• 식물조직배양학회지
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• 제27권6호
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• pp.435-439
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• 2000

겨울 상추 품종인 청치마 상추의 자엽조직을 ${\gamma}$-TMT유전자가 도입된 A. tumefaciens LBA 4404와 공동배양한 후, 50 mg/L kanamycin, 500 mg/L carbenicillin, 0.1 mg/L NAA, 0.5mg/L BA가 첨가된 MS재분화 배지에 옮겨 약4주 배양하여 재분화된 신초를 얻었다. 재분화된 신초를 50 mg/L kanamycin, 250mg/L carbenicillin이 포함된 MS 기본 배지에 옮겨 발근된 소식물체를 얻었다. 선발된 형질전환 식물체의 genomic DNA에 대한 PCR분석과 Southern분석을 수행하여 애기장대 ${\gamma}$-TMT유전자 특이적 DNA단편이 상추의 genomic DNA내에 삽입되었음을 확인하였다. 선발된 상추 형질전환체 잎의 $\alpha$-tocopherol/${\gamma}$-tocopherol 함량 비율이 대조 식물체에 비하여 약 4배 증가하여 도입된 ${\gamma}$-TMT유전자가 안정적으로 발현함을 나타내었다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제30권4호
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• pp.335-339
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• 2003

pSK109를 포함하고 있는 Agrobacterium LBA4004을 통하여 국화 'Shuho-no-chikara'에 LEAFY 유전자을 도입하였다. 엽절편체의 생존율은 kanamycin 10mg/L가 첨가된 배지에서 생존율 약 22%, 절편체의 재분화율이 10%정도였다. 그러나 kanamycin 20mg/L가 첨가된 배지에서는 엽절편은 약 5%정도 생존하였으나 전혀 재분화가 나타나지 않았다. 따라서 kanamycin 10mg/L를 1차 선발배지로, 20mg/L를 2차 선발배지로 선발하였다. Agrobacterium LBA4404와 국화 엽절편체를 3일간 공동배양 하는 것이 형질전환에 효과적이었다. LEAFY유전자가 삽입된 pSK109 vector를 포함한 Agrobacterium LBA4404의 형질전환 효율은 2차 선발까지 약 2.8% 였으며, Southern blot한 결과 0.13%만이 형질 전환체로 확인되었다. 형질 전환체 한계통은 포장에서 약 1주일 정도 조기개화하였고 화형은 정상이었다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제19권5호
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• pp.433-438
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• 1991

Phenylalanine 고생산용 plasmid pSY130-14는 $\lambda$-phage 유래 온도감수성을 가지고 있으므로 $cI_{857}$ repressor와 PL과 PR을 온도를 올려 phenylalanine의 생산을 유도한다. pSY130-14를 갖는 E.coli AT2471은 kanamycin 무첨가, $38.5^{\circ}C$, 48시간에서 약 30%로 plasmid가 없어지며 첨가에서 안정성이 떨어졌다가 배양시간과 더불어 올라갔는데, 이것은 생육에 피요한 kanamycin gene과 ori만이 남는 것으로 생각된다.

• 한국가금학회지
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• 제7권1호
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• pp.53-64
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• 1980

A total of 1503 specimens were submitted to the Poultry Disease Diagnostic Service Laboratory during the year 1966 and 1978. The most frequently diagnosed diseases in order of prevalence were avian mycoplasmosis, staphylococcosis, colibacillosis, salmonellosis and pullorum disease, the percentages of the conditions being 24.6%, 20.0%, 18.0%, 12.6% and 6.4%, respectively, The drug resistance of pathogenic mirnoorganisms isolated during the year 1978 from chicken with colicabacillosis, staphylococcosis or salmonellosis were investigated by the use of disc diffusion technique, the results being as follow. 1) Drug resistance of 63 strains of Escherichia coli More than 95% of the strains tested were sensitive to colistin and gentamicin. The percentages of strains sensitive to kanamycin, chloramphenicol, ampicillin and nitrofurantoin were 66.7%, 60.3%, 60.3% and 47.6%, respectively. Majority of the strains were highly resistant to streptomycin and tetracyline. All the strains were resisistant to bacitracin lincomycin, oleandomycin, penicillin and erythromycin. All the strains tested were resistant to more than two among 10 drugs in common use such as penicillin, erythromycin, streptomycin, tetracycline, neomycin, chloramphenicol, kanamycin, ampicillin and gentamicin, and 27 different resistance patterns were noted. The most frequent multiple resistance pattern was PC, EM, SM and TC (11.1%). 2) Drug resistance of 48 strains of Salmonella More than 95% of the strains tested were sensitive to colistin, gentamicin ana ampicillin. The percentages of st rains sensitive to kanamycin, tetracycline, neomycin and nitrofurantoin were 81,3%, 79%, 72.9%, and 68.0% respectively. None of them was sensitive to streptomycin, oleandomycin, erythromycin, lincomycin and bacitracin. All the strains were resistant to more than one among 7 drugs in common use such as streptomycin, erythromycin, neomycin, tetracycline, kanamycin, ampicillin and gentamicin. The most frequent resistance pattern was SM and EM(66.7%). 3) Drug resistance of 54 strains of Staphylococci All the strains tested were sensitive to gentmaicin, kanamycin and cephalothin. Majority of them were highly sensitive to bacitracin, methicillin, nitrofurantoin and chloramphenicol. The Percentages of strains sensitive to streptomycin, ampicillin, lincomycin and tetracycline were 66.7%, 55.6%, 44.4% and 27.8%, respectively. Among them, 51 strains were resistant to more than one among 11 drugs in common use such as tetracycline, lincomycin, ampicillin, penicillin, streptomycin, erythromycin, neomycin, oleandomycin, chloramphenicol, methicillin and bacitracin, and thirty one different resistance patterns were noted.

• 식물조직배양학회지
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• 제25권3호
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• pp.201-206
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• 1998

Superoxide dismutase (SOD)를 많이 생산하는 신기능성 오이(Cucumis sativus L.) 과실을 개발하기 위하여, 발아 7일째의 자엽절편에 완두콩(Pisum sativum) 유래 MnSOD 유전자를 Agrobacterium tumefeciens LBA4404의 매개로 형질 전환시켰다. 1mg/L zeatin, 0.1mg/L IAA, 300mg/L claforan, 100mg/L kanamycin이 포함된 선발배지에서 부정아를 유도한 후, 1주일 간격으로 계대배양하면서 kanamycin 저항성 형질전환체를 선발하였다. 선발배지 배양 6주 후 kanamycin 저항성을 가진 부정아만을 절단하여 0.2mg/L NAA가 함유된 발근배지에 옮겨 뿌리를 유도한 후, 화분에서 순화시켰다. 소식물체의 잎에서 DNA를 분리하여 PCR 로 분석한 결과, 3개의 식물체에서 선발마커유전자인 NPTII 유전자가 존재함을 확인하여 SOD 유전자가 오이에 도입됨을 확인할 수 있었다. 이중 한 개체의 과실에서 SOD 함량이 무처리개체에 비해 약 3.2배 높았으며 native gel 전기영동에서 도입한 SOD isoenzyme 밴드가 강하게 검출되었다.

• 식물조직배양학회지
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• 제28권4호
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• pp.197-200
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• 2001

상추에 제초제 저항성을 도입하기 위해 상추 자엽 조직을 NPTII-GUS 및 제초제 저항성 유전자 (PAT)가 삽입된 A. tumefaciens MP 90과 2일간 공동배양한 다음 0.1 mg.L$^{-1}$ NAA, 1.0 mg.L$^{-1}$ 2ip, 50 mg.L$^{-1}$ kanamycin, 500 mg.L$^{-1}$ carbenicillin을 첨가한 MS배지에 배양하여 식물체를 재분화시켰다. 재분화 식물체는 kanamycin 내성 검정을 통해 NPTII 유전자의 도입과, PCR, Northern blot 분석을 통해 제초제 저항성 유전자가 식물체의 게놈상에 삽입된 형질전환체임이 확인되었다. 또한 1500배액의 농도로 Basta를 살포한 결과 살포 10일 후 대조 식물체는 완전히 고사하는 데 반해 형질전환체는 지속적인 생육을 보여 얻어진 형질전환 상추가 제초제 저항성 개체임이 확인되었다.

• 자연과학논문집
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• 제4권
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• pp.103-142
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• 1991

표식 유전자를 이용하여 체세포 잡종체를 선발하기 위한 연구의 일환으로 감자조직에는 T-DNA를 도입하여 식물호르몬 무첨가 배지에서도 생장가능한 형질전환체을 획득하고, 담배조직에는 NPT H gene을 도입하여 kanamycin에 대해서 저항성을 나타내는 형질전환체를 획득하여 각각의 특성구명과 원형질체를 유리하여 도입된 유전자 marker를 이용해서 융합을 시도한 바 그 결과는 다음과 같다. 1. 감자 괴경에서 Agrobacterium tumefaciens Ach5와 A. rhizogenes ATCC15834를 접종하여 crown gall tumor 및 hairy root를 유기하였으며 이러한 tumor조직은 식물 호르몬 무첨가 배지에서 생장이 가능하였다. 2. 감자에서 유기된 hairy root로부터 callus 형성은 2.4-D 2mg/1 첨가된 MS 배지에서 가장 양호하였으며 casein hydrolysate 1g/1가 첨가하면 유연 한 callus의 증식이 더욱 왕성하였다. 3. Activated charcoal이 0.5~2.0g/1 첨가된 배지에서는 crown gall tumor callus의 절단면이 갈변되는 것을 방지 할 수 있어 생존률을 높일 수 있었으나 hairy root에서는 갈변되어 고사되었다. 4. 2, 4-D 2mg/1와 casein hydrolysate 1g/1를 첨가한 배지에 hairy root callus를 현탁배의한 결과 양호한 많은 callus 덩어리들을 단시간에 얻을 수 있었다. 5. $Tri^-$parental mating으로 NPTII gene이 coding되어있는 binary vector인 pGA643을 wild type 및 disarmid된 Agrobacterium 내에 도입하여 Agrobacterium tumefaciens Ach5/pGA643, A.tumefaciens $A_4T$/pGA643, A. tumefaciens LBA4404/pGA643를 획득하였다. 이 세 개의 conjugant를 사용하여 0.7% agarose gel 상에서 pGA643을 확인하였다. 6. pGA643이 도입왼 Agrobacterium tumefaciens LBA4404와 담배 조직과 동시배양하여 kanamycin $100\mug$/ml 첨가된 배지에 생존하는 callus를 선발하였으며 동일배지에서 callus의 증식이 가능하였다. 7.형질전환된 담배 callus로부터 식물체 형성은 BA 2mg/1를 첨가한 배지에서 가능하였다. 8. 재분화된 담배의 엽조직은 kanamycin.이 $1000\mug$/ml 첨가된 MS 배지에서도 왕성히 callus가 유기되어, 이는 재분화체에서도 NPTII gene이 그대로 유지되고 있음을 확인할 수 있었다. 9. 담배의 정상 shoot와 형질전환된 shoot를 kanamycin이 $100\mug$/ml이 함유된 MS배지에 기내삽목한 결과, 정상 shoot는 발근이 되지 않고 황화 되었으나 형질전환된 shoot는 발근이되었으며 정상적으로 생장을 하였다. 10. 감자의 T-DNA가 도입된 현탁배양 callus는 cellulase 2%, macerozyme 2%, dricelase 1%에서 양호하게 유리되었다. 11. Osmoticum으로서 mannitol 농도 0.8M에서 담배와 감자의 두 조직 모두 원형질체유리가 가장 효과적이었다. 생존력은 T-DNA가 도입된 감자의 hairy root를 callus로 탈분화 시킨 후 현탁배양한 callus가 mannitol 0.5M에서 97%를 나타냈고, 그리고 NPTII gene이 도입된 담배의 엽조직은 mannitol 0.7M에서 94%로 최고를 타나냈다. 12. 원형질체 융합은 PEG solution 처리 15분 후부터 관찰되기 시작하여 20분에 완전히 융합되었고, 융합된 원형질체는 선발 marker인 호르몬 무첨가 및 kanamycin 첨가배지에서 배양 5일 후에 세포벽이 재생되었으며 4주일 후부터 colony들이 관찰되었다.

• Applied Microscopy
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• 제10권1_2호
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• pp.19-25
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• 1980

E. coli B was treated with colistin and kanamycin and the influence of these antibiotics on the absorption of $T_3$ phage was studied using the plaque counting method and the electron microscope. E. coli B treated with colistin was sharply inhibited on phage absorption and cell walls were severely damaged showing some spiny appearance around the walls. No influence of kanamycin was noted on phage absorption. Bacterial cells treated with kanamycin showed wave form in the structure of walls and a profound change was noted in the cytoplasm where it was concentrated along the periphery of the inner wall leaving the center of the cell to appear almost empty.

• 한국가축번식학회지
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• 제19권2호
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• pp.153-157
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• 1995

These studies were conducted to investigate the microbe control effect of antibiotics treatment in all media used for in vitro fertilization(IVF) embryo production. The bovine oocytes were recovered from follicles(2~5mm) and were cultrued for 22hrs at 38.5$^{\circ}C$ with 5% CO2 incubator. The contamination and development rate in vitro fertilized oocyte was evaluated everyday. The results were summerized as follow ; 1. Control, antibiotic-antimycotic solution(AAS, Gibco) 1%＋gentamycin, and AAS 1%＋kanamycin(Sigma, USA) treatment was contaminated with 72hrs. However Baytril and Kanamycin(Korea) added was not contaminated. 2. The blastocyst formation rate in Baytril supplementated 1, 2 and 3${mu}ell$/ml was 3.73, 1.28 and 0.00%, respectively. 3. The blastocyst formation in kanamycin added concentration of 50, 75 and 100$\mu\textrm{g}$/ml was 13.0, 9.4 and 3.49%, respectively.

• 생명과학회지
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• 제9권5호
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• pp.564-569
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• 1999

This study was conducted to determine the concentrations of plant growth regulators required for regeneration and the concentrations of antibiotics for the selection of transformed regenerants from lettuce, musk melon and tomato. The optimal concentrations of plant growth regulators for shoot formation were NAA 0.1 mg/$\ell$ +BA 0.1 mg/$\ell$ for lettuce, NAA 0.01 mg/$\ell$ +BA 2.0 mg/$\ell$ for melon and NAA 0.1 mg/$\ell$ +BA 0.5 mg/$\ell$for musk melon. Shoot induction from tomato, lettuce and melon was completely inhibited by 30 mg/$\ell$ or higher concentrations of kanamycin. Shoot formation from mu나 melon was not affected by kanamycin up to 40 mg/$\ell$, but was reduced in the presence of 50 mg/$\ell$ and completely inhibited by 100 mg/$\ell$. Shoot formation of all four crops was completely inhibited by higromycin at 10 mg/$\ell$. Both carbenicillin and cefatoxinme did not show any negative effects on shoot formation.