A strategy for development of a functional rice in proved with human lactoferrin and enhancement of nutrient compounds was planned. For the purposes we have cloned and characterized a human lactoferrin cDNA from human mammary gland cDNA library A endosperm storage vacuole targeting sequence and the cDNA fragment was linked to endosperm specific glutelin promoter. The fusion gene fragment was inserted into a binary vector containing MAR gene. In addition a new ${\beta}$-galactosidase gene from Bifidobacterium of human was used as a reporter gene in the vector system, Rice plants showing a high concentration of amino acids in the endosperm cells were developed by using a biochemical mutation and bred for the transformation with the binary vector system Finally we have established a transformation method for the rice endosperm cells.
Kim, Joung-Mok;Park, Hye-Yeon;Choi, Kyoung-Jae;Jung, Hoe-Il;Han, Sung-Hwan;Lee, Jae-Seong;Park, Joon-Shik;Yoon, Moon-Young
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권11호
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pp.1784-1790
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2006
Bacillus anthracis is a causative agent of anthrax. Anthrax toxins are composed of a protective antigen (PA), lethal factor (LF), and edema factor (EF), in which the PA is a central mediator for the delivery of the two enzymatic moieties LF and EF. Therefore, the PA has been an attractive target in the prevention and vaccinization for anthrax toxin. Recently, it has been reported that the molecule consisting of multiple copies of PA-binding peptide, covalently linked to a flexible polymer backbone, blocked intoxification of anthrax toxin in an animal model. In the present study, we have screened novel diverse peptides that bind to PA with a high affinity (picomolar range) from an M13 peptide display library and characterized the binding regions of the peptides. Our works provide a basis to develop novel potent inhibitors or diagnostic probes with a diverse polyvalence.
The pseudodisaccharide salbostatin, which consists of valienamine linked to 2-amino-1,5-anhydro-2-deoxyglucitol, is a strong trehalase inhibitor. From our Streptomyces albus ATCC 21838 genomic library, we identified thirty-two ORFs in a 37-kb gene cluster. Twenty-one genes are supposed to be a complete set of modules responsible for the salbostatin biosynthesis. Through sequence analysis of the gene cluster, some of the upstream gene products (SalB, SalC, SalD, SalE, and SalF) revealed functional resemblance with trehalose biosynthetic enzymes. On the basis of this rationale, we isolated the five genes (salB, salC, salD, salE, and salF) from the S. albus ATCC 21838 and cloned them into the expression vector pWHM3. We demonstrated the noticeable expression and accumulation of trehalose, using only the five upstream biosynthetic gene cluster of salbostatin, in the transformed Streptomyces lividans TK24. Finally, 490 mg/l trehalose was produced by fermentation of the transformant with sucrosedepleted R2YE media.
The aceB gene, encoding for malate synthase, one of the key enzymes of glyoxylate bypass, was isolated from a pMT1-based Corynebacterium glutamicum gene library via complementation of an Escherichia coli aceB mutant on an acetate minimal medium. The aceB gene was closely linked to aceA, separated by 598 base pairs, and transcribed in divergent direction. The aceB expressed a protein product of Mr 83, 000 in Corynebacterium glutamicum which was unusually large compared with those of other malate synthases. A DNA-sequence analysis of the cloned DNA identified an open-reading frame of 2, 217 base pairs which encodes a protein with the molecular weight of 82, 311 comprising 739 aminoo acids. The putative protein product showed only limited amino acid-sequence homology to its counteliparts in other organisms. The N-terminal region of the protein, which shows no apparent homology with the known sequences of other malate synthases, appeared to be responsible for the protein s unusually large size. A potential calciumbinding domain of EF-hand structure found among eukaryotes was detected in the N-terminal region of the deduced protein.
A lot of SSRs (simple sequence repeats) in peach and pear from enriched genomic libraries and in peach from a cDHA library were developed. These SSRs were applied to other related species, giving phenograms of 52 Prunus and 60 pear accessions. Apple SSRs could also be successfully used in Pyrus spp. Thirteen morphological traits were characterized on the basis of the linkage map obtained from an Fa population of peach. This map was compiled with those morphological markers and 83 DHA markers, including SSR markers used as anchor loci, to compare different peach maps. Molecular markers tightly linked to new root-knot nematode resistance genes were also found. A linkage map including disease-related genes, pear scab resistance and black spot susceptibility, in the Japanese pear Kinchaku were constructed using 118 RAPD markers. Another linkage map, of the European pear Bartlett, was also constructed with 226 markers, including 49 SSRs from pear, apple, peach and cherry. Maps of other Japanese pear cultivars, i.e., Kousui and Housui, were also constructed. These maps were the first results of pear species.
A recombinant Fab monoclonal antibody (Fab) C37, previously obtained by phage display and biopanning of a random antibody fragment library against Burkholderia pseudomallei protease, was expressed in different strains of Escherichia coli. E. coli strain HB2151 was deemed a more suitable host for Fab expression than other E. coli strains when grown in media supplemented with 0.2% glycerol. The expressed Fab fragment was purified by affinity chromatography on a Protein G-Sepharose column, and the specificity of the recombinant Fab C37 towards B. pseudomallei protease was proven by Western blotting, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and by proteolytic activity neutralization. In addition, polyclonal antibodies against B. pseudomallei protease were produced in rabbits immunized with the protease. These were isolated from high titer serum by affinity chromatography on recombinant-Protein A-Sepharose. Purified polyclonal antibody specificity towards B. pseudomallei protease was proven by Western blotting and ELISA.
A rapid growth of science parks worldwide since 1980s is caused by both the widespread perception that technological innovation is the essential element for the economic development and the notified cases of successful high technology cluster like Silicon Valley. Analyzed in terms of R & D employment and expenditure, new product launches, patent registration, qualifications of the founder, self-rated technological level and the like, the technological level of the science parks in the U.K. reveals very high. While nealy half of the firms on the science parks are represented to be formally linked with universities, the use of the library is referred most frequently among the types of the linkages. R & D links such as contract research, sponsored research, test and analysis were rarely mentioned. Summing up, science parks play an important role for the development of high-tech industries with superior technological characteristics. But in reatlity, there remains so much difference among the individual parks and their location. In addition the individual parks and their location. In addition, institutionalization of the technology transfer with univeristies that only when the science parks are based on the innovative environment they can be successful in the capability of the technological innovation.
Interoperation between heterogeneous simulators employs definition of standard protocols for data exchange and time synchronization among simulators. The High Level Architecture(HLA) is a specification of common services for such interoperation, which is approved as IEEE standard 1516. This paper presents the design and implementation of an interoperable adaptor which supports development of interoperable simulators under the IEEE 1516 HLA/RTI environment. The adaptor, KHLAAdaptor1516, is implemented as a library form which is linked to HLA-compliant simulators. Design of the adaptor employs a protocol conversion method, the model of which is finite state machine. KHLAAdaptor1516 allows developers to separate interoperable adaptors from stand-alone simulators. The interoperable adaptor manages mapping between HLA services and simulation messages for simulator, This separation increases robustness of a federation and reusability of simulators as well as alleviates much effort and time for maintenance.
The linker which plays a role in connecting a polymer with a scaffold has become an important part n solid-phase reaction. To develop a new linker for alcohols and carbohydrates, dihydropyran moiety was selected in this study. New linker, 1-($4^{l},5^{l}$-dihydro-5H-pyranyl)-7-hydroxyheptan-3-one (5) was synthesized via four steps from $\delta$-valerolactone. This can be called as DDHP-linked Wang resin due to double dihy-dropyran rings. To the one pyran ring of new linker 5 was added Wang resin and other alcohols and carbohydrates as scaffolds were then added successfully to the another pyran ring. Carbohydrate and hydroxyl resins were connected via new linker in a 70% loading yield. The detachment of glucose moiety in the presence of PPTS (2 equiv.) in 1:1 n-buteanol/1,2-dichloroethane at $60^{\circ}C$ for 12 h was carried out quantitatively. When certain combinatorial chemical works are carried out using this dihydropyran linker, Wang resin itself can be recovered. Its fact is particularly very important in industry, because recovered resins can be recycled.
간흡충 성충의 cDNAlibrary를 제작하고, 간흡충 감염 토끼 혈청으로 강한 양성 반응을 보이는 클론 (pBCs31) 한 개를 면역선별하였다. 이 클론이 28 kDa의 재조합단백을 encoding하는 것을 면역이적법으로 확인하였다. 클론된 유전자는 30개의 일정한 염기서열이 16번 반복된 후 320개의 다른 염기가 이어져 있었다. 이 반복되는 염기서열의 연역된 아미노산서열은 AQPPKSGDGG이었 다. 이 재조합항원을 이용한 효소면역검사법은 간흡충 감염 사람 혈청에 높은 특이도를 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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