• 제목/요약/키워드: isozymes

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${\gamma}$-Glutamyltransferase의 조직내 분포에 관한 연구 -단일클론항체의 효소면역측정법, 방사면역측정법, 면역조직화학검사, 자가방사기록검사 적용에 관하여 - (Distribution of Murine Tissue Specific ${\gamma}$-Glutamyltransferase: -Comparison of Six Monoclonal Antibody Applications in Enzyme Linked Immunosorbent Assay, Radioimmunoassay, Immunohistochemistry, and Autoradiography-)

  • 김명근;박윤규;류총근
    • 대한핵의학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.112-123
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    • 1994
  • ${\gamma}$-Glutamyltransferase (GGT: E.C. 2.3.2.2.) is a glycoprotein enzyme which is involved in glutathione metabolism and amino acid transport through the plasma membrane. It is distributed widely in several organs including liver and kidney. Several isozymes of GGT have been reported and some of the isozymes may be associated with hepatocarcinogenesis. We have produced six monoclnal antibodies (mAbs) against GGT purified from the liver of 2-acetamidofluorene (AAF) treated rats. All of the six mAbs were obtained by immunizing mice with liver GGT Six hybridomas which produced anti-GGT Abs were extensively subcloned and injected into the peritoneal cavity of BALB/c mice to obtain large quantities of Abs. These mAbs were purified from ascites by ammonium sulfate precipitation and protein A sepharose CL-4B column chromatography. Using these mAbs we preformed enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), radioimmunoassay (RIA), immunohistochemistry (IHC), and autoradiography (ARG) to study the distribution of GGT isozyme in tissue. The results indicate that GGT-mAb 1 is specific for the AAF treated liver GGT, GGT-mAb 5 for the normal liver GGT, and GGT-mAb 6 for the normal kindey GGT. These mAbs may be used to evaluate the distribution of GGT isozymes in different tissues.

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벼 배발생 세포의 특성과 배발생 관련 유전자의 분이 - 배발생 세포에 관련된 동이효소 특성 - (Characterization and Cloning of Genes Related to Embryogenic Cells in Rice - Characterization of Isozymes Related to Embryogenic Cells -)

  • 정병균;백윤웅;고경민;남백희;황백
    • Journal of Plant Biology
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    • 제38권1호
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    • pp.55-62
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    • 1995
  • 벼(Oryza sativa L. cv. Kye Hwa) 성숙종자에서 유도한 배발생 세포(embryogenic cell, EC)의 동위효소 발현양상과 효소활성을 조사하였다. 배발생 캘러스로부터 확립된 EC 현탁배양은 세포가 둥글며 세포질이 충만한 세포들로 이루어졌으나 비배발생 세포(nonembryogenic cell, NEC)의 현탁배양은 크게 신장한 액포화된 세포들로 구성되었다. 이러한 EC와 NEC의 peroxidase, esterase, acid phosphatase 그리고 malate dehydrogenase의 동위효소 양상과 활성도를 분석한 결과 밴드의 수와 특이성 그리고 밴드 활성 등에 현저한 차이를 보여주었으며 또한 이들 동위효소의 효소 활성도 측정 결과 EC에서 훨씬 더 높게 나타났다. NEC에는 나타나지 않은 EC의 특이 밴드와 강한 밴드 활성 그리고 높은 효소 활성 등은 EC의 형태적, 분화능과의 관련성을 내포하고 있다. 이러한 결과들은 이들 효소의 특이 밴드들이 벼에서 EC의 생화학적 표지자로서 사용될 수 있음을 내포하고 있다.

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Pseudogobio esocinus (Cypriniformes) 젖산수소이탈효소 동질사량체들의 정제, 역학 및 면역화학 (Purification, Kinetics and Immunochemistry of Two Homotetrameric Lactate Dehydrogenase Isozymes in Pseudogobio esocinlus (Cypriniformes))

  • 김명옥;염정주
    • 한국동물학회지
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    • 제32권4호
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    • pp.420-428
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    • 1989
  • Pseudogobio esocinus의 심장, 신장 및 간 조직은 하부단위체 C를 함유하는 젖산수소이탈효소를 갖고 있음이 확인되었다. 하부단위체 A 및 B에 대한 유전자들의 조직 발현은 다른 포유동물의 것과 유사하였으며 분자량은 140,000 정도로 추정되었다. Oxamate gel을 사용한 chromatography결과 A4 동위효소는 NAD+보다는 column buffer에 의해 용출되었다. B4 동위효소는 CM-Sepharose column을 사용하여 부붙 정제되었다. B4 동위효소는 물론 A4 동위효소도 고농도의 Pyruvate에 의해 저해되었다. A4 동위효소의 affinity chromatography 상 행동과 Pyruvate 저해 정도로 보아 A4 등위효소는 B4 동위효소 두 역학적으로 유사하다고 사료된다. P. esainus A4 동위효소에 대한 항체는 mouse A4 등위효소와 반응하지만 동종의 B4 동위 효소와는 반응하지 않는 특성으로 보아 하부단위체 B는 진화과정에서 보존성이 낮은 것으로 사료된다. Three tissues of heart, kidney and liver of a primitive cvprinid Pseudogobio esocinus were found to have lactate dehydrogenase isozyme(5) containing subunit C. Tissue expressions of genes for subunits A and B were similar to those of mammalian species. Molecular weight of the isozymes were estimated to be 140,000 approximately. Affinity chromatography of the isozymes on the immobilized oxamate gel revealed that A4 isozyme was not elected in NAD+ but in column buffer. B4 isozune was isozpnatically purified by subjecting kidney extract to a CM-Sepharose column. Ae isozvme as well as B4 isozvme was inhibited by high concentrations of pyruvate. The affinity chromatographic behavior and susceptibility to pyruvate inhibition of the A4 isorpne suggest that A4 isozwne is similar to B4 isozyme kinetically. Antibodies against p. esocinus A4 isogyme reacted with mouse At isozyme but not with p. esocinus B4 isogyme, reflecting that subunit B is less conservative in its evolution.

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포식성 무당벌레(Harmonia axyridis) 난(卵)의 일부살충제와 살균제에 대한 esterase 활성 및 산란율, 부화율 조사 (Evaluation of Toxicity of 23 Pesticides against Harmonia axyridis (Coleoptera: Coccinellidae) Eggs and Adults: Effect on Esterase Activity, Hatchability, and Fecundity)

  • 조세열;박영만;박용철
    • 농약과학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.117-124
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    • 2007
  • 포식성 무당벌레(Harmonia axyridis)의 난(卵)을 대상으로 저독성 약제를 선발하기 위해 농약 처리 후 esterase 활성에 대해 조사하였다. 무당벌레의 난에는 3개의 esterase bands가 존재하였고 esterase의 활성에 영향을 주는 살충제(Methidation, Chlorpyrifos, Phenthoate)는 유기인계인 것으로 나타났다. 살균제로는 트리아졸계 계통의 Hexaconazole과 Triflumizole 그리고 피리미딘계의 Nuarimol에서 esterase의 활성 저해가 관찰되었다. 선발된 농약을 바탕으로 무당벌레의 산란율과 부화율을 조사하였다. Esterase에 강한 활성저해를 보였던 농약에서는 산란율과 부화율도 낮게 나타났으며, esterase에 약하게 혹은 전혀 영향을 주지 않았던 농약에서도 정도 차이는 있으나 산란율과 부화율에 영향을 주는 것으로 관찰되었다.

포플러류(類)의 식물체(植物體)와 미토콘드리아의 동위효소(同位酵素) 분석(分析)에 의(依)한 몇 동위효소(同位酵素)의 세포소기관적(細胞小器管的) 위치(位置) (Subcellular Location of Five Isozymes in Populus Species by Isozyme Analysis with Whole Plant and Mitochondria)

  • 류장발;노은운;손두식
    • 한국산림과학회지
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    • 제80권1호
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    • pp.97-102
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    • 1991
  • 포플러류의 식물체(植物體)와 그 식물체(植物體)에서 분리(分離)한 미토콘드라아를 동위효소(同位酵素) 분석(分析)하여, 각 동위효소(同位酵素)의 세포내(細胞內) 위치(位置)를 규명(糾明)하였다. 분석(分析)한 동위효소(同位酵素)는 ADH, 6-PGD, MDH, PGI와 Diaphorase였다. ADH는 세포질(細胞質)에 있으며, 핵내(核內)에 있는 한개의 유전자좌(遺傳子座)에 의(依)해 지배(支配)되는 것으로 나타났고, 6-PGD는 mitochondria에 있는 것으로 나타났다. MDH는 세포질(細胞質)에 3개의 band, mitochondria에 4개의 band가 있는 것으로 나타났다. PGI는 세포질(細胞質)에 3개의 band가 있는 듯하며, Diaphorase는 mitochondria에 1개의 band, 세포질(細胞質)에 2개의 band가 있는 것으로 나타났다. 세포질(細胞質)에 있는 두개의 band는 핵내(核內)에 있는 1개의 유전자좌(遺傳子座)에 있는 유전자(遺傳子)에 의(依)해 지배(支配)되는 것으로 판단되었다.

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Esterase 동위효소 및 단백질 패턴에 의한 고구마 품종 분류 (Classification of Sweet Potato Varieties Based on Esterase Isozymes and Protein Patterns)

  • 김덕수;오성근;진문섭;류점호
    • 한국작물학회지
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    • 제41권3호
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    • pp.332-339
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    • 1996
  • 본 시험은 고구마 육종에 필요한 기초 자료를 제공하고자 1993년과 1994년에 작물시험장에서 보유하고 있는 유전자원 100품종에 대하여 전기영동법으로 esterase 동위효소와 단백질 특성을 분류하였던 바 결과는 다음과 같다. 1. 잎의 esterase 동위락소 특성은 14가지 형으로 분류되었고 Ⅸ형에 가장 많은 46품종이 속하여 있으며, 다음은 Ⅶ, I, III, Ⅷ, II 및 V형의 순으로 47품종이 속하여 있고 나머지 7품종은 각기 다른 특성을 가지고 있었다. 효소의 수가 많은 I형에는 신율미, Beniastma 및 High Starch 등 육질이 분질인 품종이 분포 되었다. 2. 괴근의 esterase 동위리소 특성은 18가지 형으로 분류되 었고 C형은 가장 많은 22품종을 포함하고 있으며 그 다음은 B, K, A, E, 1 및 N 형 순이었다. 3. 괴근의 단백질 특성은 7가지 형으로분류되었고 I형은 36품종, IV형 27품종을 포함하였으며 다음은 II, III, Ⅶ 및 Ⅵ형 순이었다. 4. 잎과 괴근의 major esterase 동위효소와 major 단백질 분석 결과 Beniastma, Beniaka, Beniazuma 및 Benikomachi, Shiroshistma와 Shiroshastma는 유사한 품종이었고 기타는 다른 품종임을 알 수 있었다.

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삼세기(Shaggy sea raven, Hemitripterus villosus)의 carbonic anhydrase III에 관한 연구 (Presence of Carbonic Anhydrase III-like Protein in Shaggy Sea Raven, Hemitripterus villosus)

  • 권록은;고강희
    • 생명과학회지
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    • 제24권2호
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    • pp.186-190
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    • 2014
  • 본 논문에서는 삼세기(Shaggy sea raven, Hemitripterus villosus)를 실험 재료로 선택하여 Carbonic Anhydrase Isozymes (CAs) 중의 하나인 CA III에 대한 연구를 SDS-PAGE, Isoelectric Focusing (IEF), Western blot analysis의 방법을 통하여 진행하였다. SDS-PAGE와 Western blot 결과 삼세기 아가미, 혈액, 장, 간, 신당, 근육, 심장조직에서 CA III의 분자량인 30 kDa의 band가 확인되었다. 삼세기의 근육과 아가미에 대한 등전점 전기영동(IEF)과 Western blot analysis 결과 pI 7.0 부근에서 band가 형성되는 것을 확인할 수 있었다. 특히 SDS-PAGE와 IEF 실험결과 삼세기의 아가미 조직에서 CA III의 발현량이 다른 조직들에 비하여 우세하게 나타났다. 이는 아가미가 다른 조직들과 달리 어류의 생체기관 중 유일하게 외부와 직접 접촉이 가능한 조직으로서 활성산소에 대한 손상을 최소화하기 위한 것으로 사료된다.

고혈압에서 혈관 산화질소 합성 동위 효소 발현 변화 (Altered Vascular Expression of Nitric Oxide Synthase Isozymes in Hypertension)

  • 김인광;강대길;이종은;오봉석
    • Journal of Chest Surgery
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    • 제32권2호
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    • pp.138-143
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    • 1999
  • 배경: 혈관 내피층에서 분비되어 평활근층 이완을 일으키는 물질의 본체는 산화질소(nitric oxide, NO)이며 NO synthase(NOS)에는 뇌형(brain NOS, bNOS), 내피세포형(endothelial constitutive NOS, ecNOS) 및 유도형 (inducible NOS, iNOS) 등 세 가지 동위효소가 있음이 알려져 있다. 고혈압은 혈관 내피층 기능 이상을 보임이 알려져 있으나 NOS 동위 효소의 변화를 포함한 세포내 기전은 아직 확실치 않다. 저자들은 고혈압 기전을 구명하기 위한 일환으로 고혈압 혈관에서 NOS 동위효소가 어떻게 변화되는가 조사하고자 하였다. 대상 및 방법: 흰쥐에서 two-kidney, one clip (2K1C) 고혈압과 deoxycorticosterone acetate(DOCA)-salt 고혈압을 일으켰다. 4주 뒤 고혈압이 일어난 것을 확인하고 적출 흉부 대동맥 표본에서 Western blot 분석에 의한 NOS 동위효소 발현 조사 및 비색법에 의한 조직내 산화질소 정량을 하였다. 결과: 2K1C 및 DOCA-salt 흰쥐에서 실험군은 각각의 대조군에 비해 유의하게 높은 혈압을 보였다. 두 고혈압군에서 모두 적출 대동맥 표본의 bNOS 및 ecNOS 단백 발현이 감소되었다. iNOS 단백은 DOCA-salt 고혈압에서 변화를 보이지 않으나 2K1C 고혈압에서는 역시 감소를 보였다. 혈관조직내 산화질소 함량은 두 고혈압에서 모두 유의하게 감소되었다. 결론: 2K1C 및 DOCA-salt 고혈압에서 혈관의 NOS 발현과 산화질소 함량이 감소되어 있으며 이는 고혈압의 유지 기전에 공헌하리라 추측되었다.

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호르텐스극구흡충에서 Alkaline Phosphatase 및 Acid Phosphatase의 특성 (Characteristics of Alkaline and Acid Phosphatase in Echinostoma hortense)

  • 양용석;김인식;임지애;강성구;박주연
    • 대한의생명과학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.119-129
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    • 1999
  • 호르텐스극구흡충 성충 (adult worm)을 재료로 하여 acid phosphatase (Acp)와 alkaline phosphatase (Alp)의 조직 세포에 대한 분포 및 동위효소의 특성을 규명하기 위하여 Gomori lead nitrate 및 Gomori calcium방법 그리고 전기영동법 등을 시행하였다. 조직 내의 Acp및 Alp의 분포는 충체의 소장 (intestine)과 난황선 (vitellaria)그리고 인두 (pharynx)에서 강한 반응을 나타냈다. 동위효소 유형은 Acp에서 179.5 및 209.4 kDa 두 개의 분획이 분리되었고, Alp는 145.9, 207.5 및 220.8 kDa의 세 개의 분획이 분리되었다. 열에 대한 안정도는 Alp가 9$0^{\circ}C$에서 12초경과 후에 완전히 불활성화 되었으며, Alp의 최적 온도 및 pH는 4$0^{\circ}C$와 pH 9이었고 Acp의 치적 pH는 5였다. 그리고 Acp및 Alp의 최대 활성도 (unit)는 Acp가 71 범위였고, Alp는 189의 범위에 있었다. 이상에서와 같이 호르텐스극구흡충은 phosphatase가 소화관과 난황선에서 주로 분포하고 있었으며 숙주 체내에서 소화관을 중심으로 대사가 활발하게 이루어지고 있음을 알 수 있었다.

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복숭아혹진딧물의 살충제 저항성(抵抗性)에 관한 연구(硏究) III. Acephate저항성(抵抗性) 발달(發達), 교차저항성(交叉抵抗性) 및 Esterase Isozymes (Studies of Insecticide Resistance in Green Peach Aphids, Myzus persicae(Sulz) III. Acephate Resistance, Cross-Resistance, and Esterase Isozymes)

  • 최승윤;김길하
    • 한국응용곤충학회지
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    • 제25권2호
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    • pp.99-105
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    • 1986
  • 본(本) 시험(試驗)은 실내(室內)에서 복숭아혹진딧물(Myzus persicae)을 OP계(系) 살충제 acephate로 누대도태(累代淘汰)시켜 저항성(抵抗性) 발달속도(發達速度)와 정도(程度), 다른 살충제와의 교차저항성(交叉抵抗性) 유무(有無), 나아가 그들 계통(系統)에서 esterase isozyme을 검출(檢出)하여 살충제) 저항성(抵抗性)과의 관계를 검토(檢討)코자 하였다. 1. 복숭아혹진딧물의 acephate 저항성(抵抗性) 발달(發達) 속도(速度)는 5세대(世代) 도태(淘汰)에서 $1.0{\sim}1.6$배(倍), 10세대(世代) 도태(淘汰)에서 $2.2{\sim}2.8$배(倍), 15세대(世代) 도태(淘汰)에서 $3.5{\sim}5.1$배(倍), 20세대(世代) 도태(淘汰)에서 $6.7{\sim}9.3$배(倍)로 증대(增大)되었다. 2. Acephate 20세대(世代) 도태저항성(淘汰抵抗性) 계통(系統)은 24시간(時間) 조사(調査)에서는 acephate자체(自體)에 대하여 31.7배(倍), cypermethrin에 대해서는 507.3배(倍), oxydometon-methyl에 대해서는 49.7배(倍), pirimicarb에 대해서는 7.5배(倍)이었고 48시간((時間) 조사(調査)에서는 acephate 자체(自體)에 대하여 32.0배(倍), cypermetherin에 대하여 475.6배(倍), oxydemeton-methyl에 대하여 21.5배(倍), pirimicarb에 대(對)하여 8.9배(倍)이었다. 3. Acephate 저항성(抵抗性) 계통(系統)은 cypermethrin과 oxydemeton-methyl에 대하여 높은 교차저항성(交叉抵抗性)을 나타내었고 pirimicarb에 대해서는 낮은 교차저항성(交叉抵抗性)을 나타내었다. 4. Esterase isozyme의 영동대(泳動帶)에 있어서 $Est\;{\alpha}-1,\;Est\;{\alpha}-2,\;{\beta}-1$는 저항성(抵抗性), 감수성(感受性) 두 계통(系統) 모두에서 검출(檢出)되었으나 $Est\;{\beta}-2$는 acephate 저항성(抵抗性) 계통(系統)에서만 검출(檢出)되었다.

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