The optimum liquid culture conditions were investigated for cell growth and polysaccharide production from liquid culture of Lentinus edodes. In flask culture, the optimal medium compositions for the polysaccharide production contained glucose 60 g/L, yeast extract 10 g/L, $KH_2PO_4$ 2.0 g/L, and $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ 1.0 g/L. The maximum mycelial growth and polysaccharide production were 11.01 g/L and 1.64 g/L, respectively. In bioreactor, through the variation of aeration in order to increase mycelial growth and polysaccharide production, the maximum mycelial growth and polysaccharide production were 55.9 g/L at 8th day and 7.34 g/L at 7th day of cultivation with 1.5 vvm, respectively.
Antibacterial and antifungal activities of liquid culture filtrate, water and ethanol extract (solid culture) of Stereum ostrea were evaluated against 5 bacteria and 3 plant pathogenic fungi. To determine the minimal inhibitory concentration (MIC), we studied $5{\sim}300\;mg/ml$ concentrations against bacteria and fungi separately. The MIC was 10 mg/ml for Bacillus subtilis and 40 mg/ml for Colletotrichum gloeosporioides and Colletotrichum miyabeanus. Liquid culture filtrate was more effective against Gram positive than Gram negative bacteria, and Staphylococcus aureus was the most inhibited (20.3 mm) bacterium. Water and ethanol extracts were effective against both Gram positive and Gram negative bacteria, and water extract was better than ethanol extract. In water and ethanol extract, inhibition zones were 23.6 and 21.0 mm (S. aureus) and 26.3 and 22.3 mm (Pseudomonas aeruginosa), respectively. For plant pathogenic fungi, the highest and lowest percent inhibition of mycelial growth (PIMG) was found 82.8 and 14.4 against C. miyabeanus and Botrytis cinerea in liquid culture filtrate, respectively. In water extract, the PIMG was found to be the highest 85.2 and lowest 41.7 for C. miyabeanus and C. gloeosporioides, respectively. The inhibitory effect of ethanol extract was better against C. miyabeanus than C. gloeosporioides and B. cinerea. Among 3 samples, water extract was the best against tested pathogenic fungi. This study offers that the extracts isolated from S. ostrea contain potential compounds which inhibit the growth of both bacteria and fungi.
The rotifer Brachionus plicatilis is one of the most important food organisms in aquaculture. The resting eggs produced by mictic female rotifers are easily stored and hatched, making them useful as the starter for the mass culture of rotifers in marine larval culture. This study examined the optimum preservation method for resting eggs to ensure a high hatching rate. To produce resting eggs, the marine rotifer B. plicatilis was cultured with Nannochloris oculata (KMMCC 16). The resting eggs were harvested and cryopreserved using 5% and 10% methanol (MeOH), dimethylsulfoxide (DMSO), and glycerol as cryoprotectant agents (CPAs). The cryopreservation comprised slow or rapid freezing and the resting eggs were stored for one month in liquid nitrogen ($-196^{\circ}C$). The resting eggs were also dried at different temperatures (30, 40, and $50^{\circ}C$) and for different times (1, 2, and 3 h). In general, the hatching rates of the resting eggs preserved with CPA were higher than those without CPA and the slow freezing method was better than the rapid freezing method. However, the optimum CPA concentration for the hatching rate of the resting eggs varied with the freezing method and kind of CPA, and the CPA also affected the viability of the resting eggs. Dried resting eggs had a high, rapid hatching rate over 80%. The moisture content of the resting eggs cryopreserved in liquid nitrogen affected the hatching rate. Drying at $30^{\circ}C$ for 1 hour resulted in a high hatching rate of the resting eggs. In conclusion, drying at $30^{\circ}C$ for 1 hour and preservation in liquid nitrogen with the slow freezing method, without CPA, is recommended for a high hatching rate (ca. 95%) of rotifer resting eggs.
Ha, Si Young;Jung, Ji Young;Lee, Dong Hwan;Yang, Jae-Kyung
Journal of Mushroom
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v.19
no.1
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pp.1-8
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2021
The choice of the culture medium is an important factor for the mass production of mycelia in submerged cultures. The influence of liquid medium on the mycelial dry weight of Paecilomyces tenuipes was investigated in this study. The regression equation is expressed as Y=-1292.94187+17.78612X1+18.92425X2+2.11464X3-0.019375X1X2-0.006276X1X3+0.008177X2X3-0.070169X12-0.292175X22-0.008818X32, where Y represents the value of the mycelial dry weight (g/L), X1 is the particle size of wood sawdust in liquid medium (mesh), X2 is the concentration of the wood sawdust in liquid medium, and X3 is incubation time (h). The medium was optimized using a response surface methodology, and the optimal medium contained 30 g of wood sawdust (140 mesh), 20 g of glucose, and 10 g/L of peptone. Under these conditions, the mycelial dry weight reached 38.1 g/L (actual value). The culture medium containing wood sawdust is simple and easy to use, highly efficient, and eco-friendly, and its effectiveness in large preparations of P. tenuipes mycelia with low material costs has been demonstrated.
Changhai Wang;Yingying Sun;Ronglian Xing;Liqin Sun
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.10
no.2
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pp.103-108
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2005
For more accurately describing the durations of the light and the dark phases of micro-algal cells over the whole light-dark cycle, and probing into the relationship between the liquid circulation time or velocity, the aeration rate and cell density, a series of experiments was carried out in 10 cm light-path flat plate photobioreactors. The results indicated that the liquid flow in the flat plate photobioreactor could be described by liquid dynamic equations, and a high biomass output, higher content and productivity of arachidonic acid, $70.10\;gm^{-2}d^{-1},\;9.62\%$ and 510.3 mg/L, respectively, were obtained under the optimal culture conditions.
The neurotoxin of Clostridium botulinum type B was purified from a liquid culture. The purification steps consist of ammonium sulfate precipitation of whole culture, treatment of Polymin P(0.15%, v/v), gel filtration on Sephadex G-100 at pH5.6 and DEAE-Sephadex charomatography at pH8.0. The procedure recovered 17% of the toxin assayed in the starting culture. The toxin was homogeneous by sodium dodecyl sulfate(SDS)-polyacrylamide gel electrophoresis and had a molecular weight of 163,000. Subunits of 106,000 and 56,000 molecular weight were found when purified toxin was treated with a disulfide-reducing agent and electro phoresed on SDS-polyacrylamide gels.
Cultivated garlic, Allium sativum L. is economically important for leaves and bulbs, which historically were used in Korea for spices and condiments of Korean food as well as medicine crops. This experiment was carried out to investigate the effect of development and differentiation on culture of A. sativum (cv: white 6) by explant position, hormone composition and sucrose concentration in culture media. Culture method was investigated to induce shoot primordium. Culture efficiency was better with lower tissue of foliage leaf in explant position and on the medium with NAA 0.02 + BAP 1.0 mg/l in hormone composition than any other. Precocious shoot and callus were induced from shoot apex. Shoot was efficiently differentiated on 4,000 mg/l sucrose with increasing concentration of BAP. Shoot primordium was also induced with liquid rotary culture by histological observation. Rhizoid was induced from callus tissue cluster on medium with NAA 0.02 + BAP 2.0 mg/l.
Jang, Young Se;Cui, Hai Yan;Lee, Eun Jung;Kim, Hae Won;Paek, Kee-Yoeup
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.20
no.6
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pp.479-486
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2012
The production of adventitious roots derived from root explant of Echinacea angustifolia and its secondary metabolite content were assessed in different types and levels of auxin. The induction of adventitious roots from root explant cultured in Murashige and Skoog solid medium supplemented with 1.0 mg/L indole -3-butyric acid (IBA) attained highest as 20.87 mg fresh weight and 3.07 mg dry weight per culture but root suspension culture at the same concentration of IBA enhanced biomass production as 3.07 g fresh weight and 0.38 g per culture after 4 weeks in culture. 3.0 mg/L ${\alpha}$-naphthalene acetic acid (NAA) treatment had similar effect on root biomass production as 3.07 g fresh weight and 0.38 g per culture with liquid suspension culture, whereas adventitious roots exposed to over 3.0-5.0 mg/L IBA or 5.0 mg/L NAA were less responsive by reducing the number of adventitious roots and/or changing root morphology such as short and thick. The content of secondary metabolites such as phenolic, flavonoids and total caffeic acid in adventitious roots cultured on MS medium supplemented with 1.0 mg/L IBA were attained highest as 27.20, 9.60. 10.67 mg/g dry weight, respectively. Overall, the best production of root biomass and secondary metabolites were given by 1.0 mg/L IBA.
The removing copper from CCA, CCFZ treated wood were tested with Tyromyces palustris. The shacking culture, solid culture, and stationary culture methods were tested to removal of copper in CCA, CCFZ treated wood. The steam pressure method and oxalic acid method were tested as pretreatment. To investigate of copper removal mechanism, the oxalic acid that produced by T. palustris and combination with copper was examined on stationary culture that contained CCA and CCFZ treated wood chips. Oxalic acid increased copper removing rate of T. palustris as pretreatment. Stationary culture had most removal effectiveness among the culturing methods. The removal rate of copper on bioreactor was 61% on 7 days. Copper-oxalate was detected on liquid culture, which show the oxalate from liquid of culture combined with copper from treated wood. It would be related to the removal of copper from treated wood by T. palustris.
Kim, So Young;Kim, Young Suk;Jang, Joung Soon;Kim, Boh Hyun;Rakib, Abdur Md.;Kim, Gon Sup;Kim, Jeong Ok;Ha, Yeong Lae
Journal of Life Science
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v.24
no.12
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pp.1316-1324
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2014
Most beta-glucans obtained from various fruit bodies of mushrooms and mushroom mycelial cultures have high-molecular weight glycoproteins, conjugated with beta-glucans. We report that isoflavone-conjugated glycolproteins (designated as gluvone) were isolated and exhibited stronger anticarcinogenic activities. Agaricus blazei mycelia (ABM) was cultured in a liquid medium containing soybean flakes for 14 days. The liquid culture was autolyzed by incubating at $53^{\circ}C$ (pH 5.5) for 3 h. A crude glycoprotein (CGP) fraction with a cytotoxic effect on a mouse ascite cancer cell line (S-180) and a human breast cancer cell line (MCF-7) was isolated from the autolyzed ABM cultures by 80% ethanol treatment. Gluvone was isolated from the CGP with Sephadex G-75 column chromatography. It exhibited a stronger anticancer effect than CGP against the S-180 cell-induced female ICR mouse ascites carcinogenesis. Gluvone with 9,400 daltons was identified as a glycoprotein conjugated with isoflavone. According to HPLC and GC analysis, in conjunction with $^1H$-NMR spectral analysis, it contained 60% carbohydrates (glucose, fructose, and ribose), 31% protein, and 2% isoflavone (daidzein and genistein), which is a novel material. These results indicate that a strong anticarcinogenic gluvone was isolated from the autolyzed product of a submerged liquid culture of ABM, suggesting that autolysis could be a useful tool to produce antitumor agents.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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