Rhizoctonia solani AG2-2에 의해 발생되는 잔디 갈색퍼짐병(large patch)은 한국잔디로 식재된 골프장 페어웨이에서 문제가 되는 대표적 병해이다. 본 연구에서는 잔디 갈색퍼짐병의 생물학적 방제법에 이용할 수 있는 길항 미생물을 R. solani AG2-2에 대한 항균활성과 균사생장 억제율 등을 기준으로 1차 선발하였고, 선발된 길항미생물에 대해 폿트 수준의 생물검정실험을 실시하였다. 두 실험을 통해 선발된 길항미생물 중에서 상대적 길항효과 지수(RPI) 값을 기준으로 잔디 갈색퍼짐병에 대해 가장 우수한 것으로 최종 선발된 길항미생물 CJ-9는 동정한 결과 Bacillus subtilis로 밝혀져, B. subtilis CJ-9이라 명명하였다. B. subtilis CJ-9는 합성농약에 대한 내성 실험을 통해 현장에 적용시 화학 농약과의 혼용이 가능함을 밝혔다. 골프장에서 야외 포장시험을 실시한 결과, 실험 기간동안 합성농약에 의한 관행처리구에서 잔디 갈색퍼짐병이 2차례 발병된 것과 비교하여 B. subtilis CJ-9를 처리한 시험구에서는 전혀 발생하지 않아 방제 효과가 인정되었다. 선택배지를 이용한 병원균 밀도 조사를 통하여 B. subtilis CJ-9 처리가 잔디 갈색퍼짐병을 일으키는 병원균의 밀도를 감소시키는 것을 확인하였다. 따라서 B. subtilis CJ-9이 잔디 갈색퍼짐병 방제를 위해 합성농약을 대체할 수 있는 친환경적인 방제방법이 될 수 있음을 입증하였다.
Rhizoctonia oryzae, R. oryzae-sativae 및 R. solani의 균사융합군의 각 균주에 대한 배양특성과 creeping bentgrass 및 들잔디에 대한 병원성과 살균제의 효과에 대하여 조사하였던 바 다음과 같다. 1. 균사생육에 미치는 온도의 영향을 보면 네가지 형으로 나눌 수 있는데, R. oryzae와 R. oryzae-sativae는 생육적온이 $30~35^{\circ}C$인 호고온형이었고, R. solani의 균사융합군의 각 균주도 세가지 형으로 나뉘었는데, 즉 생육적온이 $25~30^{\circ}C$인 고온형, 20~25$^{\circ}C$인 중간형 및 $20^{\circ}C$인 저온형이었다. 2. 접종실험에서 creeping bentgrass에 대해서는 R. oryzae와 R. solani의 AG-1( I A), AG-1( I B), bentgrass분리균 및 벼 분리균이 강한 병원성을 나타냈고, 그 다음으로 AG-2-1, AG-4, AG-5 및 AG-2-2가 중 또는 약한 병원성을 나타냈다. 들잔디에 대해서는 R. oryzae와 R. solani의 들잔디 분리균이 강한 병원성을 나타냈고 AG-1( I B)와 AG-5가 중정도의 병원성을 나타냈다. 3. 살균제의 효과는 creeping bentgrass의 brown patch병과 들잔디의 large patch병에 대해서 capro와 mytan등이 가장 좋았고 brown patch병에 대해서는 thiopan과 pencycuron이, large patch병에 대해서는 tolos와 thiopan이 각각 그 다음으로 좋았다.
Effect of an antagonistic bacterium AF-2001, Pseudomonas cepacia, on control of turfgrass diseases as brown patch, Pythium blight, dollar spot, and large patch were evaluated in vitro and in vivo. Results obtained in this study are summarized as follows. 1. Pseudomonas cepacia AF-2001 showed antagonism against to the pathogens causing brown patch, Pythium blighe, dollar spot and large patch. Especially, the biological agent showed strong antagonistic effect on the causal pathogens of brown patch, dollar spot, and anthracnose, but weak on Pythium blight 2. Populotion density of P. cepacia AR-2001 decreased ra;idly in turfgrass soils. Initial population of the agent was 2.4$\times$107 cfu/g soil, however, decreased to 1.4$\times$103, 6$\times$102 and 0 cfu/g soil on 10, 20, and 30 days after application, respectively. 3. Under the controlled controlled conditions of $27^{\circ}C$ and 95% RH, P. cepacia AR-2001 showed 100% control efficacy on brown patch either by pre-treatment or post-treatment of infection. However, Pythium blight was controlled about 94% by pre-treatment and only 29% by post-treatment 4. In field trials, P. cepacia AF-2001 did not suppress large patch and the control efficacy on other turfgrass diseases was lower than agro-chemicals such as tebuconazole and metalaxyl. Control efficacy of brown patch, Pythium and dollar spot by the biological agent was 57.4%, 40.4%, 61.5~87%, respectively. 5. Growth, color and texture of creeping bentgrass were not differ significantly between AF-2001 treatment and untreated control.
A large patch disease caused by Rhizoctonia solani AG2-2(IV) is a serious problem in turfgrass sites including golf courses and sports fields in Korea. The objectives of this study were to isolate some antagonistic microorganisms and to explain some involving mechanisms. Initially single colonies which were formed from the filtrates of various soil samples were obtained from LB culture and then co-cultured with R.solani AG2-2(IV) on PDA plate to explore some antagonistic microbes against for large patch fungus, Rhizoctonia solani AG2-2(IV). Out of total 82 antagonistic isolates which commonly had inhibition effect on Rhizoctonia solani AG2-2(IV) mycelial growth, one candidate (YPIN22) showed the most antifungal effect, which was confirmed by the longest distance from the edge of bacterial colony to the mycelial edge of the Rhizoctonia solani AG2-2(IV) in the dual culture. A succeeding investigation was to test any potential effect of the isolate on growth inhibition of 5 other turfgrass pathogens including R. solani solani AG2-2(IIIB), P. ultimum, C. caudatum, C. lunata, and F.oxysporum. Preliminary result indicated that the new isolate YPIN22 was also found to have antagonistic potential on the growth inhibition of those turfgrass pathogenic fungi, which was explained by inhibition zones ranging from 8 to 22mm. A further explanation of some characteristics of the isolate YPIN22 will be discussed in detail.
2015년 6월 초순, 한지형 잔디인 Kentucky bluegrass "Midnight II" 품종이 식재된 서울시 소재 잔디밭에서 잎마름 증상, 뿌리썩음 증상 및 개구리 눈 모양의 전형적인 summer patch 병징이 관찰되었다. 병원균의 정확한 동정을 위해 이병 잎과 뿌리에서 병원균을 분리하고, 배양학적 및 균학적 특징과 분자마커를 이용한 계통학적 유연관계 분석을 실시하였다. 그 결과, 분리된 병원균은 배양 10일 후 약 50~60 mm 가량 생장하였고, 균사는 회백색을 띄며 중앙부터 황록색 혹은 갈색으로 변색되었다. 경자(phialides)의 경우, 그 유사조직이 주로 균사의 말단에서 관찰되었으나, 분생포자는 관찰되지 않았다. 분리된 병원균의 정확한 동정과 계통학적 유연관계 분석을 위하여, large subunit (LSU)와 RNA polymerase II large subunit (RPB1) 유전자를 증폭시킨 후 염기서열 분석을 진행하고 계통학적 유연관계를 분석하였다. 그 결과, 분리된 병원균은 Magnaporthiopsis poae M47 균주와 가장 근연한 관계에 있는 것으로 확인되었다. 또한 potato dextrose agar (PDA) 배지에서 배양된 병원균을 멸균된 메스로 잘라 동일한 품종의 잔디에 접종한 결과, 약 20일 후 잎마름 증상을 확인할 수 있었다. 따라서 본 연구에서는 국내 Kentucky bluegrass에 summer patch병을 일으키는 원인균을 Magnaporthiopsis poae로 보고하고, 위 병원균에 의한 한지형 잔디의 병징을 여름잎마름병으로 제안하고자 한다.
This study was undertaken to find a new formulation of soil amendment, and selection of antogonists and to effectively control brown and large patch of turfgrasses caused by Rhizoctoniz solani AG1-1 and AG 2-2. Fourteen inorgainc chemicals (1%, w/w) were added individually in vitro, and some chemicals showed suppressiveness to R. solani. Alum suppressed effectively mycelial growth of R. solani in the range of 17 to 77% as compared with control. The four chemicals such as Al2(SO4)3, alum, CaO, and NH4NO3 were finally selected. Out of three organic compounds, composted pine bark (CPB) showed prominent suppressive effect as compared with milled alfalfa and pine leaves. After inoculation of R. solani isolates AG-1 and AG2-2 on the turf seedlings, water soaked lesions and blight symptoms were developed on the whole seedlings. According to inhibition zone method, mycelial growth of the fungus were greatly suppressed by culture filterates of the antagonists, Gliocladium virens (Gl1-) and Pseudomonas sp. (P713). CPB soil amendment mixed with antagonists (1% w/w) controlled not only brown and large patch of turfgrasses, but also promote the good growth of the seedlings. In addition, the controlling effect was maintained more than 30 days. Especially, the controlling effect of two antagonists was similar to Cㅖㅠ soil amendment with the antagonists and also stimulated a favorable growth of the seedlings. Therefore, its is expected that continuous control of Rhizoctonia blight of turfgrasses can be obtained in field by subsequent applications of the antagonists.
가축분뇨액비의 토양전염성 잔디병해들의 억제능력을 알아보고자 군위, 논산, 무안, 여주, 이천, 익산, 합천, 횡성 등 8개 지역의 가축분뇨액비생산시설에서 생산된 액비를 이용하여 기내에서 수행하였다. 가축분뇨액비와 병원균주들과의 대치배양을 통해 총 110종의 길항미생물을 선발하였으며, 각 병원균주별로 길항능력이 우수한 한 종씩을 선발하였다. 선발된 각각의 미생물은 16s rRNA 서열분석을 통해 brown patch에 길항력을 보인 ICIIIB60은 Alcaligenes sp., large patch에 길항력을 나타낸 GWIV70은 Bacillus licheniformis Ab2, dollar spot에 길항력을 보인 ISSH20은 B. subtilis C7-3으로 동정되었다. 이들의 최적배양조건은 NB 배지(ICIIIB60)와 TSB 배지(GWIV70, ISSH20)에서 온도는 $29.5^{\circ}C-31.4^{\circ}C$의 범위에서, pH는 6.5-7.3의 범위에서 잘 자라는 것으로 확인되었다. 또한 각 균주를 5종의 살균제와 혼용한 결과, ICIIIB60 균주는 테부코나졸 제제, GWIV70와 ISSH20 균주는 토클로포스메틸 제제에서 생존율이 높아 혼용처리가 가능할 것으로 판단되었다. 이러한 결과를 통해 가축분뇨액비는 비료로서의 역할뿐만이 아니라 잔디 병해를 줄일 수 있는 친환경적인 소재로 이용이 가능함을 확인하였다.
갈색퍼짐병은 한국잔디(Korean lawngrass)에 발병하는 병으로 골프장이나 재배지에서 심각하게 발생하는 것으로 알려져 있다. 갈색퍼짐병 방제를 위하여 주로 화학적 방제에 의존하고 있으며 이는 토양, 수질, 생물다양성에 문제를 일으킬 수 있다. 이에 따라 본 연구는 갈색퍼짐병 방제를 위하여 선발된 균주를 이용하여 균주의 근권정착 능력, 갈색퍼짐병 병원균 억제효과와 실제 골프장에 적용하여 병원균 밀도변화를 조사하였다. 실험실 내부에서 근권 정착력 평가를 통하여 선발된 S2, 5, 8과 12 균주의 근권정착 능력을 조사한 결과 4주차까지 $6log\;cfu\;g^{-1}$ 이상으로 생물적 방제 인자의 필수조건이라 할 수 있는 근권정착 능력이 우수한 것으로 나타났다. S2, 5, 8과 12 균주를 처리하여 병원균 밀도를 조사한 결과 S8 균주의 경우 1주차에 평균 0.7에서 4주차에는 1.2로 병원균 밀도 억제효과가 가장 좋은 것으로 나타났으며 갈색퍼짐병 방제효과 또한 S8 균주가 가장 우수한 것으로 나타났다. 갈색퍼짐병 방제효과가 가장 뛰어난 S8 균주를 이용하여 실제 골프장에서 갈색퍼짐병 병원균의 밀도 억제효과를 조사한 결과 S8 균주 처리구는 무처리구에 비하여 병원균의 밀도가 이쑤시개당 1.6 이상 낮게 검출되었으며 S8 균주 처리에 의하여 병원균 밀도 감소한 것으로 판단할 수 있다.
Recently, according to the various taste of consumers, the design of a product is changed variously and complicatedly. The complicated product is not usually constructed with one patch but multi-patch. By the way, in machining, higher precision and the reduction of leading and machining time is required. But for the multi-patch sculptured surface, the amount of machining data becomes large. This means the increase of leading and machining time. In this study, the tool path generation method with reparameterization is proposed for multi-patch sculptured surface and variable step size using NURBS is used to satisfy the precision and to reduce leading and machining time.
A continuous enrichment culture procedure was used to isolate bacteria from various soil sources capable of suppressing large patch disease of turfgrass. Six isolates consistently suppressed large patch in turfgrass, and ranged in the spectrum of extracellular enzymes that they expressed. The best disease- suppressing isolate, TBM912, expressed protease, CMCase, and pectinase activity and inhibited the growth of Rhizectonin solani and Betrytis cinerea in vitro. Here we show that this strain also produces an antibiotic that was identified by TLC, SDS-PACE and HPLC analysis as lipopeptide.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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