A PVC membrane electrode for lead ion based on 1-phenyl-2-(2-quinolyl)-1,2-dioxo-2-(4-bromo) phenylhydrazone (PQDBP) as ionophore was demonstrated. The optimum composition of the membrane was 30 wt% poly(vinyl chloride), 60 wt% dibutyl phthalate as a plasticizer, 4 wt% ionophore and 6 wt% sodium tetraphenylborate as additive. The electrode exhibits a Nernstian response (28.7 mV decade$^{-1}$) for Pb$^{2+}$ over a wide concentration range (1.0 ${\times}$ 10$^{-1}$ to 1 ${\times}$ 10$^{-6}$ M) with a detection limit of 6.0 ${\times}$ 10$^{-7}$ M. This sensor has a short response time and can be used for at least 2 months without any divergence in potentials. The proposed electrode could be used in a pH range of 3.0-6.0 and revealed good selectivities for Pb$^{+2}$ over a wide variety of other metal ions. It was successfully applied as an indicator electrode for the potentiometric titration of lead ion with potassium chromate and for the direct determination of lead in mine.
The two chelates based on calix[4]arene and thiacalix[4]arene have been synthesized and used as neutral ionophores for preparing PVC based membrane sensor selective to $Ho^{3+}$ ion. The addition of potassium tetrakis(4-chlorophenyl)borate (KTpClPB) and various plasticizers, viz., NDPE, o-NPOE, DOP, TEP and DOS have been found to improve significantly the performance of the sensors. The best performance was obtained with the sensor no. 6 having membrane of $L_2$ with composition (w/w) ionophore (2%): KTpClPB (4%): PVC (37%): NDPE (57%). This sensor exhibits Nernatian response with slope $21.10{\pm}0.3mV/decade$ of activity in the concentration range $3.0{\times}10^{-8}-1.0{\times}10^{-2}M\;Ho^{3+}\;ion$, with a detection limit of $1.0{\times}10^{-8}M$. The proposed sensor performs satisfactorily over a wide pH range of 2.8-10, with a fast response time (5 s). The sensor was also found to work successfully in partially non-aqueous media up to 25% (v/v) content of methanol, ethanol and acetonitrile, and can be used for a period of 4 months without any significant drift in potential. The electrode was also used for the determination of $Ho^{3+}$ ions in synthetic mixtures of different ions and the determination of the arsenate ion in different water samples.
Kim, Se-Woong;Kim, Dae-Hwan;Jung, Yeon-Gil;Roh, Sang-Ho
Reproductive and Developmental Biology
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v.35
no.1
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pp.17-22
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2011
This study was designed to determine the effect of electric field strength, duration and fusion buffer in fusion parameters on the rate of membrane fusion between the somatic cell and cytoplast for Korean cattle (HanWoo) somatic cell nuclear transfer (SCNT) procedure. Following electrofusion, effect of 5 or $10\;{\mu}M$$Ca^{2+}$-ionophore of activation treatment on subsequent development was also evaluated. Cell fusion rates were significantly increased from 23.1% at 20 V/mm to 59.7% at 26 V/mm and 52.9% at 27 V/mm (p<0.05). Due to higher cytoplasmic membrane rupture or cellular lysis, overall efficiency was decreased when the strength was increased to 30 V/mm (18.5%) and 40 V/mm (6.3%) and the fusion rate was also decreased when the strength was at 25 V/mm or below. The optimal duration of electric stimulation was significantly higher in $25\;{\mu}s$ than 20 and $30\;{\mu}s$ (18.5% versus 9.3% and 6.3%, respectively, p<0.05). Two nonelectrolyte fusion buffers, Zimmermann's (0.28 M sucrose) and 0.28 M mannitol solution for cell fusion, were used for donor cell and ooplast fusion and the fusion rate was significantly higher in Zimmermann's cell fusion buffer than in 0.28 M mannitol (91.1% versus 48.4%, respectively, p<0.05). The cleavage and blastocyst formation rates of SCNT bovine embryos activated by $5\;{\mu}M$$Ca^{2+}$-ionophore was significantly higher than the rates of the embryos activated with $10\;{\mu}M$ of $Ca^{2+}$-ionophore (70.0% versus 42.9% and 22.5% versus 14.3%, respectively; p<0.05). This result is the reverse to that of parthenotes which shows significantly higher cleavage and blastocyst rates in $10\;{\mu}M$$Ca^{2+}$-ionophore than $5\;{\mu}M$ counterpart (65.6% versus 40.3% and 19.5% versus 9.7%, respectively; p<0.05). In conclusion, SCNT couplet fusion by single pulse of 26 V/mm for $25\;{\mu}s$ in Zimmermann's fusion buffer followed by artificial activation with $5\;{\mu}M$$Ca^{2+}$-ionophore are suggested as optimal fusion and activation methods in Korean cattle SCNT protocol.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.43
no.3
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pp.349-354
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2014
Elevation of intracellular calcium ($Ca^{{+}{+}}$) triggers degranulation of mast cells by bypassing receptor activation. Flos Sophora japonica L. has been used as a natural dying source and has been reported to have biological activities such as anti-inflammatory and anti-allergic effects through $Fc{\varepsilon}RI$ and IgE crosslinking. In the present investigation, we report the regulatory effect of ethanolic extract of Flos Sophora japonica L. (S.F) on allergic mediators produced by $Ca^{{+}{+}}$ ionophore activation in mast cells. S.F significantly inhibited calcium ionophore (A23187)-induced interleukin (IL)-4 and tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ production as well as mast cell degranulation. Furthermore, administration of S.F suppressed allergic reactions in a 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB)-induced allergic dermatitis mouse model. Both oral administration and ear painting using 50 mg/kg of S.F significantly reduced levels of cytokines such as IL-4, TNF, and interferon-${\gamma}$ in ear tissues compared to the DNFB alone-treated group. Serum IgE level in the S.F-treated group also decreased compared to the DNFB alone-treated group. Weights of spleens and lymph nodes in the S.F-treated groups also decreased compared to the control group. Considering the data, we conclude that S.F mediates its anti-allergic effects not only through $Fc{\varepsilon}RI$ stimulation but also $Ca^{{+}{+}}$ influx in mast cells.
It is crucial to remove trophectoderm (TE) cells of blastocysts for an efficient isolation of pluripotent embryonic stem (ES)-like cells from bovine blastocysts. We evaluated the effectiveness of chemosurgery using calcium ionophore A23l87 (CIPA) by investigating the viability and pluripotency of ES-like cell lines isolated from in vitro-produced bovine blastocysts after CIPA treatment. The blastocysts treated with 50 $\mu$M CIPA for 25 min colonized most efficiently (51% of blastocysts) and developed to ES-like cell lines through 10 passages (4.8% of blastocysts) among CIPA-treated groups with different concentration and duration. In comparison with CIPA-untreated blastocysts, the colonization rate and overall viability of the CIPA-treated blastocysts were five times higher, suggesting that CIPA treatment condition defined in this study was highly efficient for establishing ES-like cell lines without apparent toxicity of CIPA. We evaluated in vitro pluripotency of the established three ES-like cell lines by examining alkaline phosphatase (AP) activity, capability of embryoid body formation, and chromosomal euploidity of the cells. Our cells showed a heterogeneous AP activity similarly to other reports. The cells were able to form simple embryoid bodies during suspension culture and majority of them showed a normal chromosome number of 60, the euploid chromosomal complement of bovine Therefore, our data suggest that CIPA treatment can be safely used for an efficient isolation of ES-like cell lines from bovine blastocysts.
This study was conducted to investigate the optimal condition for produce of large quantity recipient oocytes on porcine cloned embryos. In order to determined the optimum concentration and exposure time of ethanol, $Ca^{2+}$-ionophore, 6-DMAP and cycloheximide, in vitro matured oocytes were activated in TCM-199 containing various chemicals and 15% FBS. The activated oocytes were cultured in Whitten's medium containing 10% FBS at 5% $CO_2$. 1. When the porcine oocytes were activated with the ethanol, the best pronucleus formation, cleavage, and in vitro development rate were obtained in the 10% for 10 minutes, which was significantly higher than all of the other treatment(53.4%, 51.6% and 39.9%, respectively). 2. When the porcine oocytes were activated with the $Ca^{2+}$-ionophore, the pronucleus furmation, cleavage, and in vitro development rate were found significantly higher in the 25$\mu$M fur 2min. treatment than those of other concentration and exposure time(59.7%, 62.2% and 43.9%, respectively). 3. When the porcine oocytes were activated with the 6-DMAP, the best pronucleus formation, cleavage, and in vitro development rate were obtained in the 2mM for 2hr~4.5hr(57.3%, 58.4% and 29.0%, respectively). 4. When the porcine oocytes were activated with the cycloheximide, result showed that pronucleus formation, cleavage, and in vifro development rate were 52.1%, 47.7% and 31.8%, respectively, in the 5$\mu\textrm{g}$/ml for 4hr~6hr treatmrent, which was significantly higher than all of the other treatment. These results suggested that the active condition of porcine oocytes was established by optimum concentration and exposure time among different chemicals for produce of large quantity recipient oocytes.s.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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