Objectives : The purpose of this investigation is to evaluate the effects of Scutellaria baicalensis GEORGI on alteration in gene expression in a hypoxia model using cultured rat cortical cells. Methods : E18 rat cortical cells were grown in a Neurobasal medium containing B27 supplement. On 12 DIV, Scutellaria baicalensis GEORGI(20 ug/ml) was added to the culture media and left for 24 hrs. On 11 DIV, cells were given a hypoxic insult $(2%\;O_2/5%\;CO_2,\;37^{\circ}C,\;3\;hrs)$, returned to normoxia and cultured for another 24 hrs. Total RNA was prepared from Scutellaria baicalensis GEORGI-untreated (control) and -treated cultures and alteration in gene expression was analysed by microarray using rat 5K-TwinChips. Results : For most of the genes altered in expression, the Global M values were between -0.5 to +0.5. Among these, 1143 genes increased in their expression by more than Global M +0.1, while 1161 genes decreased by more than Global M -0.1. Effects on some of the genes whose functions are implicated in neural viability are as follows: 1) The expression of apoptosis-related genes such as Bad (Global M = 0.39), programmed cell death-2(Pdcd2) (Global M = 0.20) increased, while Purinergic receptor P2X(P2rxl) Global M = -0.22), Bc12-like1(Bc1211)(Global M = -0.19) decreased. 2) The expression of 'response to stress-related genes such as antioxidation-related AMP-activated protein kinase subunit gamma 1 gene (Prkag1) (Global M = 0.14), catalase gene (Global M = 0.14) and Heme Oxygenase(Hmoxl) increased. 3) The expression of Fos like antigen 2 (Fos12) expressed in neurons that survive ischemic insult increased (Global M = 0.97). Conclusions : these data suggest that Scutellaria baicalensis GEORGI increases the expression of antiapoptosis- and antioxidation- related genes in a way that can not yet be explained.
PPI(Protein-Protein Interaction) data has information about the organism has maintained a life with some kind of mechanism. So, it is used in study about cure research back, cause of disease, and new medicine development. This PPI data has been increased by geometric progression because high throughput methods are developed such as Yeast-two-hybrid, Mass spectrometry, and Correlated mRNA expression. So, it is impossible that a person directly manage and analyze PPI data. Fortunately, PPI data is able to abstract the graph which has proteins as nodes, interactions as edges. Consequently, Graph theory plentifully researched from the computer science until now is able to be applied to PPI data successfully. In this paper, we introduce Proteinca(PROTEin INteraction CAbaret) workbench system for easily managing, analyzing and visualizing PPI data. Proteinca assists the user understand PPI data intuitively as visualizing a PPI data in graph and provide various analytical function on graph theory. And Protenica provides a simplified visualization with gravity-rule.
Lim, Joo-Yeon;Kang, Eun-Hye;Jung, Bo Ri;Park, Hee-Moon
The Korean Journal of Mycology
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v.45
no.3
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pp.196-211
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2017
Despite the significance of external environmental factors in differentiation, putative factors involved in differentiation of Aspergillus nidulans have not yet been fully understood. A sporulation-specific proteome analysis of A. nidulans in the present study revealed that the expression levels of more than 2,400 proteins were affected under conditions inducing sporulation (0.6 M KCl) compared with normal conditions. Among the proteins with predicted functions, two targets, AN1342 and AN9419, were functionally analyzed using targeted deletion strains and phenotypic observations. For AN1342, because the deletion of the corresponding open reading frame caused a reduction in stalk length during asexual development and in pigment production in liquid culture, the gene was designated as sspA ($\underline{s}hort$$\underline{s}talk$ & $\underline{p}igment$). Deletion of the AN9419 gene, which is predicted to encode alanyl-tRNA synthetase, led to severe growth defects due to alanine auxotrophy and abolishment of asexual reproduction and thus, the gene was designated as alaA.
We fabricated sponge and poly(lactide-co-glycolide)(PLGA) scaffolds impregnated demineralized bone particle(DBP)(DBP/PLGA) and investigated proper condition to proliferation and phenotype maintenance of intervertebral disc(IVD) cells by comparison between DBP/PLGA scaffold and DBP sponge. DBP/PLGA scaffolds were prepared by solvent casting/salt leaching. Human IVD cells were seeded in scaffolds of two types. Cell viability and proliferation according to scaffolds were analyzed by WST assay and SEM. RT-PCR was assessed to measure mRNA expression of aggrecan and type II collagen of human IVD cells. In WST assay results, cell viability in scaffolds impregnated DBP/PLGA scaffold were higher than DBP sponge. We could observe that disc cell mRNA expressed better in DBP/PLGA scaffold than DBP sponge. We concluded that the using of DBP/PLGA in terms of scaffold fabrication for bio-disc with human IVD cells is helpful growth of disc cells maintenance of phenotypes.
Lee, So Jin;Kim, Hye Yun;Kim, Seul Ji;Yang, Jaewon;Lee, Seon Ui;Park, Chan Hum;Joo, Choun-Ki;Khang, Gilson
Polymer(Korea)
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v.38
no.3
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pp.364-370
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2014
The retinal pigment epithelium (RPE) plays an important role in maintaining a healthy retina and the degeneration of RPE caused a number of retinal diseases. The transplantation of RPE has recently become a possible therapeutic modality for retinal degeneration. To transplant RPE cells securely, substrates are essential, and then as a substrate, we fabricated films using silk that has unique mechanical properties and biocompatibility. After the FTIR spectra, contact angle and biodegradation of silk films were confirmed, RPE cells were seeded and the influence of RPE cells on silk films was examined. We measured the cell adhesion, cell viability, morphology and specific mRNA expression by MTT assay, SEM, immunofluorescence and RT-PCR. In this study, we confirmed that attachment, proliferation and phenotype maintenance of RPE cells cultured on silk films were great, and thereby we were able to confirm the potential applications of silk films as tissue engineering carrier for regeneration of retina.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.32
no.4
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pp.662-669
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2005
Nuclear factor I (NFI) exists in the odontoblast and osteoblast. NFI-C null mice demonstrated aberrant odontoblast differentiation, abnormal dentin formation, and molar lacking roots. The purpose of this study was to examine phenotype of the aberrant odontoblast in NFI-C null mice and to evaluate the expression of DSPP and BSP mRNAs in NFI-C null mice with in-situ hybridization. The results were as follows: 1. In the NFI-C (-/-) mice, the crown dentin of molar showed normally formation, but there was no root dentin. 2. In the NFI-C (-/-) mice, the labial dentin of mandibular incisors showed relatively a lot of dentin formation, but the lingual dentin showed defect. 3. In the NFI-C (-/-) mice, the odontoblast of mandibular incisors revealed abnormal shape and trapped in osteodentin-like mineralized tissue. 4. In the NFI-C (-/-) mice, the odontoblast in the crown dentin of molars showed strong expression of DSPP, the odontoblast in the root dentin of molars was not expression of DSPP. In the NFI-C (-/-) mice the odontoblast in the mandibular incisors showed weekly expression of DSPP 5. In the wild mice, the odontoblasts of mandibular incisors were not expression of BSP, but in the NFI-C (-/ -) mice the odontoblast of mandibular incisors showed strong expression of BSP These results suggest that odontoblast in the NFI-C (-/-) mice changes the phenotype into osteoblast.
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.30
no.3
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pp.391-405
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2003
Craniosynostosis, known as a premature fusion of cranial sutures, is a developmental disorder characterized by precocious differentiation and mineralization of osteoblasts in the calvarial sutures. Recent genetic studies have demonstrated that mutation in the homeobox gene Msx2 causes Boston-type human craniosynostosis. Additionally, the phenotype of Dlx5 homozygote mutant mouse presents craniofacial abnormalities including a delayed ossification of calvarial bone. Furthermore transcription of osteocalcin, a mature osteoblast marker, is reciprocally regulated by the homeodomain proteins Msx2 and Dlx5. These facts suggest important roles of osteocalcin, Msx2 and Dlx5 genes in the calvarial bone growth and suture morphogenesis. To elucidate the function of these molecules in the early morphogenesis of mouse cranial sutures, we have first analyzed by in situ hybridization the expression of osteocalcin, Msx2 and Dlx5 genes in the developing parietal bone and sagittal suture of mouse calvaria during the embryonic (E15-E18) stage. Osteocalcin mRNA was found in the periosteum of parietal bones from E15, and gradually more highly expressed with aging. Msx2 mRNA was intensely expressed in the sutural mesenchyme, osteogenic fronts and mildly expressed in the dura mater during the embryonic stage. Dlx5 mRNA was intensely expressed osteogenic fronts and the periostem of parietal bones. To further examine the upstream signaling molecules of transcription factor Msx2 and Dlx5, we have done in vitro experiments in E15.5 mouse calvarial explants. Interestingly, implantation of BMP2-, BMP4-soaked beads onto the osteogenic fronts after 48 hours organ culture induced etopic expressions of Msx2 and Dlx5 genes. On the other hand, overexpression of $TGF{\beta}1$, GDF-6, -7, FGF-2, -4 and Shh did not induce the expression of Msx2 and Dlx5. Taken together. these data indicate that transcription factor Msx2 and Dlx5 play critical roles in the calvarial bone and suture development, and that BMP siganling is involved in the osteogenesis of calvarial bones and the maintenance of cranial sutures through regulating these two transcriotpn factors. Furthermore, different expression patterns between Msx2 and Dlx5 suggest their specific functions in the osteoblast differentiation.
Myostatin is a transforming growth and differentiation factor-${\beta}$ family member that acts as a negative regulator of muscle growth. Previously, mutations in the myostatin gene were known to be related to double muscling phenotypes in cattle. Because myostatin gene is highly related to muscle mass, also meat quality, in cattle, we sequenced whole myostatin mRNA and investigated the SNPs (Single Nucleotide Polymorphisms) in Korean cattle (Hanwoo). The results indicated that Hanwoo had an SNP in nt2385 and this mutation can be a useful marker with further verifications. We also investigated expression patterns of the myostatin gene from various muscle tissues and organs. Northern blotting results indicated that myostatin expression was restricted in muscles with variable expression levels. The results presented here can be used as a valuable information for meat quality related traits and muscle mass in cattle.
Kim, Jong-Shik;Woo, Jung-Hee;Kim, Jun-Tae;Park, Nyun-Ho;Kim, Choong-Gon
Korean Journal of Microbiology
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v.46
no.1
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pp.1-8
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2010
New technologies are providing unprecedented knowledge into microbial community structure and functions. Even though nucleic acid based approaches provide a lot of information, metaproteomics could provide a high-resolution representation of genotypic and phenotypic traits of distinct microbial communities. Analyzing the metagenome from different microbial ecosystems, metaproteomics has been applied to seawater, human guts, activated sludge, acid mine drainage biofilm, and soil. Although these studies employed different approaches, they elucidated that metaproteomics could provide a link among microbial community structure, function, physiology, interaction, ecology, and evolution. These approaches are reviewed here to help gain insights into the function of microbial community in ecosystems.
Scutellaria baicalensis GEORGI(SB) is used in oriental medicine for the treatment of incipient strokes. Although it has been reported that SB is neuroprotective in a hypoxia model, its mechanism is poorly understood. Here, we investigated the effect of SB on the modulation of heme oxygenase-1(HO-1), which has important biological roles in regulating mitochondrial heme protein turnover and in protecting against conditions such as hypoxia, neurodegenerative diseases, or sepsis. Rat cerebrocortical day In vitro(DIV)12 cells were grown in neurobasal medium. On DIV12 cells were treated with SB($20{\mu}g/ml$) and given a hypoxic shock ($2%\;O_2/5%\;CO_2,\;3\;hr$) on DIV14. In situ hybridization results revealed that SB upregulated HO-1 mRNA in neuronal dendrites in both normoxia and hypoxia(38.5% and 59.2%, respectively). At the protein level, SB upregulated HO-1 in the neuronal soma in both normoxia and hypoxia(22.4% and 15.7%, respectively). Interestingly, most significant increase was associated with astrocytes, which increased HO-1 protein by 77.5% compared to SB-untreated culture. These results indicate that SB upregulates both neuronal and glial HO-1 expression, which contributes to the neuroprotection efficacy in hypoxia).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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