Simple, reproducible, high frequency, improved plant regeneration protocol in Eastern Cottonwood (Populus deltoides) clones, WIMCO199 and L34, has been reported. Initially, aseptic cultures established from axillary buds of nodal segments from mature plus trees on MS liquid medium supplemented with $0.25mg\;1^{-1}$ KIN and $0.25mg\;1^{-1}$ IAA. Nodal and internodal segments were found to be extra-prolific over shoot apices during course of aseptic culture establishment, while $0.25mg\;1^{-1}$ KIN concentration played a stimulatory role in high frequency plant regeneration. Diverse explants, such as various leaf segments, internodes, and roots from in vitro raised cultures, were employed. Direct plant regeneration was at high frequency of 92% in internodes, 88% in leaf segments, and 43% in root segments. This led to the formation of multiple shoot clusters on established culture media with rapid proliferation rates. Many-fold enhanced shoot elongation and growth of the clusters could be achieved on liquid MS medium supplemented with borosilicate glass beads, which offer physical support for proliferating shoots leading to faster growth in comparison to semi-solid agar or direct liquid medium. SEM examination of initial cultures confirmed direct plant regeneration events without intervening calli. In vitro regenerated plants induced roots on half-strength MS medium with $0.15mg\;1^{-1}$ IAA. Rooted 5- to 6-week-old in vitro regenerated plants were transferred into a transgenic greenhouse in pots containing 1:1 mixture of vermicompost and soil at $27{\pm}2^{\circ}C$ for hardening and acclimatization. 14- to 15-week-old well-established hardened plants were transplanted to the field and grown to maturity. The mature in vitro raised poplar trees exhibited a high survival rate of 85%; 4-year-old healthy trees attained an average height of 8 m and an average trunk diameter of 25 cm and have performed well under field conditions. The regeneration protocol presented here will be very useful for undertaking genetic manipulation, providing a value addition to Eastern Cottonwood propagation in future.
Climatic condition and seeding depth affect the seedling stand and early growth in the direct-seeded rice cultivation on dry soil. This experiment was conducted to elucidate the effects of the day /night temperatures and the seeding depths on the seedling emergence and mesocotyl elongation of rice seed. Three combinations of the day/night temperatures(25/2$0^{\circ}C$ 20/15$^{\circ}C$ and 20/1$0^{\circ}C$) were employed with seeding depths 1, 3, 5 and 7cm at the Phytotron of the Crop Experiment Station in 1991. It appeared that seedling emergence ratio increased and days to seedling emergence decreased in the high temperature (25/2$0^{\circ}C$) and the deep seeding depth (5 and 7cm) condition. The seedling emergence ratio did not. show the, difference up . to the seeding depths of 3cm and below, but the ratio decreased from the seeding depths of 5cm and above. Plant height and leaf number were almost the same up to the depths of 3cm at 30 days after seeding, but those of the seeding depths of 5cm and 7cm were remarkably reduced in all temperature combinations. Mesocotyl and lower internode elongation were seen in the high temperature(25/2$0^{\circ}C$) with the seeding depths of 5cm and 7cm. In the seeding depth of 6cm, of the tested varieties, Tamjinbyeo and Odaebyeo showed the highest emergence ratio. Generally, leaves of all tested varieties appeared approximately in the soil depth of 3cm, so the reasonable seeding depth will be around 3cm in the direct-seeded cultivation on dry soil.
An efficient regeneration system was developed using leaf, petiole, and internode explants. Highly embryogenic callus was obtained following cultivation on MS basal nutrient supplemented with 2 $mg/{\ell}$ 2,4-D. Globular, heart, torpedo and cotyledon shaped somatic embryo were produced from the surface of embryogenic callus. Direct shoot regeneration without intermediate callus formation has been achieved on MS medium supplemented NAA and BAP. The percentage of response varies with different concentration of auxin and cytokinin treated individually or in combination. The best shoot regeneration response (54.28%) and number of shoot per explant (12.67) were achieved on the medium supplemented with 0.1 $mg/{\ell}$ NAA and 1 $mg/{\ell}$ BAP. The regenerated shoot transformed into young plant when cultured into elongation and root induction medium. More than 90% of in vitro propagated plants could survive when transferred to the greenhouse for acclimation. This optimized regeneration system can be used for rapid shoot proliferation and genetic transformation.
Park, Min-Hee;Boo, Hee-Ock;Kim, Hong-Sub;Lee, Sook-Young
Plant Resources
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v.3
no.3
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pp.163-172
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2000
We compared microstructural features of the ordered cell and disordered leaves in Citrus junos Sieb. by electron microscopy. In the cell of the ordered leaves, many chloroplasts and large vacuoles were particularly observed. Also a lot of vessel, companion cell and big nucleus were presented in vascular bundle regions. The mitochondria and the other organelles were interspersed among the chloroplasts in a thin, peripheral layer of cytoplasm. The chloroplast possessed typical grana and intergranal lamellae, numerous starch grains and a few small osmophilic globules. Besides, microbodies were closely associated with the mitochondria and the chloroplast. The process of the formation of the secondary cell wall from primary cell wall was observed the vessel elements, the tonoplast wall and the secondary cell wall. It was observed that the oil sac with the unique perfume distributed the adjacent cell wall. In the cell of disordered leaves, the all of the organelles were thrust toward the cell wall due to the fusion of vacuoles in the cells. It was observed that a lot of the very small particles spreaded in the cytoplasm. The loss of unique perfume of the leaves was resulted in the destruction of the oil sac. Also, there was not observed grana, lamellae, starch and osmophillic globules in the chloroplast. The small distributed organelles was not observed but the elongation of the cell wall was proceed no longer. Therefore, the plasma membrane diverged from the cell wall. All of organelles in the cell had poor function and deformation. A massive vacuole was fulfilled in single cell and the vacuole contains a lot of large and small particles. The organelles were presented on the side of the cell wall according to the enlargement of vacuole and they were observed to be breakdown.
Cotyledonary somatic embryos after being cultured in a liquid MS medium for 1 week were subcultured on a solid MS medium and then the embryos germinated at a rate of 92%, but the rate was lowered by extending the culture period of the embryos on a liquid medium: 26% germination on a liquid medium culture for 4 weeks. Somatic embryos subcultured on the liquid medium showed the normal elongation of hypocotyl and radicle but in part showed secondary embryogenesis on hypocotyl and callus formation on and around the root-hypocotyl juncture. Through observation of scanning electron microscope, apical meristem in plumule showed the loose arrangement of cells, and abnormal leaf primordium formation and growth arrest of the primordium or no leaf primordium formation. Therefore, it is suggested that the germination arrest of carrot somatic embryos on liquid medium culture is due to the structural abnormality of the apical meristem in plumule.
In order to observe the differences of several characters related to earliness, seven barley varieties were tested under two different photoperiodic conditions. Final leaf number per main stem under long day did not vary among varieties, but ranged 6 to 7 in early group and 9 to 10 in late group under shortday. Shoot apex of early varieties, Jogangbori and Oweolbori reached to X stage at 24 days, but that of late variety, CI 15446 did to X stag at 32 days after transplanting under short day. Spike length reached to maximum length at 39 days in early group, but at 51 days in late group. Saeolbori, CI 15446 and Hangmi were photo-sensitive, but Jogangbori and Oweolbori were photo-insensitive. Therefore, the photoperiodic response to short day was most responsible to heading time. Those results showed that early heading varieties had the characteristics with less variation of final leaves, less retardation of shoot apex development and spike elongation, and shorter period to flag leaf emergence under short day.
Among the environmental conditions employed in micropropagation, light quality plays an important role in growth, specially morphogenesis and photosynthesis. The effect of radiation quality (350-740 nm) on the development and growth of zygotic embryos and in vitro plantlets of open-pollinated chestnut (Castanea crenata S. et Z.) were studied. Two types of explants were exposed for 4 weeks to cool white (W, as control), monochromatic red (R, peak emission 650 nm), monochromatic blue (B, peak emission 440 nm), red+blue (R+B, 1:1), or red+far-red (R+Fr, 1:1, far-red peak emission 720 nm) radiation from a light-emitting-diode (LED) system. While the zygotic embryos showed positive photoblastic behavior, their germination was inhibited by blue radiation. Hypocotyl elongation and root development were promoted by red radiation. The emergence of primary leaf and its expansion were faster under blue than under red radiation. In the plantlets, red and red+far-red radiation significantly increased the formation and growth of the root, whereas blue light reduced rooting. Therefore, radiation quality appears to influence some steps in the development of zygotic embryos and plantlets in the chestnut.
Park, Sangkyu;Kim, Seung-Han;Back, Chang-Gi;Lee, Seung-Yeol;Kang, In-Kyu;Jung, Hee-Young
Research in Plant Disease
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v.22
no.2
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pp.116-121
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2016
In 2015, stem blight of Rubus crataegifolius was observed in Pohang, Korea. The symptoms began as dark red spots in the stem, which led to stem blight, then leaf blight, and eventually resulted in death. A fungal isolate was obtained from a symptomatic stem and incubated on a potato dextrose agar plate. The isolated fungus produced white, cloudy mycelia turned black in 3 days. Based on the morphological characteristics, the causal fungus was assumed to be Botryosphaeria sp. A pathogenicity test was conducted according to Koch's postulates. To identify the causal agent, the combined sequence of the internal transcribed spacer, ${\beta}$-tubulin, and translation elongation factor $1{\alpha}$ genes were used for phylogenetic analysis. Approximately 1,200 bp of the combined sequence clearly suggested that the isolated pathogen was Botryosphaeria parva. This is the first report on stem blight in R. crataegifolius caused by B. parva in Korea.
This study was performed to investigate the effect of light quality on evapotranspiration and graft-taking characteristics of watermelon grafted seedlings using blue, red and far-red light-emitting diodes (LED). At initial stage of graft-taking, blue light increased the evapotranspiration rate (EVTR) of grafted seedlings as compared to effects of red and far-red on EVTR of grafted seedlings. Grafted seedlings graft-taken under red and blue LED showed the high graft-taking of 100% and 96%, respectively. However, grafted seedlings graft-taken under far-red LED showed the graft-taking of 80% and survival of 60% with low seedlings quality after hardening. The stem of grafted seedlings graft-taken under red light was elongated but blue light suppressed the stem elongation. The leaf area of grafted seedlings graft-taken under red light was increased. It is concluded that the effect of light quality using LED on graft-taking of watermelon grafted seedlings was significantly recognized. Considering the duration of quality of grafted seedlings graft-taken under artificial lighting, LED could be used as an effective lighting sources to validate the continuance of seedling quality.
Nitric oxide (NO) has been shown to be involved in diverse physiological processes in microbes, animals and plants. In this study, the involvement of NO in the development and possible roles in oxidative stress protection of Chinese cabbage (Brassica rapa subsp. pekinensis cv. Samrack-ulgari) seedlings were investigated. Exogenous application of sodium nitroprusside (SNP) retarded root elongation, while increasing lateral root formation of Chinese cabbage. Plants showed no signs of external stress due to SNP application in true leaves. Cotyledons of 3-week-old Chinese cabbage plants were found to be highly sensitive to SNP application. Treated cotyledons displayed rapid tissue collapse and associated cell death. Although SNP application reduced root growth under normal growth conditions, it also enhanced methyl viologen (MV)-mediated oxidative stress tolerance. Analysis of SNP application to Chinese cabbage leaf disks, revealed SNP-induced tolerance against oxidative stresses by MV and $H_2O_2$, and evidence includes prevention of chlorophyll loss, superoxide anion (${O_2}^-$) accumulation and lipid peroxidation. This report supports a role for nitric oxide in modulating early seedling development, programmed cell death and stress tolerance in Chinese cabbage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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