Single cell gel electrophoresis assay was carried out to evaluate DNA damage in T-and B-lymphocytes from rats exposed to benzene and the correlation between DNA damage and the level of t,t-muconic acids, which are urinary benzene metabolites, was investigated. In control rats, the mean values of Olive tail moments in T-and B-lymphocytes were 1.507$\pm$0.187 and 1.579$\pm$0.206 respectively. DNA damages of T-lymphocytes in rats exposed for 4 weeks showed the highest Olive tail moments at each benzene concentration examined (2.72-4.351). However this DNA damage was decreased after 6 weeks of exposure (1.74-2.09). DNA damages of B-lymphocytes did not show such differences with exposure time or benzene concentration (1.49-2.07) except at 200 ppm at 4 weeks. T-lymphocytes show significantly more damages than B-lymphocyte upon acute exposure to benzene.
Background: Human leukocyte antigen (HLA)-G-positive gastric cancers are associated with poor survival, but links with tumor escape mechanisms remain to be determined. Materials and Methods: We used immunohistochemistry to investigate HLA-G expression, tumor infiltrating CD8+ T lymphocytes, and Treg cells in 52 gastric cancer patients. Results: There were 29 cancer-related deaths during the follow-up period. Kaplan-Meier analysis indicated that patients with HLA-G-positive (n=16) primary tumors had a significantly poorer prognosis than patients with HLA-G-negative tumors (n=36, p=0.008). The median survival time was 14 months and 47 months, respectively. Patients with high numbers of Tregs and low numbers of CD8+T lymphocytes in the primary tumor had a poorer prognosis than those with low numbers of Tregs and high numbers of CD8+T lymphocytes (p=0.034, p=0.043). Multivariate Cox proportional hazard regression analysis showed that HLA-G expression (hazard ratio: 2.662; 95% confidence interval: 1.242-5.723; p=0.012) and stage (hazard ratio: 2.012;95% confidence interval: 1.112-3.715; p=0.041) were independent unfavorable factors for patient survival. Conclusions: We found a significant positive correlation between HLA-G expression and the number of tumor infiltrating Tregs (p=0.01) and a negative correlation with the number of CD8+T lymphocytes (p=0.041). HLA-G may protect gastric cancer cells from cytolysis by inducing Foxp3+Treg lymphocytes and suppressing CD8+T lymphocytes.
Background: Bone marrow mesenchymal stem cells (MSC) inhibit the immune response of lymphocytes to specific antigens and dendritic cells (DC) are professional antigenpresenting cells whose function is to present antigen to naive T-lymphocytes with high efficiency and play a central role in the regulation of immune response. We studied the effects of MSC on DC to evaluate the relationship between MSC and DC in transplantation immunology. Methods: MSC were expanded from the bone marrow and DC were cultured from peripheral blood mononuclear cells (PBMNC) of 6 myelogenous leukemia after achieving complete response. Responder cells isolated from PBMNC and lysates of autologous leukemic cells are used as tumor antigen. The effect of MSC on the DC was analyzed by immunophenotype properties of DC and by proliferative capacity and the amount of cytokine production with activated PBMNC against the allogeneic lymphocytes. Also, cytotoxicity tests against leukemic cells studied to evaluate the immunologic effect of MSC on the DC. Results: MSC inhibit the CD83 and HLA-class II molecules of antigen-loaded DC. The proliferative capacity and the amount of INF-$\gamma$ production of lymphocytes to allogeneic lymphocytes were decreased in DC co-cultured with MSC. Also the cytotoxic activity of lymphocytes against leukemic cells was decreased in DC co-cultured with MSC. Conclusion: MSC inhibit the activation and immune response of DC induced by allogeneic or tumor antigen.
The inhibitory effect of cell wall extracts of streptococci, have been investigated to know host-parasite relationship or pathogenesis of abscess formation. Streptococci isolated from the infected root canals were sonicated to get cell wall extracts which have been known as one of the factors of pyogenesis. Lymphocytes separated by density gradient were stimulated with phytohemagglutinin and exposed to cell wall extracts of Streptococcus sanguis, S. mitis, S. uberis, S. mutans (ATCC 10449), and S. faecalis (ATCC 19433). [$^3H$]-thymidine uptake of lymphocytes was analyzed with scintillation counter and lactate dehyrogenase (LD) activity was measured with autochemistry analyzer. S. faeealis had the strongest inhibitory effect. beginning at $100\;{\mu}g/ml$ concentration of sonic extracts. S. sanguis and S. mitis had inhibitory effect at $300\;{\mu}g/ml$, while S. uberis and S. mutans showed no inhibitory, effect on DNA syntheis even at $300\;{\mu}g/ml$. Each streptococci showed different inhibitory effect on the DNA synthesis of lymphocytes, which finding indicated wide spectrum of susceptibility of lymphocytes according to streptococcus spp. There were no significant difference of LD activities between control and each streptococcal extracts. Streptococcal sonic extracts did not affect the morphological findings or number of colonies activated lymphocytes. These finding suggested the inhibitory effect of sonic extract of streptococci to lymphocytes could be detected by DNA synthesis inhibition, not by cellular membrane damage.
This study was designed to identify the lymphocytes present and to examine the relation between lymphocytes population and clinical symptoms of the pulps clinically diagnosed as normal and irreversible pulpitis. We recorded the history and severity of the pain and performed several clinical tests, before extirpation of vital, irreversibly inflamed pulps in routine endodontic treatment. Then the teeth were divided into two groups. Five teeth, categorized in acute symptom group, had severe spontaneous pain, particularly at night and were extremely sensitive to cold and heat. The other 15 teeth with history of mild to moderate pain and with or without cold or heat responses were categorized as chronic symptom group. Inflamed pulps were also classified into 8 minor groups by presence or absence of signs or symptoms related to the involved teeth, including the presence of pain on percussion, pain on heat and cold stimuli and the periodontal pocket depth. All extirpated pulps were immediately immersed in ultra low-temperature freezer($-74^{\circ}C$), and they were sectioned $6{\mu}m$ in thickness. Specimens were stained using three-stage indirect immunoperoxidase techniques(DAKO, LSAB kit) and monoclonal antibodies for detecting the presence of T lymphocytes(T), B lymphocytes(B) and helper(T4) and suppressor(T8) lymphocytes. Following results were obtained; 1. All the examined normal and inflamed pull) tissues had positive staining for T lymphocytes and T helper and T suppressor cells. But B cells were observed only in inflamed pulp. 2. Statistically more T and B cells were observed in acute symptom group as compared with chronic symptom group(p<0.05). 3. Cell ratio of BIT in acute symptom group were significantly higher than that of chronic symptom group(p<0.05). 4. Only B cells were significantly increased in the percussion positive group than the number of B cells in percussion negative group(p<0.05). 5. No differences were observed in the number of different cell types among other minor groups.
Der p 2는 알레르기 질환과 관련이 있는 집먼지 진드기의 주요 알러젠이다. 알레르기 질환의 병인기전은 림프구의 사이토카인 분비와 호중구의 세포고사와 관련이 있다. 본 연구에서는 Der p 2가 림프구의 사이토카인 분비를 유도하고, 유도된 사이토카인이 호중구의 세포고사 조절에 효과가 있는 지를 확인하였다. Der p 2는 정상인과 알레르기 질환의 림프구에서 IL-6, IL-8, MCP-1, GM-CSF의 분비를 증가시켰다. Der p 2는 호중구의 세포고사에 어떠한 효과도 없었지만, Der p 2로 림프구를 자극한 뒤 모은 상층액이 호중구의 자발적 세포고사를 억제시켰다. Der p 2는 정상인의 림프구와 호중구를 공동배양에서 자극한 것 보다 알레르기 질환의 림프구와 호중구의 공동배양에서 자극했을 때 호중구의 세포고사를 더 크게 억제시켰다. Der p 2의 림프구와 호중구의 조절기전 규명은 알레르기 질환의 병인기전을 규명하는데 유용한 결과가 될 것이다.
The filter elution technique was used to assay $^{60}Co$$\gamma$ ray-induced DNA strand breaks(SB) in EL4 mouse leukemia cell and mouse spleen lymphocyte. The lymphocytes were stimulated with lipopolysaccharide (LPS, $20{\mu}g/ml$) to label $[^3H]$ thymidine. EL4 cells and lymphocytes in suspension were exposed at $0^{\circ}C$ to 0Gy, 1Gy, 5Gy, 10Gy or l5Gy for DNA single strand breaks(SSB) assay and 0Gy, 25Gy, 50Gy, 75Gy or 100Gy for DNA double strand breaks(DSB) assay of $^{60}Co$ radiation and elution procedure was performed at pH12.1 and 9.6. The number of DNA strand breaks increased with increasing doses of r rays. The strand scission factor(SSF) was estimated in each experiment (eluted volume 21ml). The slope of SSB EL4 cells was $0.01301{\pm}0.00096Gy^{-1}$ (n=5), the slope of SSB for lymphocytes was $0.01097{\pm}0.00091Gy^{-1}$ (n=5) and the slope of DSB for lymphocytes was $0.001707{\pm}0.0000573Gy^{-1}$ (n=5). Thus EL4 cells were more sensitive to induction of DNA SSB by ionizing radiation than lymphocytes (p<0.005). The ratio of slope of dose-response relationship (SSF versus dose) of lymphocytes DNA SSB as compared with the slope of DNA DSB was 6.4.
방사선 치료가 인체의 세포면역 기능의 감소를 유발한다는 사실은 잘 알려져 있지만 방사선 치료에 의한 정확한 변화양상과 이러한 변화가 치료후 언제까지 지속되는지에 관하여서는 잘 모르는 실정이다. 방사선이 말초혈액 림프구 아집단 분포양상에 미치는 영향에 관한 결과는 이전에 보고하였으나 저자들의 결과는 단순히 치료 후 일정 시점에서 림프구 아집단의 분포양상을 알아보는데 그쳤다. 이에 저자들은 방사선 치료 후 두경부 악성종양 환자의 림프구 아집단의 분포 분율뿐 아니라 아집단 림프구 수의 변화를 분석하고, 이러한 변수들이 치료 후 시간에 따라 어떻게 변화하는지 알아보고자 본 연구를 시행하였다. 총 21명의 환자를 대상으로 방사선 치료 전, 치료 후, 치료 후 3개월, 6개월, 1년에 각각 말초혈액을 채취하여 단핵구층을 분리한 후 유세포 분석기를 사용하여 림프구 아집단의 분포양상을 분석하였고 또한 각 환자군에서 전체 림프구의 수를 산출하여 각 군의 아집단 수를 산출한 후 다음과 같은 결과를 얻었다. 일반적으로 자연살세포를 제외한 모든 림프구 아집단의 분포양상과 수가 감소하였으며 이러한 변화는 치료 후 6개월간 지속된 후 점차 회복되는 경향을 보였고 자연살세포는 치료 후 림프구내의 분포 분율은 증가하였으나 수의 변화는 없었다.
With an effort to clarify the nature of the azurphil granules which occasionally occur in the circulating lymphocytes, these granules were investigated by examining smear of the peripheral blood of the chikens in various stage of the individual growth and after injection of methylene blue and gentian violet. In addition, the fine structure of these granules were also investigated. The results were: 1. These granules were first occurred in the lymphocytes just after their hatching (0.004%). The proportion of lymphocytes containing these granules were increased with their growth and in adult chicken its occurrence was higher than mammals. 2. Marked variations in its fine structure, particularly in its size and cotents, were noted but they were believed to belong to categories of lysosome of de Duve. 3. Lymphocytes containing azurophil granule were increased after injection of the non-immunogenic substances, such as gentian violet and methylene blue. 4. From the above results, chicken is bettor animal to study theme granules because of its higher occurrence. They are believed to have intimate relationship with bodily cellular reaction against the foreign materials because they are increased after non-immunogenic stimuli.
Kim, Dong-Joo;Kim, Gil-Sung;Woo, Yong-Deuck;Lee, Sang-Kwon
센서학회지
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제22권3호
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pp.185-190
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2013
We report on direct finding of how the morphology (i.e. filopodia width) of $CD4^+$ T lymphocytes correlates with the size of the quartz nanohohole arrays (QNHAs, 140, 200, 270, and 550 nm in diameter) via scanning electron microscopy (SEM). This research exhibits that the filopodia of $CD4^+$ T-lymphocytes extended on the QNHA substrates were observed to increase in width by increasing the size of QNHA in diameter from 140 to 550 nm. This strong linear response ($R^2$=0.988, n = 6) in filopodia's width of surface-bound $CD4^+$ T-cells with topographical structures of QNHA can be explained by contact guidance between the cells and solid-state substrates. Furthermore, this research suggests that the protruded filopodia of surface-bound T-lymphocytes can be used as a biosensor for sensing the topographical information of the nano-patterned substrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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