본 연구에서는 효율적으로 표고 액체종균을 생산하기 위하여, 액체배지에 폭기방법으로 산소를 공급하고, 대두박을 첨가하여 표고균사체 생장량과 잔존 배양액의 유리당함량을 조사하였다. 그 결과 폭기방법은 균질화된 표고균사가 생장하면서 서로 뭉치지 않고 균질하게 증식하고, 대두박 첨가는 대수기 이후에도 지효성 질소영양원이 공급되도록 하는 효과가 있었다. 배양 중 침전 균사체의 중량은 13일째에 가장 많았으며, 배양용기의 배출구에서 이산화탄소 농도는 13일째에 가장 높았다. 상층 수용액에서 환원당은 폭기 12일째에 거의 소비되었다. 그리고 배양균사체에서 총질소(T-N)량은 폭기 배양 13일째에 최고 수준이며, 키틴함량과 5종의 유리당 중에서 수크로즈함량은 폭기 배양 18일째에 가장 높았으나, 에르고스테롤 함량은 폭기 배양 22일째에 가장 높았다. 이와 같은 결과를 종합적으로 판단할 경우 표고액체 종균으로서 사용 적기는 균사활력이 가장 왕성하고 균체량이 많은 배양 18일째로 판단되었다.
To evaluate the efficiency of anther floating culture according to the maturing group, the varietal difference and classification of fifty varieties was conducted in N6 liquid medium containing 1mg $l^{-1}$ NAA, 0.25 mg $l^{-1}$ kinetin. The efficiency of callus induction was widely ranged from 0 to 113.4%, but the mean callus induction was not significantly different among maturing groups. The efficiency of anther floating culture showed the highest variation in early-maturing group among three maturing groups. The varieties with the best callus induction were Sambaegbyeo and Jinbuolbyeo, while the recalcitrant variety was Obongbyeo in early-maturing group. The efficiency of plant regeneration showed the highest trends in late-maturing group among three maturing groups. The fifty varieties were classified into three groups (distance=0.78) by cluster analysis based on the callus formation and plant regeneration. Group including only two varieties, Shinunbongbyeo and Sambaegbyeo had the excellent androgenic efficiency, and the medium efficiency of Group was included thirty-six varieties. Whereas twelve varieties, including three Tongil varieties were fell into the bad efficiency of Group. Especially, Tongil varieties containing Japonica rice, Obongbyeo were the recalcitrant genotypes for the anther floating culture.
To develop an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting mold, we produced anti-mold polyclonal antibodies by immunizing extracellular polysaccharide (EPS) of Aspergillus flavus or Penicillium citrinum in rabbits subcutaneously. Using the purified antibody (Ab) and Ab-HRP conjugate, a sandwich ELISA for EPS was established. The standard curve of the ELISA showed the detection limit for P citrinum EPS to be $0.003{\;}\mu\textrm{g}/ml$. The cross-reactivities of the anti-P citrinum EPS Ab toward components of P citrinum such as EPS, liquid, and solid culture mycelium were 100, 10.5, and 0.58%, respectively, and those toward components of A. flavus such as EPS, liquid and solid culture mycelium, and spore were 300, 0.67, 0.29, and 0%, respectively. When the reactivities toward culture broths of 59 mold strains were tested by the sandwich ELISA, most of the Aspergillus (16 of 18) and Penicillium (14 of 16) strains along with one of the two Cladosporium strains gave positive signals in the culture broths even when diluted 1,000 fold, while the rest of species such as Fusarium, Absidia, Alternaria, and Candida gave negative signals. When the water extracts of 30 corn samples were analyzed by the sandwich ELISA, the EPS in the com could be detected in the concentration range of $0.1-1.6{\;}\mu\textrm{g}/g$.
The effect of thinned fruits, apple, pear and peach, on the mycelial growth of mushrooms was investigated. The growth of mycelia with the addition of thinned fruit was clearly better than that in the control for all the tested mushrooms. The growth rate of Pleurotus ostreatus was faster than any other mushroom. The optimal concentrations of thinned apple, pear, and peach in a solid culture were 1.0%, 1.0%, and 3%, respectively, while in a liquid culture the optimal concentrations were 5,0%, 3.0%, and 5.0%, respectively. When Pleurotus ostreatus was incubated in a 20-L pilot scale fermenter with 10 L of a liquid medium containing 3% thinned fruit at 25$^{\circ}C$ and 6 vvm for 10 days, the mass-production of mycelia was 74.2 g/10 L (apple), 96.2 g/10 L (pear), and 86.3 g/10 L (peach). The mycelial yield of Pleurotus ostreatus in a medium containing thinned fruit was 2 ∼ 3 times higher than that in the control.
The principal objective of this study was to determine the optimal liquid culture conditions in shake flasks for maximal sporulation of Beauveria bassiana. The optimal initial pH for the spore production of B. bassiana using Potato Dextrose Broth was 5.2. The screening in shake flasks of carbon and nitrogen sources resulted in the identification of an optimal medium based on 3% sucrose and 1% casamino acid, with a C : N ratio of 22 : 4. Using this medium, a production level of $5.65{\times}10^7$ spores per ml was obtained after 5 days of culture. Using 3% corn meal, 2% corn steep powder, and 2% rice bran, the maximum spore concentration of $8.54{\times}10^8$/ml was achieved 8 days after inoculation at $25^{\circ}C$ in a rotary shaking incubator operated at 200 rpm. This represents a yield gain of approximately 2.89 times that of pre-optimization.
The culture filtrate of Lentinula edodes shows potent antimicrobial activity against the plant pathogenic bacteria Ralstonia solanacearum. Bioassay-guided fractionation was conducted using Diaion HP-20 column chromatography, and the insoluble active compound was not adsorbed on the resin. Further fractionation by high-performance liquid chromatography (HPLC) suggested that the active compounds were organic acids. Nine organic acids were detected in the culture filtrate of L. edodes; oxalic acid was the major component and exhibited antibacterial activity against nine different phytopathogenic bacteria. Quantitative analysis by HPLC revealed that the content of oxalic acid was higher in the water extract from spent mushroom substrate than in liquid culture. This suggests that the water extract of spent L. edodes substrate is an eco-friendly control agent for plant diseases.
세 가지 액체배지를 사용하여 Berkeley대학 Dr. Bjeldanes Lab에서 isolate된 F. moniliforme을 생육시킨 결과 Czapek-Dox medium에서 Fusarin C생성량이 가장 높았으며 옥수수에 비하면 약 1/10정도의 양인 것으로 나타났다. 그리고 Czapek-Dox medium의 경우 $28^{\circ}C$에서 2주간 배양한 때에 Fusarin C의 생성량이 가장 많았으며 옥수수의 경우는 28$^{\circ}C$에서 1주간 배양한 때에 가장 높았다. 또한 Czapek-Dox medium의 initial PH가 6.5인 때에 Fusarin C의 생성량이 최대이었으며 6.3, 5.9인 때도 다른 PH보다 월등히 높은 양이 생성됨을 확인할 수 있었다.
Monascus rubber KCTC 6122를 이용하여 액체 배양을 통한 실험균의 적색 색소의 생산을 위한 배양 조건의 최적화에 관한 결과는 다음과 같다. 실험 균주가 생산하는 적색색소의 최적 배양 조건은 탄소원으로 rice powder 4% 첨가, 질소원으로 NaN0$_3$ 0.2%, 인산염으로 $Na_2$HPO$_4$의 농도가 0.3%, MgSO$_4$의 농도가 0.15%일 때 가장 높은 적색 색소 생성을 나타내었다. 배양 온도는 3$0^{\circ}C$, 초기 pH가 6.5, 진탕속도를 150 rpm, 배양 시간 8일 일 때 적색 색소의 생성능이 흡광도 70.29로 가장 우수하였다.
Claudiu Magioli;Ana Paula Machado da Rocha;Pinheiro, Marcia-Margis;Martins, Gilberto-Sachetto;Elisabeth Mansur
Journal of Plant Biotechnology
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제2권1호
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pp.43-49
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2000
An efficient and reliable Agrobacterium transformation procedure based on TDZ (thidiazuron)-induced organogenesis was established and applied to six Brazilian eggp1ant varieties. Optimum transgenic plants recovery was achieved upon the study of the following parameters affecting transformation efficiency, using F-100 variety as a model: i) explant source; ii) pre-culture period; iii) physical state of the pre-culture medium and iv) coculture conditions. The highest frequency of kanamycin-resistant calli derived from leaf explants (5%) was obtained without a pre-culture period and co-cultivation for 24 h in liquid medium followed by five days on solid RM (regeneration medium). For cotyledon explants, best results were achieved upon a pre-culture of 24 h in liquid RM and a co-cultivation period of 24 h in liquid RM followed by three days in solid RM, resulting in a transformation Sequency of 22.7%. Kanamycin-resistant organogenic calli were also obtained from cultivars Emb, Preta Comprida, Round nose Shaded, Campineira and Florida Market. The expression pattern of an epidermis-specific promoter was studied using transformants expressing a chimaeric construct comprised by the promoter Atgrp-5 transcriptionally fused to the coding region of the gus gene. The expression pattern was similar to that previously observed in tobacco and Arabidopsis thaliana, with preferential expression at the epidermis and the stem phloem. These results support the idea that the Atgrp-5 promoter can be used to drive defense genes in these tissues, which are sites of pathogen interaction and spread, in programs for the genetic improvement of eggplant.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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