Adenylate kinase-like activity and phosphotransferase-like activity from $F_1$-ATPase of Escherichia coli was revealed by $^{31}P$ NMR spectroscopy. Incubation of F1-ATPase with ADP in the presence of $Mg^{2+}$ shows the appearance of $^{31}P$ resonances from AMP and Pi, suggesting generation of AMP and ATP by adenylate kinase-like activity and the subsequent hydrolysis to Pi. Incubation of $F_1$-ATPase with ADP in the presence of methanol shows additional peak from methyl phosphate, suggesting phosphotransferase-like activity of $F_1$-ATPase. Both adenylate kinase-like activity and phosphotransferase-like activity has not been reported from $F_1$-ATPase of Escherichia coli. $^{31}P$ NMR could be a valuable tool for the investigation of phosphorous related enzyme.
In order to determine the relationship between probing pocket depth and trypsin-like activity in subgingival plaque, probing pocket depth and loss of attachment were measured by Michigan-O probe on mandibular incisors of 30 patients with adult periodontitis. And the trypsin-like activity of Treponema denticola, Porphyromonas gingivalis, and Bacteroides forsythus was evaluated by the hydrolysis of N-Benzoyl-DL-Arginine-2-Naphthyla-mide (BANA) using PerioScan reagent cards(Oral-B Laboratories, Redwood City, CA). The obtained data were statistically analyzed by Microstat program. The results were as follows. 1. The number of teeth showing negative trypsin-like activity was more in shallow periodontal pocket groups, but the number of teeth showing positive trypsin-like activity was more in deep periodontal pocket groups. 2. There was a significant positive correlation between probing pocket depth and trypsin-like activity in subgingival plaque(y=0.413X - 0.955, r = 0.7024, p<0.001). 3. There was no consistent relationship between loss of attachment and trypsin-like activity in subgingival plaque(p>0.01).
I evaluated the protective effect of N-methyl-D-aspartate (NMDA)/glycine receptor antagonist, 7-chlorokinurenic acid (CKA) on cultured mouse astrocytes damaged by ischemia-like condition (ILC). The protective effect of CKA was assessed by cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) activity, superoxide dismutase (SOD)-like activity and lipid peroxidation. To examine the effect of CKA on the cell apoptosis, the expression and the activity of caspase 3 were assessed by Western blotting. CKA increased the cell viability decreased by ILC. CKA also decreased the LDH activity and antioxidative effects such as SOD-like activity and inhibitory activity of lipid peroxidation. In addition, CKA suppressed the expression of caspase 3 associated with apoptosis, and increased the cell viability by the decrease of caspase 3 activity as like the caspase 3 inhibitor, Av-DVED-MED. From these results, these results suggest that ILS induces cell cytotoxicity in cultured astrocytes and CKA, NMDA/glycine receptor antagonist, is effective on the prevention of the cytotoxicity due to ILS by the antioxidative effect and the inhibition of apoptosis.
본 연구는 기내 배양한 나도 풍란에 식물생장억제제인 Uniconazole, Ancymidol, Paclobutrazol의 종류별, 농도별 처리가 식물체내 내생 GA 유사물질의 활성 및 ABA 유사물질의 함량의 변화에 미치는 영향을 알아보기 위하여 실시되었다. 지상부인 잎에서는 Uniconazole 0.05 mg/L, Ancymidol 0.1 mg/L, Paclobutrazol 0.3 mg/L 처리 시 ABA 유사물질의 함량은 대조구보다 낮았으며, GA유사물질의 활성은 대조구 보다 높거나 비슷한 수준이었다. 하지만 처리농도가 높아짐에 따라 ABA 유사물질의 농도는 높아졌으나, GA 유사물질의 활성은 비교적 억제되었다. 지하부인 뿌리에서는 Uniconazole 0.05, 0.2mg/L, Ancymidol 0.2 mg/L, Paclobutrazol 0.1 mg/L 처리에서 ABA 유사물질의 함량이 대조구보다 낮았고, 그 이상의 농도에서는 높았다. GA 유사물질의 활성은 비교적 저 농도에서는 높았으나, 고농도 처리에서는 저 농도와 비교하여 활성이 억제되었다.
국내에서 시판되고 있는 16종의 과실, 채소 착즙액 및 농축품의 SOD 유사활성을 pyrogallol autoxidation 방법을 이용하여 측정하였으며 이들의 열안정성, 사과주스에 첨가시 사과주스의 SOD 유사활성 상승효과를 조사하였다. SOD 유사활성은 브로콜리 착즙액이 41.7%, 딸기, 당근 착즙액 등이 30% 이상으로 높게 나타났으며 그 다음은 케일농축액, 키위 착즙액, 무 착즙액이 $24.1{\sim}27.6%$ 정도의 SOD 유사활성을 나타내었다. $95^{\circ}C$에서 20분까지 처리시에도 SOD 유사활성은 오히려 증가하는 경향을 나타내었다. 사과주스의 SOD 유사활성을 100%로 할 때 사과주스에 당근농축액과 키위착즙액을 20% 첨가시에는 120%정도, 딸기와 브로콜리 착즙액은 135%의 높은 SOD 유사활성 상승효과를 나타내었다. 특히 무 착즙액의 경우 사과주스에 20% 첨가시 148%로 가장 높은 상승효과를 나타내었다.
부화 직후부터 변태를 완료하는 58일째까지 찰가자미 자어에서 소화효소들의 활성과 성장이 조사되었다. 자어들은 먹이를 공급하지 않는 조건과 충분히 공급하는 두 가지 조건에서 사육되었고 일정한 간격으로 성장과 함께 acid phosphatase(ACPase), alkaline phosphatase (ALPase)의 비활성 및 trypsin-like enzyme과 pepsin-like enzyme의 활성 변화를 파악하였다. 절식구에서 전장의 성장은 부화 후 7일까지 빠르게 증가하였으나, 이후부터는 거의 변화가 없었고 먹이 공급구의 경우 부화시 5.13$\pm$0.18mm였던 것이 58일 후 13.43$\pm$1.40mm로 성장하였다. 절식구의 개체 당 건조 체중은 부화 직후부터 기아로 사망이 발생한 12일째까지 시간이 경과할수록 감소하였다. 먹이 공급구의 경우 난황이 흡수될 때까지는 감소하였지만, 부화 후 20일째부터 빠르게 증가하기 시작하였다. ACPase와 ALPase 비활성은 절식구의 경우 실험을 종료할 때까지 증가하였으나, 먹이공급구는 부화 후 20일까지 증가한 후 실험을 마칠 때까지 서서히 감소하였으며 두 실험구 사이에서는 유의적인 차이가 없었다. 절식구의 trypsin-like enzyme 활성은 부화 후 3일부터 증가하여 6일째에 가장 높은 활성을 나타내었으나 난황을 완전히 흡수한 이후부터는 활성이 거의 검출되지 않았다. 먹이 공급구의 경우 부화 후 3일부터 난황을 완전히 흡수할 때까지 빠르게 증가하였고,20일째 가장 높은 활성을 나타내었다. Trypsin-like enzyme 활성은 부화 후 8일부터 먹이공급구가 절식구보다 유의적으로 높게 나타났다. Pepsin-like enzyme 활성은 두 실험구 모두에서 부화 초기에는 증가하였으나, 절식구에서는 실험종료 시까지 감소하였고, 먹이 공급구는 부화 후 10일째 높은 활성을 나타낸 후 일시적으로 감소하지만 부화 후 20일째 다시 높은 활성을 나타낸 후 실험 종료 시까지 서서히 감소하였다. Pepsin-like enzyme 활성은 8일째와 10일째 절식구가 먹이공급구보다 유의적으로 높게 나타났다. 이상의 결과들을 종합해보면 ACPase, ALPase의 비활성 및 trypsin-like enzyme과 pepsin-like enzyme치 활성은 자어의 성장이나 형태 발달과 깊은 연관이 있었다. 그리고 trypsin-like enzyme과 pepsin-like enzyme의 활성은 자어의 발달 단계, 성장 및 먹이 공급 등에 영향을 받기 때문에 자어의 건강이나 성장 상태를 나타낼 수 있는 간접적인 지표로써 이용 할 수 있겠다.
딸기의 휴면기(休眠期)에 있어서의 내생(內生) Cytokinin-like 물질(物質)의 활성(活性)은 휴면(休眠)의 정도(程度)에 따라 변화(變化)를 보였고, 이 활성(活性)의 변화(變化)는 생육상(生育相)의 변화와 비슷한 결과(結果)를 나타냈다. 딸기의 Crown 부분(部分) 20g을 Methyl alcohol로 추출하여 Column chromatography로 분류, Soybean callus bioassay 한 결과 두 부분(部分)에서 활성(活性)을 보였고, 이 중 Ethyl acetate/methyl alcohol; 50/50 및 90/10에서 강한 활성(活性)을 보였다. 생육상과의 관계는 생육(生育)이 비교적 왕성한 시기에 강한 활성(活性)이 나타났으며, 휴면(休眠)이 깊은 시기에 활성(活性)이 낮았다. 그러나 일정(一定)한 저온기간(低溫期間)의 경과와 함께 다시 활성화(活性化)되었으며, 이 결과로 휴면(休眠)의 깊이의 정도(程度)와 내생(內生) Cytokinin의 양적증대(量的增大)와는 역비례적인 상관성을 보여주고 있다.
The equine chorionic gonadotropin (eCG) subunits $\alpha$ and ${\beta}$ are transcribed from different genes and associate noncovalently to form the bioactive eCG heterodimer. Dimerization is rate limiting for eCG secretion, and dissociation leads to hormone inactivation. The correct conformation of the heterodimer is alto important for efficient secretion, hormone-specific post-translational modifications, receptor binding and signal transduction. To determine whether ${\alpha}$ and ${\beta}$ subunits can be synthesized as a single polypeptide chain (tethered-eCG) and also display biological activity, the tethered-eCG molecule by fusing the carboxyl terminus of the eCG ${\beta}$-subunit to the amino terminus of the af-subunit was construe-ted and transfected into chinese hamster ovary (CHO-Kl) cells. LH- and FSH-like activities were assayed in terms of testosterone production and aromatase activity in primary cultured rat Leydig cells and granulosa cells, respectively. The tethered-eCG was efficiently secreted and showed similar LH-like activity to the dimeric eCG ${\alpha}$/${\beta}$ and native eCG. FSH-like activity of the tethered-eCG was also shown similarly in comparison with the native and wild type eCG ${\alpha}$/${\beta}$. Our data for the first time suggest that the tethered-eCG can be expressed efficiently and the produced product by the CHO-K1 cells is fully LH- and FSH-like activities in rat in vitro bioassay system. Our results also suggest that this molecular can imply particular models of FSH-like activity not LH-like activity in the eCG. Taken together, these data indicate that the constructs of tethered molecule will be useful in the study of mutants that affect subunit association and/or secretion.
Bacillu circulans F-2를 포함한 B.circulans의 prophage와 bacteriocin을 검출하기 위하여, mitomycin C를 처리하고 전자현미경상, plaque 형성능(plaque-forming activity), 세균세포살균능(killing activtiy)을 실험했다. killing activity 양성균으로부터 서당밀도균배원심(sucrose gradient centrifugation)을 통해 bacteriophage-like particle의 존재를 확인하였다. 이들 입자들은 형태학적으로 phage tail 또는 T4 phage와 닮은 구조를 가지고 있었다.
This study examined the antioxidant activity of methanol and water extracts from Orostachys japonicus A. Berger according to harvest times, by measuring electron donating ability(EDA), reducing power, superoxide dismutase(SOD)-like activity, thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) and antioxidant activity within a linoleic acid emulsion. EDA increased proportionally with the extract concentration and the methanol extract had slightly stronger effects than the water extract. And reducing power and SOD-like activity were highest in the methanol extract. Overall, based on the data, the methanol extract of O. japonicus A. Berger harvested during $August{\sim}October$ presented the highest level of antioxidative activity and may be a good candidate as a natural antioxidant source.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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