음을 보여준 결과다. 생쥐와 돼지에서 서로 다른 대사과정을 갖고 있음은 바로 이 두 종에서의 체외성숙율 차이의 원인이 될 수 있을 것이며, 앞으로 두 종에서의 난자와 난구세포간의 상호작용 및 대사 경로 등에 관한 심도 깊은 비교 분석 연구를 통하여 돼지의 체외성숙율을 증가시킬 수 있는 배양 시스템의 개발이 가능할 것으로 기대된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제36권7호
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• pp.832-839
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• 2007

본 연구는 불가사리에서 추출한 칼슘의 체내 이용성 및 칼슘 흡수증진 물질 첨가가 불가사리 칼슘의 이용성에 미치는 영향을 검토함으로써 새로운 칼슘 급원으로서의 불가사리 칼슘의 유용성을 알아보고자, 동물실험을 수행하였다. 즉 3주령 된 암컷 흰쥐를 대상으로, 불가사리에서 추출한 칼슘에 칼슘흡수증진 물질로서 casein phosphopeptide(CPP;5.25%), citrate-malate(1.4%), isoflavone(0.01%)을 각각 첨가한 식이를 6주간 공급한 후, 불가사리 칼슘의 이용성에 미치는 효과를 알아보았다. 이 때 칼슘 수준은 0.35%로, 인 수준은 0.7%로 각각 고정시켰다. 희생을 통하여 혈청 칼슘과 인 농도 및 alkaline phosphatase(ALP) 활성, 칼슘과 인의 흡수율 및 보유율, 대퇴골의 칼슘 및 인 함량, 소장의 가용성 및 불용성 칼슘 함량을 측정하였다. 그 결과는 다음과 같다. 불가사리에서 추출한 칼슘에 칼슘흡수증진 물질을 첨가했을 경우, 성장 및 식이섭취량은 실험군 간에 차이가 없었다. 혈청 칼슘과 인 농도 및 ALP 활성은 실험군 간에 유의적인 차이가 없었다. 칼슘의 보유율과 겉보기 흡수율은 불가사리칼슘+CPP군과 불가사리칼슘+citrate-malate군이 높았다. 인의 보유율은 차이가 없었으나, 겉보기 흡수율은 불가사리칼슘+CPP군에서 높았다. 소장 내용물의 가용성 분획 중 칼슘 함량은 실험군 간 유의적인 차이가 없었다. 반면 불용성 분획의 칼슘 함량은 불가사리칼슘+CPP군, 불가사리칼슘+citrate-malate군 및 불가사리 칼슘+ISO군에서 유의적으로 낮았다. 식이로부터 유래된 장내 가용성 칼슘 함량은 불가사리칼슘+CPP군에서 가장 높았다. 대퇴골의 무게, 칼슘 및 인의 함량은 실험군 간에 유의적인 차이가 없었다. 이상의 결과에서 불가사리 칼슘은 흰쥐의 일반적인 성장 및 기능에 영향을 미치지 않으면서도 칼슘의 흡수율은 높아 새로운 칼슘급원으로서 이용가능성이 높음을 시사하였다. 그러나 대체로 골격 대사에는 영향을 미치지 못했다. 또한 칼슘흡수증진 물질을 첨가하였을 경우에 CPP와 citrate-malate가 불가사리칼슘의 흡수율을 높여, 불가사리칼슘에 CPP와 citrate-malate를 첨가할 경우 보다 좋은 효과가 기대된다.