• 생명과학회지
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• 제20권10호
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• pp.1511-1518
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• 2010

영실에 존재하는 페놀성 화합물의 추출 최적 조건을 알아보고자 추출용매를 달리하여 phenol성 물질의 함량을 비교한 결과, 70% ethanol을 용매로 하여 24시간 교반 추출하였을 때 phenol성 물질의 용출량이 13.8 mg/g 이상으로 가장 높았다. Helicobacter pylori에 대한 항균효과는 영실추출물을 150 ${\mu}g$/ml의 농도로 첨가하였을 때 생육 저해환이 12 mm, 200 ${\mu}g$/ml 일 때 14 mm의 생육저해환이 나타나 항균활성이 우수한 것을 알 수 있었다. H. pylori에 대한 저해물질을 정제하기 위하여 영실을 70% 에탄올로 추출한 후 Sephadex LH-20 column과 $C_{18}$ cartridge column을 이용하여 항균활성을 가지는 물질을 순수 정제하고 구조를 동정한 결과 protocatechuic acid, chlorogenic acid 및 quercetin으로 동정하였으며, 단일물질에 의한 H. pylori에 대한 저해효과 보다 혼합물질에 의한 synergy 효과에 의해 저해 효과가 높아지는 것을 알 수 있었다.

• 미생물학회지
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• 제22권4호
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• pp.207-214
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• 1984

2-deoxy-D-glucose가 첨가된(25 pg/ml) 최소액체 배지에 8.5시간 전 배양하여 swelling 시킨 conidiospore에 2% driselase와 2% ${\beta}-glucuronidase$를 동량 혼합한 효소용액을 처리하여 반응시킨 결과 protoplast형성 시간 2시간이내로 단축 시킬 수 있었다. 5% Ficoll(m.w. 400,000)용액을 사용하여 conidial protoplast를 보다 순수하게 분리 벙제할 수 있었으며, protoplast를 Giemsa로 핵 염색한 결과, 대부분의 protoplast는 하나의 핵을 갖고 있었다. 또한 전자현미경으로 관찰한 결과 conidiospore에서 유래된 protoplast는 세포벽 성분이 남아 있지 아니한 완전한 protoplast인 것으로 판명되었다. 영양요구성 돌연변이주에서 유래된 conidial protoplast의 융합률은 $3.4{\times}10^{-1}$에서 $4.9{\times}10^{-1}$수준으로 이는 mycelial protoplast의 경우보다 5-28배 가량 높은 수준의 것이었다.

• 한국수산과학회지
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• 제28권2호
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• pp.227-236
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• 1995

국내산 갈조류로부터 생리 기능성이 우수한 수용성 식이섬유 소재를 개발하기 위한 기초자료를 얻기위해 다시마와 미역(엽상체와 포자엽 각각)으로부터 fucoidan을 추출, 정제하여 그 특성을 조사하였다 Fucoidan의 추출 조건은 pH 2.0의 산성 추출액으로 $65^{\circ}C$I에서 1시간 씩 3회 추출을 하였고 cetylpyridinium chloride를 사용하여 부분 정제하였다. 부분 정제 fucoidan의 수율은 다시마 $2.71\%$, 미역포자엽 $6.65\%$, 미역 엽상체$0.40\%$였다. 특히 미역포자엽의 수율이 가장 높은 반면에 미역 엽상체는 가장 낮아 부위에 따른 차이가 매우 큼을 알 수 있었다. DEAE-Sephadex A-25 이온 교환 칼럼으로 부분 정제 fucoidan을 분획한 결과 다시마, 미역포자엽 모두 3종의 fraction으로 분획되었고 각 fraction은 전기 영동상에서 2종 이상의 band가 검출되어 불균일함을 알 수 있었다 이온 교환 칼럼으로 분획한 주fraction을 다시 알콜 분별 침전법으로 재분획한 결과 다시마와 미역포자엽은 에탄올농도 $60-70\%$에서 침전된 fraction이 cellulose acetate 전기 영동 및 gel filteration chromatography상에서 균일성을 나타내었다. 균일하게 정제된 fucoidan의 fucose : galactose : 황산기의 mole 조성비는 다시마, 미역포자엽이 각각 1 : 0.31 : 2.43,1 : 0.87 : 1.99였다. 분자량은 다시마가 31,000, 미역포자엽이 38,000으로 비교적 적었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제51권3호
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• pp.153-158
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• 2008

토양으로부터 tyrosinase 저해제를 생산하는 방선균 F-97을 분리하여, 이 균이 생산하는 tyrosinase 저해제를 정제하였다. 먼저 배양액을 원심분리하고 이 여액을 pH 4.0으로 조절한 후 IRC-120($NH_4^+$ type column chromatography, Silica gel column chromatography, C18 column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography를 사용하여 정제하였다. 정제도 확인은 ODS HPLC를 이용하여 확인하였으며, 최종 정제 수율은 5.24%이었다. 물리 화학적 특성으로 tyrosinase 저해제는 water, methanol, ethanol 등에는 잘 녹았으나, acetone, butanol, ethylacetate, chloroform 등에는 녹지 않는 수용성 물질이었다. 물을 용매로 UV 흡광도를 측정한 결과 194nm에서 최대 흡광도를 나타내었다. 본 tyrosinase 저해제는 Iodine, Ninhydrin, Millon, Sakaguchi, Xanthoproteic, Emerson 시험에서는 음성이었고, Molish, Benedict, conc. $H_2SO_4$, $KMnO_4$ 시험에서는 양성이었다. 저해제의 열 안정성은 $100^{\circ}C$ 50분까지 안정하였고, pH $4{\sim}9$에서 안정하였다. Tyrosinase 저해제의 mushroom tyrosinase에 대한 $IC_{50}$ 값은 $19.2{\mu}g/ml$이었고, Streptomyces bikiniensis NRRL B-1049에 대한 저해활성은 $1,000{\mu}g/ml$ 일 때 27mm이었다. 그리고 본 저해제의 저해 양상은 경쟁적 저해로 확인되었다.

• 한국생물공학회:학술대회논문집
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• 한국생물공학회 2005년도 생물공학의 동향(XVII)
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• pp.287-292
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• 2005

The crude polysaccharides(C-CPF, C-CPM, C-CPB) derived from fruiting body, mycelia and mycelia free broth of cordyceps militaris were obtained by ethanol precipitation of hot water extracts. After a batch fermentation of C. militaris was carried out in a 5 L jar vessel, endo-polysaccharide and exo-polysaccharide were obtained. They were demonstrated as the hetero polysaccharides which were composed of glucsose, galactose and mannose by performed with HPAEC(high pH anion exchange chromatography) and conformation of random coil by its complex forming ability with congo red reagent. They were purified by ion exchange (DEAE-cellulose) and gel filtration chromatography. They were monitered by phenol-sulfuric acid method and Bradford method. The NO induction activities of crude polysaccharides and purified polysaccharides derived from mycelia free broth were enhanced rather than LPS(lipo polysaccharide) which was used as a general NO inducer. These effects presumably contibute to the antitumor activities. The homogenieties and molecular weights of polysaccharides were determined by using Sepharose CL-6B. The yield, molecular weights and NO induction activities of C-CPFN Fr.III, C-CPMN Fr.III, C-CPBN Fr.II were 0.387, 0.408 and 0.153, 127 K 210 K and 36 K, 40.79%, 88.72%, and 104.17%, respectively.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제48권4호
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• pp.515-524
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• 2020

With the increasing demand for enzymes in industrial applications there is a growing need to easily produce industrially important microbial enzymes. This study was carried out to screen the indigenous refinery bacterial isolates for their production of two industrially important enzymes i.e. lipase and protease. A total of 15 bacterial strains were isolated using Soil Extract Agar media from the oil-contaminated environment and one was shown to produce high quality lipase and protease enzymes. The culture conditions (culture duration, temperature, source of nitrogen, carbon, and pH) were optimized to produce the optimum amount of both the lipase (37.6 ± 0.2 Uml-1) and the protease (41 ± 0.4 Uml-1) from this isolate. Productivity of both enzymes was shown to be maximized at pH 7.5 in a medium containing yeast extract and peptone as nitrogen sources and sucrose and galactose as carbon sources when incubated at 35 ± 1℃ for 48 h. Bacterial strain SAB06 was identified as Bacillus licheniformis (MT250345) based on biochemical, morphological, and molecular characteristics. Further studies are required to evaluate and optimize the purification and characterization of these enzymes before they can be recommended for industrial or environmental applications.

• Ocean and Polar Research
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• 제33권3호
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• pp.255-263
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• 2011

The aim of this investigation was to evaluate antioxidant activity of crude extracts from the halophyte Vitex rotundifolia, their solvent fractions, and isolated compounds (1-3). Antioxidant capacity was determined by measuring DPPH radical, and authentic $ONOO^-$ and $ONOO^-$ generated from 3- morpholinsydnonimine (SIN-1) in vitro as well as degree of occurrence of intracellular ROS, NO and GSH in mouse macrophage Raw 264.7 cells. From comparative analysis, MeOH extract, n-BuOH, and 85% aq. MeOH solvent fractions showed significant antioxidant effect in DPPH radical and $ONOO^-$ assay systems. Activity-guided purification of n-BuOH and 85% aq. MeOH fractions led to the isolation of flavonoids 1-3. Among them, compound 1 exhibited excellent antioxidant effect in all bioassay systems tested. On the other hand, compounds 2 and 3 revealed potent inhibitory effect against $ONOO^-$ generated from SIN-1, comparable with the positive control penicillamine.

• 한국식품영양과학회지
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• 제21권2호
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• pp.136-142
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• 1992

냉동 건조한 귤(Citrus sinensis)의 껍질로 부터 methanol과 butanol추출물인 crude bioflavonoids를 건조중량으로 최초 시료대비 약 0.26%의 수율을 얻을수 있었다. 이 crude bioflavonoids를 gel filtration, HPLC를 이용하여 분리, 정제하였고 TLC, HPLC, UV spectrum, NMR spectral analysis를 통해 narirutin과 hesperidin으로 동정할 수 있었다. 또한 HPLC 정량분석 결과, narirutin과 hesperidin은 crude bioflavonoids의 g당 42mg과 530mg을 얻을 수 있었으며 귤 껍질의 주요 bioflavonoid는 hesperidin으로 판명되었다. 한편 실험 동물인 Sprague-Dawley종의 흰쥐를 대상으로 혈압 변화를 측정한 결과 귤 껍질의 주요 bioflavonoid성분인 hesperidin은 약물 투여 후 유의성있게 (p< 0.001) 혈압 저하효과가 있음을 관찰 할 수 있었다.

• 한국식물병리학회지
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• 제14권1호
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• pp.68-73
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• 1998

Barley mild mosaic virus (BaMMV-Kor) was isolated from the southern part of Korea, and by mechanical inoculation onto barley cultivars, purification and production of antibody. BaMMV-Kor purified form infected plants were filamentous particle, with 13 nm in diameter and 250∼300 nm and 500∼650 nm in length. Antibody of BaMMV-Kor was made by injecting the purified virus to the muscle of a rabbit. In gel-diffusion test, antibody to BaMMV-Kor created spur with BaMMV-Kal and BaMMV-M, but did not make spur with BaMMV-Kor infected New Golden, Ishukushirazu, Joshushiro Hadaka and Misato Golden, but did not infect Kashimamugi, Chikurin Ibaraki 1 and Mokusekko 3. In Korean barley cultivars, BaMMV-Kor infected most of the covered barley cultivars, but did not infect Saeolbori. It also infected naked barley cultivars except Chalbori and Hinssalbori. And all the beer barley cultivars were infected by BaMMV-Kor. BaMMV-Kor had two RNAs, RNA 1 (7.5 Kb) and RNA 2 (3.5 Kb), and coat protein (33 KDa).

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권2호
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• pp.327-330
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• 2002

A plant growth-promoting substance, FM001, was isolated from the culture broth of Acremonium strictum MJN1. The purification steps included solvent extraction, adsorption chromatography using Diaion HP20, TLC on silica, and HLPC using a C-18 column. The purified FM001 enhanced rice seedling growth by $11.1\%\;and\;34.0\%$ of the dried weight of the shoots and roots, and also radish growth by $26.5\%\;and\;23.7\%$ of the top length and dried weight. FM001 also significantly promoted the growth of red pepper by increasing $32.7\%$ of fruit weight and $11.3\%$ as regards the height. FM001 consisted of C, H, O, N, and S, and its molecular weight was determined to be 537.78 Da. The structure of FM001 resembled brassinosteriods, and it would appear to have great potential as an effective bio-fertilizer.