Adenylate kinase-like activity and phosphotransferase-like activity from $F_1$-ATPase of Escherichia coli was revealed by $^{31}P$ NMR spectroscopy. Incubation of F1-ATPase with ADP in the presence of $Mg^{2+}$ shows the appearance of $^{31}P$ resonances from AMP and Pi, suggesting generation of AMP and ATP by adenylate kinase-like activity and the subsequent hydrolysis to Pi. Incubation of $F_1$-ATPase with ADP in the presence of methanol shows additional peak from methyl phosphate, suggesting phosphotransferase-like activity of $F_1$-ATPase. Both adenylate kinase-like activity and phosphotransferase-like activity has not been reported from $F_1$-ATPase of Escherichia coli. $^{31}P$ NMR could be a valuable tool for the investigation of phosphorous related enzyme.
In order to determine the relationship between probing pocket depth and trypsin-like activity in subgingival plaque, probing pocket depth and loss of attachment were measured by Michigan-O probe on mandibular incisors of 30 patients with adult periodontitis. And the trypsin-like activity of Treponema denticola, Porphyromonas gingivalis, and Bacteroides forsythus was evaluated by the hydrolysis of N-Benzoyl-DL-Arginine-2-Naphthyla-mide (BANA) using PerioScan reagent cards(Oral-B Laboratories, Redwood City, CA). The obtained data were statistically analyzed by Microstat program. The results were as follows. 1. The number of teeth showing negative trypsin-like activity was more in shallow periodontal pocket groups, but the number of teeth showing positive trypsin-like activity was more in deep periodontal pocket groups. 2. There was a significant positive correlation between probing pocket depth and trypsin-like activity in subgingival plaque(y=0.413X - 0.955, r = 0.7024, p<0.001). 3. There was no consistent relationship between loss of attachment and trypsin-like activity in subgingival plaque(p>0.01).
I evaluated the protective effect of N-methyl-D-aspartate (NMDA)/glycine receptor antagonist, 7-chlorokinurenic acid (CKA) on cultured mouse astrocytes damaged by ischemia-like condition (ILC). The protective effect of CKA was assessed by cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) activity, superoxide dismutase (SOD)-like activity and lipid peroxidation. To examine the effect of CKA on the cell apoptosis, the expression and the activity of caspase 3 were assessed by Western blotting. CKA increased the cell viability decreased by ILC. CKA also decreased the LDH activity and antioxidative effects such as SOD-like activity and inhibitory activity of lipid peroxidation. In addition, CKA suppressed the expression of caspase 3 associated with apoptosis, and increased the cell viability by the decrease of caspase 3 activity as like the caspase 3 inhibitor, Av-DVED-MED. From these results, these results suggest that ILS induces cell cytotoxicity in cultured astrocytes and CKA, NMDA/glycine receptor antagonist, is effective on the prevention of the cytotoxicity due to ILS by the antioxidative effect and the inhibition of apoptosis.
This experiment was conducted to identify the effect of several plant growth retardants on endogenous ABA-like substance content and GA-like substance activity in seedlings of Sedirea japonica cultured in vitro. When seedlings of Sedirea japonica were treated with low concentration of 0.05 mg/L Uniconazole, 0.1 mg/L Ancymidol and 0.3 mg/L Paclobutrazol, the content of ABA-like substances of the leaf was lower than that of the control. However, the activity of GA-like substances was similar or higher in treated seedlings. In the mid and high concentrations of three kinds of growth retardants, the ABA-like substance content was increased, but GA-like substance activity was inhibited. The content of ABA-like substances in the root was lower in 0.05 and 0.2 mg/L Uniconazole, 0.2 mg/L Ancymidol and 0.1 mg/L Paclobutrazol treatments than that of the control, but in the mid and high concentration treatments, the content was increased. GA-like substance activity in low concentration was increased but in the mid and high concentration, the activity was inhibited compared with low concentration treatment.
Superoxide dismutase (SOD)-like activities of sixteen kinds of fruits, vegetable juice and commercial concentrates were measured by pyrogallol autoxidation method. The changes in SOD-like activity by heat treatment and the increase in SOD-like activity of apple juice mixed with fruits and vegetables were investigated. SOD-like activity of broccoli juice was 41.7%, the highest value among tested sample. SOD-like activities of strawberry juice, carrot concentrate, kiwi juice, radish juice and apple juice were 30.2, 30.0, 27.6, 26.7, 24.1 and 14.6%, respectively. SOD-like activity was increased generally after heat treatment at $95^{\circ}C$ until 20 min. SOD-like activity of apple juice was increased $20{\sim}35%$ by mixing with 20% of carrot concentrate, kiwi juice, strawberry juice, broccoli juice, respectively and particularly was increased 48% by mixing with 20% of raddish juice.
Growth and activities of digestive enzymes in slime flounder (Microstomus achne) larvae were measured from hatching to near the end of larval development (day 58). Larvae reared under starved and fed conditions and the changes of acid phosphatase (ACPase) specific activity, alkaline phosphatase (ALPase) specific activity, trypsin-like enzyme activity and pepsin-like enzyme activity were described with growth and developmental stage of larvae. Total length of the starved larvae was gradually increased for 7 days post hatching and then almost unchanged. Total length of the fed larvae ranged from 5.13$\pm$0.178 mm at the day of hatching to 13.43$\pm$1.395 mm at 58 days after hatching. In starved group, dry body weight decreased from 0.l0$\pm$0.020 mg at the day of hatching to 0.05$\pm$0.012 mg at 12 days after hatching. Dry body weight of fed larvae decreased during the prelarva stage like starved group and then gradually increased. ACPase and ALPase specific activity in the starved larvae increased until all larvae died, however those activities in the fed larvae increased until 20 days and then decreased until 58 days after hatching, with no significant difference between groups. Trypsin-like enzyme activity in the starved larvae was unchanged until 3 days and then was the highest on 5 days after hatching, but not detected after completion of yolksac absorption. Those of fed larvae decreased until 3 days and sharply increased until completion of yolksac absorption. The highest trypsin-like enzyme activity in the fed group was observed at 20 days after hatching. Trypsin-like enzyme activity in the fed larvae was significantly higher than that in the starved larvae from 8 days after hatching. Pepsin-like enzyme activity was increased in 5 days after hatching in both groups. There was significant difference at 8 and 10 days after hatching between both groups. Based on above results, digestive enzyme activities were correspondingly changed to a growth and morphological transformation. Trypsin-like enzyme and pepsin-like enzyme activities are able to be a useful indices for health and growth status in larval slime flounder, because there was significant difference in digestive enzyme activities with developmental stages, growth or feed supply.
The activity of endogenous cytokinin-like substance in dormant plants(Fragaria ananassa) was different depending on the degree of dormancy and their activity was showed the similar trend as that of growth phase. When strawberry plant crowns were extracted in methyl alcohol, and the extract was seperated by column chromatography, it showed that the activity was observed in two places by soybean callus bioassay. Activity of cytokinin-like substance was appeared when ethyl acetate/methyl alcohol (90/10v. and 50/50v.) were used. In relation to growth phase of strawberry plants, cytokinin-like activity increased at vigorous growth periods, whereas decreased in deep dormant period. However, cytokinin-like substance activity occurred again after strawberry plants passed through a certain chilling periods. Accordingly, it showed to have a negative correlation between the degree of dormancy and a mount of endogenous cytokinin-like substance.
The equine chorionic gonadotropin (eCG) subunits $\alpha$ and ${\beta}$ are transcribed from different genes and associate noncovalently to form the bioactive eCG heterodimer. Dimerization is rate limiting for eCG secretion, and dissociation leads to hormone inactivation. The correct conformation of the heterodimer is alto important for efficient secretion, hormone-specific post-translational modifications, receptor binding and signal transduction. To determine whether ${\alpha}$ and ${\beta}$ subunits can be synthesized as a single polypeptide chain (tethered-eCG) and also display biological activity, the tethered-eCG molecule by fusing the carboxyl terminus of the eCG ${\beta}$-subunit to the amino terminus of the af-subunit was construe-ted and transfected into chinese hamster ovary (CHO-Kl) cells. LH- and FSH-like activities were assayed in terms of testosterone production and aromatase activity in primary cultured rat Leydig cells and granulosa cells, respectively. The tethered-eCG was efficiently secreted and showed similar LH-like activity to the dimeric eCG ${\alpha}$/${\beta}$ and native eCG. FSH-like activity of the tethered-eCG was also shown similarly in comparison with the native and wild type eCG ${\alpha}$/${\beta}$. Our data for the first time suggest that the tethered-eCG can be expressed efficiently and the produced product by the CHO-K1 cells is fully LH- and FSH-like activities in rat in vitro bioassay system. Our results also suggest that this molecular can imply particular models of FSH-like activity not LH-like activity in the eCG. Taken together, these data indicate that the constructs of tethered molecule will be useful in the study of mutants that affect subunit association and/or secretion.
To detect prophages and bacterioeins, twenty strains of Bacillus circulans were treated with mitomycin C. The resulted lysates were subjected to electron microscopy, and also examined for killing and plaque-forming activities. Fifteen strains showed killing activity on two or more strains of Bacillue circulans. Killing agents were centrifuged in linear 5 to 20% sucrose gradient, and studied with electron microscopy which revealed the presence of particles.They looked morphologically like phage tail of 190 nm long with fiber (FA9, FA5) or without fiber (FA1, FA6), T even phage-like particle with a head of 50 nm in diameter and a tail of 140 nm long (FA7), or T7 phage-like particle with a head of 70 nm in diameter and a tail of 20 nm long (FA17). The killing agent of FA17 showed phage-forming activity on several strains different from killing sensitive strains of Bacillus circulans.
This study examined the antioxidant activity of methanol and water extracts from Orostachys japonicus A. Berger according to harvest times, by measuring electron donating ability(EDA), reducing power, superoxide dismutase(SOD)-like activity, thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) and antioxidant activity within a linoleic acid emulsion. EDA increased proportionally with the extract concentration and the methanol extract had slightly stronger effects than the water extract. And reducing power and SOD-like activity were highest in the methanol extract. Overall, based on the data, the methanol extract of O. japonicus A. Berger harvested during $August{\sim}October$ presented the highest level of antioxidative activity and may be a good candidate as a natural antioxidant source.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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