From fruiting bodies of L. edodes strain L-54, single-spore isolates (SSIs) were collected. Two parental types of L-54 were regenerated via monokaryotization. By means of random-amplified polymorphic DNA (RAPD), DNA samples from L-54, its two parental types, and 32 SSIs were amplified with arbitrary primers. Dedikaryotization was demonstrated, and 91 RAPD-based molecular markers were generated. RAPD markers that were segregated at a 1:1 ratio were used to construct a linkage map of L. edodes. This RAPD-linkage map greatly enhanced the mapping of other inheritable and stable markers [such as those that are linked to a phenotype (the mating type), a known gene (priA) and a sequenced DNA fragment (MAT)] with the aid of mating tests, bulked-segregant analysis, and PCR-single-strand conformational polymorphism. These markers comprised a genetic map of L. edodes with 14 linkage groups and a total length of 622.4 cM.
High-density lipoprotein (HDL) cholesterol levels are associated with decreased risk of coronary artery disease. Several genome-wide association studies (GWAS) for HDL cholesterol levels have implicated Lipoprotein lipase (LPL) as possibly being causal. Herein, the association between single nucleotide polymorphism (SNP) rs10503669 in the LPL gene and HDL cholesterol levels and triglyceride levels was tested in the Korean population. A total of 994 subjects from Seoul City were included in a replication study with LPL SNP rs10503669. SNP rs10503669 in the LPL gene was associated with mean HDL cholesterol levels (effect per allele 3.13 mg/dL, P<0.0001) and triglyceride levels (effect per allele -18.0 mg/dL, P=0.0026). Subjects with the CA/AA genotype had a 0.42-fold (range 0.23~0.77-fold) lower risk of having abnormal HDL cholesterol levels (<40 mg/dL) than subjects with the CC genotype. When analyzed by gender, the association of LPL was stronger in men than in women. This study clearly demonstrates that genetic variants in LPL influence HDL cholesterol levels and triglyceride levels in Korean adults.
The genetic status of somatic embryo-derived plantlets of Cymbopogon flexuosus was examined by randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis. Auxins such as 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) (1-4 mg/l) were used in Murashige and Skoog (MS) medium for induction of calli from rhizomatous explants of Cymbopogon flexuosus. Optimum calli were induced on MS medium supplemented with 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) (3.5 mg/l) alone or in combination with $N^6-benzyladenine$ (2 mg/l). Somatic embryogenesis was achieved from long term calli when cultured on MS medium containing 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) (2 mg/l) along with $N^6-benzyladenine$ (BA) (1-2 mg/l). Regeneration was achieved when freshly induced embryogenic calli were sub-cultured on MS medium supplemented with $N^6-benzyladenine$ (3 mg/l) alone. Long-term cultured embryos showed profuse minute rooting on regeneration medium supplemented with N6 -benzyladenine (3 mg/l). Microshoots were rooted in the presence of indole-butyric acid (IBA) (2 mg/l). DNA samples from the mother plant and 18 randomly selected regenerated plants from a single callus were subjected to RAPD analysis with 6 arbitrary decamer primers for the selection of putative somaclones. A total of 64 band positions were scored, out of which 19 RAPD bands were polymorphic. From genetic similarity coefficient based on RAPD band data sharing, it was found that the majority of the clones were almost identical or more than 92% similar to the mother plant, except CL2 and CL9 (66%) which showed highest degree of genetic change with CL2 and CL9 showing presence of two non-parental bands each.
The objectives of this study were to identify polymorphisms of insulin-like growth factor I (IGF-I) gene and to investigate their association with growth traits in Nanjiang Huang goats. Five hundred and ninety-two animals were used to detect the polymorphisms in the complete coding sequence, part of introns and the 5'-regulatory region of the IGF-I gene by means of PCR-SSCP. A new single nucleotide polymorphism (G to C transversion) was identified at intron 4 of the IGF-I gene in the goats. Two alleles and three genotypes were observed in this group. The frequency of G and C alleles was 54.6 and 45.4%, respectively. The statistical analysis showed that polymorphism of the IGF-I gene had a significant association (p<0.05) with birth weight (BW), body weight at 6 months (W6) and at 12 months (W12), heart girth at 2 months (G2), body length at 6 months (L6), wither height at 6 months (H6) and at 12 months (H12) and heart girth at 12 months (G12). The goats with genotype CC had significantly higher BW, W6, W12, G2, L6, H6, H12 and G12 than those with genotype GC and had significantly higher W12, H6, H12 and G12 than those with genotype GG. Therefore, genotype CC may be the most advantageous for growth traits in the Nanjiang Huang goat. However, no significant association between SNP genotypes and other growth traits was observed. These results indicated that the SNP marker of the IGF-I gene may be a potential molecular marker for growth traits in Nanjiang Huang goats.
본 연구에서는 국내에 유통되고 있는 40개 표고 품종들로부터 산백향과 설백향의 구분이 가능한 CAPS 마커를 개발하였다. 제한효소 Hha I 과 HpyCH4IV를 이용한 밴드 패턴 분석을 통해 각각 산백향과 설백향을 다른 균주들과 구분하여 구별성을 확보할 수 있었다. 본 연구에서 개발된 CAPS 마커는 표고의 품종들 간에 유전적 다양성을 부여함으로써, 품종을 보호할 수 있는 분자생물학적 근거가 될 수 있다. 이로써 향후 유전자원에 대한 국가간 분쟁을 미연에 방지할 수 있을 것이다.
Park, Chan-Woo;Han, Ae-Ra;Kim, Joanne-Kwak;Park, So-Yeon;Han, Jung-Yeol;Koong, Mi-Kyoung;Song, In-Ok;Yang, Kwang-Moon
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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제38권3호
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pp.168-173
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2011
Objective: To examine the association between methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) C677T polymorphism and hyperhomocysteinemia in women with unexplained recurrent miscarriages (RM) and to investigate the association between MTHFR genotype variants and alloimmune activation, proportion of peripheral blood natural killer (pbNK) cells. Methods: A total of 39 patients with a history of two or more unexplained miscarriages were recruited to this study. The controls were women who had a live birth without a history of RM (n=50). The proportion of pbNK cells was measured by flow cytometry. Plasma homocysteine levels and the incidence of the MTHFR variant of the RM and control groups were compared. The proportion of pbNK cells was compared to the MTHFR variants in the RM group. Results: No differences were found between the two groups' mean plasma homocysteine levels ($7.6{\pm}1.5{\mu}mol$/L vs. $7.1{\pm}2.1{\mu}mol$/L) or incidence of the MTHFR genotype variant (CC, 35% vs. 33%; CT, 40% vs. 53%; and TT, 25% vs. 14%). In the RM group, individuals with the TT variant ($7.7{\pm}1.1{\mu}mol$/L) had higher homocysteine levels than those with the CC and CT variants ($7.4{\pm}1.9{\mu}mol$/L and $7.4{\pm}1.2{\mu}mol$/L) and those with the CT variant ($19.2{\pm}8.1%$) had a higher proportion of CD3-/CD56+ pbNK cells than those with the CC and TT variants ($17.7{\pm}6.6%$ and $17.9{\pm}7.0%$), but the results of both comparisons were statistically insignificant. Conclusion: These preliminary results show no difference in plasma homocysteine levels between the RM and control groups or among MTHFR genotype variants in the RM group, which may suggest that the plasma homocysteine level is difficult to use as a predictive marker of RM in the Korean population. A study of a larger number of patients is needed.
The single nucleotide polymorphism (SNP) ss469415590 in the interferon lambda-4 (IFNL4) gene has recently been reported to have an association with treatment response in chronic hepatitis C. However, any importance of the SNP in association with response to pegylated interferon (PEG-IFN) therapy in patients with chronic hepatitis B (CHB) is unclear. We retrospectively analyzed data for Thai patients with CHB treated with PEG-IFN for 48 weeks. Virological response (VR) for HBeAg-positive CHB was defined as HBeAg seroconversion plus HBV DNA level <2,000 IU/mL at 24 weeks post-treatment. VR for HBeAg-negative CHB was defined as an HBV DNA level <2,000 IU/mL at 48 weeks. The SNP was identified by real time PCR using the TaqMan genotyping assay with MGB probes. A total 254 patients (107 HBeAg-positive and 147 HBeAg-negative) were enrolled in the study. The distribution of TT/TT, ${\Delta}G/TT$ and ${\Delta}G/{\Delta}G$ genotypes was 221 (87.0%), 32 (12.6%) and 1 (0.4%), respectively. Patients with non-TT/TT genotypes had significantly higher baseline HBV DNA levels than patients with the TT/TT genotype. In HBeAg-positive CHB, 41.2% of patients with TT/TT genotype versus 50.0% with non-TT/TT genotype achieved VR (P=0.593). In HBeAg-negative CHB, the corresponding figures were 40.3% and 43.5%, respectively (P=0.777). There was no significant correlation between the SNP genotypes and HBsAg clearance in both groups of patients. In summary, ss469415590 genotypes were not associated with response to PEG-IFN in Thai patients with HBeAg-positive and HBeAg-negative CHB.
Sull, Jae Woong;Yang, Seung-Ju;Kim, Soriul;Jee, Sun Ha
Genomics & Informatics
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제12권4호
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pp.231-235
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2014
Elevated serum uric acid levels are associated with a variety of adverse health outcomes, including gout, hypertension, diabetes mellitus, metabolic syndrome, and cardiovascular diseases. Several genome-wide association studies on uric acid levels have implicated the ATP-binding cassette, subfamily G, member 2 (ABCG2) gene as being possibly causal. We investigated an association between the single-nucleotide polymorphism (SNP) rs2725220 in the ABCG2 gene and uric acid levels in the Korean population. A total of 991 subjects in Seoul City were used for a replication study with ABCG2 SNP rs2725220. The rs2725220 SNP in the ABCG2 gene was associated with mean uric acid levels (effect per allele 0.25 mg/dL, p < 0.0001). Subjects with the GC/CC genotype had a 1.78-fold (range, 1.22- to 2.62-fold) higher risk of having abnormal uric acid levels (${\geq}7.0mg/dL$) than subjects with the GG genotype. When analyzed by gender, the association with ABCG2 was stronger in men than in women. The association with ABCG2 was much stronger in male subjects with body mass index (BMI) ${\geq}26.4$ (odds ratio, 5.09; 95% confidence interval, 2.41 to 10.8) than in male subjects with BMI < 26.4. This study clearly demonstrates that genetic variations in ABCG2 influence uric acid levels in Korean adults.
DNA-based molecular markers for differentiation of five penaeid shrimps (Penaeus monodon, P. semisulcatus, Feneropenaeus merguiensis, Litopenaeus vannamei and Marsupenaeus japonicus) were developed based on polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) and single-stranded conformation polymorphism (SSCP) of 16S ribosomal (r) DNA. Differentiation of P. monodon, P. semisulcatus and L. vannamei can be unambiguously carried out by PCR-RFLP of 16S $rDNA_{560}$ whereas P. semisulcatus and M. japonicus shared a BABB mitotype. These shrimps were successfully discriminated by SSCP analysis of 16S $rDNA_{560}$. Nevertheless, the amplification success for L. vannamei and F. merguiensis was not consistent when tested against larger sample sizes. As a result, 16S $rDNA_{560}$ of an individual representing the most common mitotype of each species was cloned and sequenced. The new primer pair was designed and tested against the large sample sizes (312 bp product, N = 185). The amplification success was consistent across all species. PCR-RFLP of 16S $rDNA_{312}$ was as effective as that of 16S $rDNA_{560}$. Differentiation of all shrimp species were successfully carried out by SSCP analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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