• 한국미생물·생명공학회지
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• 제23권6호
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• pp.687-694
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• 1995

Alkalophilic Bacillus sp. HJ-12 producing $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase was isolated from soil in the alkalic condition, pH 10.0. $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase was maximaly produced in the medium consisting of 2% soybean arabinogalactan (SAG), 0.5% yeast extract, 0.5% polypeptone, 0.5% NaCl, 0.1% K$_{2}$HPO$_{4}$, 0.02% MgSO$_{4}$$\cdot $7H$_{2}$O, 0.1% Na$_{2}$CO$_{3}$ under the aerobic condition (pH 8.2). $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase is inducible enzyme so that its activity has been increased 10 fold in the SAG medium than in the glucose medium. Through the ammonium sulfate precipitation, DEAE- Sephadex A-50 ion chromatography, and Sephadex G-75 gel chromatography procedures, this enzyme was purified with a single protein of 11% vield and 110 fold's purity. $\beta $-1, 4-D-arabinogalactanase is endo type enzyme producing ollgosaccharide from SAG.

• Journal of Plant Biology
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• 제32권1호
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• pp.51-65
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• 1989

Glycinin is the major storage protein in soybean. It has been known that a molecule of glycinin is composed of 6 subunits, each of which consists of two different kinds of polypeptides, acidic (A) and basic (B) one (NW 39K and 19K, respectively). To study the molecular origin and the relationship of glycinin subunit polypeptides, antibodies against A-and B-polypeptide were obtained by immunizing rabbits with either of the antigens purified by gel filtration and preparative electrophoresis. Each antibody was not only specific for its own antigen polypeptide in soybeans but also recoginzed the precursor which was synthesized in vivo and in vitro. The polyadenylated mRNAs were isolated from immature seeds and leaves and were translated in vitro using wheat germ extract. One of the seed-specific translation products. MW 60K, was identified to be the precursor of glycinin subunit by immunoprecipitation with antibodies against glycinin A- and B-polypeptide. Mature A- and B-polypeptides were not detected in the translte in vitro. These results suggest that the precursor polypeptide is synthesized from the mRNA and is cleaved to yield A- and B-polypeptides which from a glycinin subunit in the cell. Glycinin genes were expressed with the maturation of soybean seeds in a tissue-specific and developmental stage-specific manner.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제8권1호
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• pp.156-166
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• 2007

대두박은 가축사료에 사용되는 식물성 단백질원이다. 대두박은 대두에서 기름을 추출한 부산물로서 높은 단백질 함량과 낮은 섬유질 함량을 가지고 있어 양돈 사료에서 널리 이용되고 있다. 그러나 이러한 대두는 여러 종류의 항영양인자를 가지고 있어 소화율과 성장능력을 감소시키는 단점을 가지고 있다. 따라서 이러한 단점을 보완하기 위하여 열처리하는 방법, HP 100, HP 200 및 HP 300과 같이 미생물을 이용한 방법, 수용성 비단백질 구성성분을 제거하는 방법, 정제대두단백과 비단백태화합물 제거 등의 방법을 이용하고 있다. 대두를 적당히 열처리를 하면 대부분의 항영양인자가 파괴되어 성돈에서 피해가 없지만 어린돼지에서는 영양소 소화율을 감소시킨다. 그래서 자돈에서는 유제품과 유사한 사양능력을 가지는 농축대두단백이나 정제대두단백 같은 가공대두제품을 이용하여 급여해야 한다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권1호
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• pp.126-135
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• 2006

In a previous study, a biological response modifier (BRM) specifically enhancing the function of B-cells was isolated from Korean fermented soybean paste (Kfsp), but not from non-fermented soybeans. In this study, we attempted to isolate the bacteria producing the BRM from Kfsp (KfspBRM) by ELISA using anti-KfspBRM and by B-cell proliferation. Five bacteria whose culture supernatants showed the BRM activities were isolated, and one of them was identified as Bacillus licheniformis E1. The bacterial BRM (bBRM) originated from a slime layer of B. licheniformis El had a molecular weight of 1,594 kDa, and contained $33\%\;(w/w)$ of reduced sugar and $4.6\%\;(w/w)$ of protein content. The bBRM appeared to be a glycoprotein that is physically, structurally, and functionally similar to the KfspBRM, suggesting that the isolates including B. licheniformis El may produce the KfspBRM in the fermentation process of soybean paste. The mass production of the BRM by the bacterium may help to study B-cells in immunology, and the enrichment of the BRM in Kfsp may help patients in future who are medically in need of potentiation of B-cell proliferation and antibody production.

• Applied Biological Chemistry
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• 제42권1호
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• pp.6-11
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• 1999

fibrin 단백질을 분해할 수 있는 효소를 분비하는 균을 된장으로부터 분리하여 동정하였다. 된장으로부터 protein 분해능이 있는 균주를 분리하고 분리한 균주들 중에서 혈전용해능이 가장 우수한 균주인 KDO-13을 선발하였다. 이 균주는 호기성으로 포자를 형성하는 Gram(+)균 이었으며 gas chromatography에 의한 세포의 지방산 분석은 $C_{15:0}$ anteiso fatty acid가 47.7%, $C_{15:0}$ iso fatty acid가 13.5% 이었다. 이 균주는 생리, 생화학적 특성 및 세포지방산 분석을 통하여 57.7%의 similarity를 갖는 Bacillus atrophaeus로 잠정 동정되었다. Bacillus atrophaeus KDO-13의 fibrinolytic enzyme 생성을 위한 최적 배양 온도와 pH는 각각 $37^{\circ}$와 6.0 이었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제32권11호
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• pp.1462-1470
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• 2022

Natural antimicrobial substances are needed as alternatives to synthetic antimicrobials to protect against foodborne pathogens. In this study, a bacteriocin-producing bacterium, Bacillus subtilis HD15, was isolated from doenjang, a traditional Korean fermented soybean paste. We sequenced the complete genome of B. subtilis HD15. This genome size was 4,173,431 bp with a G + C content of of 43.58%, 4,305 genes, and 4,222 protein-coding genes with predicted functions, including a subtilosin A gene cluster. The bacteriocin was purified by ammonium sulfate precipitation, Diethylaminoethanol-Sepharose chromatography, and Sephacryl gel filtration, with 12.4-fold purification and 26.2% yield, respectively. The purified protein had a molecular weight of 3.6 kDa. The N-terminal amino acid sequence showed the highest similarity to Bacillus subtilis 168 subtilosin A (78%) but only 68% similarity to B. tequilensis subtilosin proteins, indicating that the antimicrobial substance isolated from B. subtilis HD15 is a novel bacteriocin related to subtilosin A. The purified protein from B. subtilis HD15 exhibited high antimicrobial activity against Listeria monocytogenes and Bacillus cereus. It showed stable activity in the range 0-70℃ and pH 2-10 and was completely inhibited by protease, proteinase K, and pronase E treatment, suggesting that it is a proteinaceous substance. These findings support the potential industrial applications of the novel bacteriocin purified from B. subtilis HD15.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제9권3호
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• pp.800-806
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• 2008

자연발효된 청국장으로부터 혈전용해활성을 가지는 세균 Bacillus licheniformis HK-12를 농화분리하여, 배양기간 동안 생산된 혈전용해활성을 가지는 단백질에 대해 프로테옴 분석을 실시하였다. B. licheniformis HK-12를 액체 영양배지에 접종하여 얻어진 배양상등액을 피브린 평판법(fibrin plate method)을 사용하여 효소활성을 측정하였다. 그 결과, HK-12의 혈전용해 활성은 대조구인 plasmin보다 약 2.3배정도 높은 활성을 나타내었다. 효소는 배양상등액을 ammonium sulfate 침전, DEAE-cellulose chromatography, Sephadex chromatography 등을 수행하여 분리정제하였으며, 정제된 혈전용해효소의 분자량은 SDS-PAGE를 통해 약 23 kDa로 측정되었다. 배양시간에 따른 HK-6의 세포외 단백질의 변화를 2-D PAGE 분석을 통하여 분석하였다. 그 결과 36시간배양 후에 가장 현저하게 유도된 spot #1을 분리하였으며, MALDI-TOF MS를 이용하여 단백질 동정을 실시한 결과, 유도된 단백질의 아미노산 서열은 $^1EKKIEKYREEEORLK^{15}$으로서, serine protein kinase (PrkA) (AAU22526)로 확인되었다.

• 산업식품공학
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• 제15권4호
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• pp.305-310
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• 2011

본 연구에서는 DSM을 이용하여 단백질 추출이나 정제없이 식품에 적용 가능성이 있는 가식성 필름을 개발하였다. HPH 처리는 표면이 매끄럽고 균일한 형태의 필름을 형성시켰고, 필름의 WVP값을 감소시켜 수분 방벽 효과를 높였다. 필름 내 글리세롤 농도 증가는 WVP값을 전반적으로 높였다. 농산물 가공 부산물인 DSM으로 제작된 가식성 필름은 새로운 식품 소재로서 상업적 적용 가능성을 보여주었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제14권3호
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• pp.191-200
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• 1971

콩 및 장류 연구의 일환으로서 세균효소에 의하여 콩단백질을 분해하는 강력한 protease생산균주를 얻기 위하여 전국 9개도에서 볏짚을 수집하였다. 수집시료로부터 Dilution pour plate에 의하여 protease생산성 균주 총 23 균주를 순수 분리하였다. 순수분리된 전균주에 대하여 portease생산성을 screening하고 protease을 강력히 생산하는 우수균주를 선정 하였다. 우수균주인 $D_9$ 및 $F_{20}$ strain이 생성한 protease의 최적작용조건을 검토한 결과 optimum pH가 7.5이고 optimum temperature는 $40^{\circ}C$ 임을 알았다. 청국장은 다른 장류와는 달리 세균으로서 단시간 동안에 단백질을 분해시켜 만들음으로 특유한 식품인 것이다. 우수균주로 분리 선정된 $D_9$와 $F_{20}$ strain과 Bac. natto strain을 starter로하여 청국장을 제조하는데 세균의 protease에 의하여 콩단백질의 분해로 수용성질소화합물이 증가함을 알았다. 삶은 콩과 우수균주로 선정된 균주에 의하여 제조된 청국장에 대하여 질소형태의 변화를 보면 청국장 제조과정에서 수용성질소가 85%, TCA가용성질소, amino 태질소, peptide 태질소는 두드러지게 증가하고 반대로 삶은콩은 수용성질소가 감소하였다.