엽록체 DNA(trnL-F IGS, trnL intron, trnH-psbA)와 핵 DNA(RNApol2_i23)의 염기서열을 분석하여 둥굴레복합체를 대상으로 계통분류학적 연구를 실시하였다. 유럽산 분류군들은 한 분계조로 뚜렷하게 유집되었고, 이들은 한국산 분류군 중에서 둥굴레, 왕둥굴레, 풍도둥굴레 등과 유집되었다. 풍도둥굴레, 왕둥굴레와 제주산의 둥굴레중 하나가 한 분계조로 유집되어 육지로부터 지리적으로 격리된 섬 지역에서 진행되는 둥굴레로부터의 종분화를 추정해 볼 수 있었다. 둥굴레복합체에 속하는 분류군들은 기본염색체수를 기준으로 2개의 소그룹(x= 9와 x = 10)으로 구분되고 있다. 비록 기본염색체수가 줄어드는 방향으로 진화하는 속 내 분류군들의 진화경향과는 일치하지 않으나, 2개 그룹의 구분에 대해서는 분자적인 자료, 특히 핵 DNA 염기서열 분석결과가 이를 강력하게 지지하였다. 반면에 엽록체 DNA는 분류군을 구분하는 해상도가 낮게 나타났다. 속내 분류군들의 진화나 계통관계를 밝히기 위하여 차후에 좀 더 많은 재료에 대한 세포학적, 형태학적, 지리학적 자료가 축적되어야 할 것이다.
물부추과 ($Iso{\ddot{e}}taceae$)의 물부추속 ($Iso{\ddot{e}}tes$ L.)은 외부형태의 단순함으로 인해 분류학적 혼란이 있어왔다. 국내에는 I. japonica (물부추)와 I. coreana (참물부추)가 보고되어 왔으며, 최근에 I. jejuensis (제주물부추)와 I. hallasanensis (한라물부추)가 신종으로 발표되었다. 그러나 I. japonica의 생육지는 재확인되지 않고 있으며, 이를 제외한 세 종의 생육지만 확인되고 있다. 본 연구에서는 국내의 세 종과 대만 (I. taiwanensis), 일본 (I. japonica와 I. asiatica), 중국 (I. sinensis) 등 주변 지역에 분포하는 물부추속 식물의 형태학적인 특성을 비교 검토하고 국내 물부추속 식물에 대한 분류학적 특성을 규명하고자 하였다. 이를 위하여 각 종에 대한 형태 및 해부학적 특성과 포자의 특성을 비교 검토하였다. 괴경 열편의 수, 포자엽의 습성과 기공의 유무, 포막의 발달 상태로 I. taiwanensis와 I. asiatica가 식별되며, 모든 종은 포자의 특성에 따라 종의 식별이 가능하였다. 특히 국내에 보고된 종은 대포자 표면구조물의 형태에 따라 cristate형의 I. coreana, rugulate형의 I. jejuensis와 echinate형의 I. hallasanensis로 각각 구분되었으며, I. japonica는 reticulate형을 가진 종으로 판명되었다. 그리고, 각 종을 대상으로 핵 유전자인 LEAFY $2^{nd}$ intron의 염기서열과 amplified fragment length polymorphism(AFLP) 분석 결과를 검토하여 우리나라 물부추속 식물에 대한 계통을 논의하였다. 또한, 멸종위기에 처한 우리나라 물부추속 식물을 보전하기 위하여는 새로운 생육지에 대한 발굴조사와 함께 유전적 부동의 영향을 줄이기 위한 보전 대책의 필요성을 제안하였다.
Lymphoid enhancer binding factor 1 (LEF-1) is a member of the T-cell specific factor (TCF) family, which plays a key role in the development of breast endothelial cells. Moreover, LEF-1 gene has been identified as a candidate gene for teat number trait. In the present study, we detected two novel mutations (NC_010450.3:g. 99514A>G, 119846C>T) by DNA sequencing and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism in exon 4 and intron 9 of LEF-1 in Guanzhong Black, Hanjiang Black, Bamei and Large White pigs. Furthermore, we analyzed the association between the genetic variations with teat number trait in these breeds. The 99514A>G mutation showed an extremely significant statistical relevance between different genotypes and teat number trait in Guanzhong (p<0.001) and Large White (p = 0.002), and significant relevance in Hanjiang (p = 0.017); the 119846C>T mutation suggested significant association in Guanzhong Black pigs (p = 0.042) and Large White pigs (p = 0.003). The individuals with "AG" or "GG" genotype displayed more teat numbers than those with "AA"; the individuals with "TC" or "CC" genotype showed more teat numbers than those with "TT". Our findings suggested that the 99514A>G and 119846C>T mutations of LEF-1 affected porcine teat number trait and could be used in breeding strategies to accelerate porcine teat number trait improvement of indigenous pigs breeds through molecular marker assisted selection.
The tapeworm Taenia solium is an important human zoonotic parasite that causes great economic loss and also endangers public health. At present, an effective vaccine that will prevent infection and chemotherapy without any side effect remains to be developed. In this study, codon usage patterns in the T. solium genome were examined through 8,484 protein-coding genes. Neutrality analysis showed that T. solium had a narrow GC distribution, and a significant correlation was observed between GC12 and GC3. Examination of an NC (ENC vs GC3s)-plot showed a few genes on or close to the expected curve, but the majority of points with low-ENC (the effective number of codons) values were detected below the expected curve, suggesting that mutational bias plays a major role in shaping codon usage. The Parity Rule 2 plot (PR2) analysis showed that GC and AT were not used proportionally. We also identified 26 optimal codons in the T. solium genome, all of which ended with either a G or C residue. These optimal codons in the T. solium genome are likely consistent with tRNAs that are highly expressed in the cell, suggesting that mutational and translational selection forces are probably driving factors of codon usage bias in the T. solium genome.
Waterlogging tolerance of corn is one of the important factor for cultivate in paddy soil condition to increase cultivation area and self-sufficiency of corn in Korea. In order to develop elite waterlogging tolerance corn, the new corn lines bred by crossing wild corn, Teosinte, and cultivated corn inbred lines. Five accessions among the 2 species, Zea mays sub spp. mexicana and Zea mays spp. parviglumis, of 81 Teosinte were selected through the waterlogging treatment. The waterlogging treatments were implemented for 7 days at the seedling(V3) stage. The inbred lines were developed by crossing 5 teosinte accessions and cultivated corn lines and they were estimated waterlogging tolerance. It was screened and analyzed the metabolites extracted from roots of 19KT-32(KS141 × teosinte) that was treated waterlogging. We selected 8 of 180 metabolites like as γ-aminobutyric acid(GABA), putrescine, citrulline, Gly, and Ala that expression was remarkably changed over 2.5-times, 7 metabolites increased and 1 metabolite decreased in waterlogging, respectively. Glutamate decarboxylase(GAD) catalyzing GABA accumulation gene have 10 haplotypes, and exon1 was highly conserved, but identified to 135 SNPs after the first intron. Among the 135 SNPs, the number of transversion mutations (52) surpassed the number of transition mutations (38). Most of metabolites were related to abiotic stress in plant that it regulated to pH, osmotic pressure K+/Ca++ and ATPase activity. We are analyzing the association using these results for increase breeding efficiency.
스프레이 국화품종 'Argus'와 감마선 조사에 의해 화색변이가 일어난 돌연변이체의 꽃잎으로부터 안토시아닌 생합성 경로에서 중요한 역할을 담당하는 신규 $DgF3'H$의 전장 cDNA와 genomic DNA를 분리하였다. 전장 cDNA는 1,527bp(509 아미노산)의 ORF를 포함하고 있으며, 원품종 'Argus'와 화색변이체 사이의 염기서열 상동성은 97% 이상을 나타내었다. Genomic DNA의 크기는 야생형 'Argus'에서 3,831bp이었고, 3가지 화색 변이체에서는 3,828부터 3,838bp의 크기를 나타내었다. $DgF3'H$ 유전자는 세 개의 exon사이에 두개의 intron을 갖고 있는 구조이고, 3'과 5' UTR 부분을 제외한 intron의 크기는 야생형 'Argus'에서 2,157bp이지만 3가지 화색 변이체에서는 2,155부터 2,159bp의 크기를 갖고 있었다. 이것은 감마선 조사에 의해 intron 부분의 유전자가 결실 또는 삽입된 것으로 추정된다. Southern 분석 결과 국화의 genome 내에서는 복수의 F3'H 유전자를 갖는 것이 확인되었다. $DgF3'H$ 유전자의 발현 정도를 분석한 결과, 연분홍의 'Argus'와 두 개의 보라색 변이체(AM1 and AM3)에서 높게 발현되었으나 흰색 변이체(AM2)에서는 매우 약하게 발현되었으며, 염기서열 변이에 의한 F3'H 유전자의 구조적 차이가 화색의 변이에 관련된 것으로 추정되었다. 국화 'Argus' 및 화색 변이체를 이용하여 본 연구에서 분리한 신규 F3'H 유전자의 구조 및 유전자 발현 등을 포함하는 유전정보들은 화색 변이의 유전적 기작을 밝히는데 중요한 자료로 이용될 것으로 기대되나 향후 다른 유전적 발현요소들이 국화의 F3'H 유전자의 발현에 관여하는지에 관한 추가적인 연구가 필요하다고 하겠다.
Oviduct-specific glycoprotein 1 (OVGP1) is implicated in playing a role in fertilization and early embryo development. In this study, we have obtained the sequence of intron 9 of OVGP1 gene in swine. Comparative sequencing of Meishan (a native Chinese breed) and Large White pig breeds revealed an A/T substitution at position 943. A PCR-EcoRI-RFLP assay was developed to detect this mutation. Polymorphism analysis in Qingping animals showed that pigs with BB genotype had lower number of piglets born alive (NBA) in multiple parities than pigs with AA (p<0.05) and AB genotype (p<0.01). In Large $White{\times}Meishan$ ($LW{\times}M$) $F_2$ offspring, the weight of both ovaries (OW) of the BB genotype was significantly lighter than that of AB (p = 0.05) and AA (p<0.01) genotypes. Analysis of the data also revealed that the mutation locus affected these two traits mostly by additive effects. These studies indicated that the polymorphism was associated with NBA and OW in two distinct populations and further investigations in more purebreds or crossbreds are needed to confirm these results.
Myotonic Dystrophies type 1 and 2 (DM1/2) are neuromuscular disorders which belong to a group of genetic diseases caused by unstable CTG triplet repeat (DM1) and CCTG tetranucleotide repeat (DM2) expansions. In DM1, CTG repeats are located within the 3' untranslated region of myotonin protein kinase (DMPK) gene on chromosome 19q. DM2 is caused by expansion of CCTG repeats located in the first intron of a gene coding for zinc finger factor 9 on chromosome 3q. The CTG and CCTG expansions are located in untranslated regions and are expressed as pre-mRNAs in nuclei (DM1 and DM2) and as mRNA in cytoplasm (DM1). Investigations of molecular alterations in DM1 discovered a new molecular mechanism responsible for this disease. Expansion of un-translated CUG repeats in the mutant DMPK mRNA disrupts biological functions of two CUG-binding proteins, CUGBP and MNBL. These proteins regulate translation and splicing of mRNAs coding for proteins which play a key role in skeletal muscle function. Expansion of CUG repeats alters these two stages of RNA metabolism in DM1 by titrating CUGBP1 and MNBL into mutant DMPK mRNA-protein complexes. Mouse models, in which levels of CUGBP1 and MNBL were modulated to mimic DM1, showed several symptoms of DM1 disease including muscular dystrophy, cataracts and myotonia. Mis-regulated levels of CUGBP1 in newborn mice cause a delay of muscle development mimicking muscle symptoms of congenital form of DM1 disease. Since expansion of CCTG repeats in DM2 is also located in untranslated region, it is predicted that DM2 mechanisms might be similar to those observed in DM1. However, differences in clinical phenotypes of DM1 and DM2 suggest some specific features in molecular pathways in both diseases. Recent publications suggest that number of pathways affected by RNA CUG and CCUG repeats could be larger than initially thought. Detailed studies of these pathways will help in developing therapy for patients affected with DM1 and DM2.
The purpose of this study was to find any association of the bovine growth hormone (bGH) gene with growth and carcass quality traits in Korean native cattle, Hanwoo. Genomic DNA was extracted from 21 Hanwoo individuals, and the 47 to 2,528 bp region of the bGH 2,856 bp (GenBank accession number M57764) including the promoter and the five exons was sequenced. A total of ten bGH SNPs were confirmed, including four (253 C>T, 303 C>T, 502 C>T, and 559 G>A) in the promoter, one (679 C>T) in exon 1, one (1,692 T>C) in intron 3, and four (2141 C>G, 2258 C>T, 2277 C>T, and 2291 A>C) in exon 5. The ten bGH SNPs were genotyped for a sample of 242 Hanwoo steers and association tests were performed to find any significant SNP that was correlated with growth and carcass quality. Of the SNPs, the 303 C>T SNP in the promoter region was significantly associated with 6-month-old weight, the 559 G>A SNP with longissimus dorsi muscle area, the 2141 C>G SNP in exon 5 with daily weight gain, and the 2258 C>T SNP with daily weight gain and carcass weight (p<0.05). The significant SNPs need to be verified in other Hanwoo populations before considering implementation of marker-assisted selection for genetic improvement of growth and carcass quality in Hanwoo.
VVTL1은 포도 과육에서 특이적으로 다량 발현되는, PR5 계열의 thaumatin과 높은 상동성을 나타내는 단백질로서, 품종에 따라 염기서열의 차이를 나타낸다고 알려져 있다. 현재까지 포도의 VVTL1에 대해서 몇몇 연구가 진행되었지만, 우리나라에서 가장 많이 재배되는 품종인 캠벨에서는 전혀 이루어지지 않았다. 본 연구에서는 캠벨 품종으로부터 VVTL1-homolog 유전자의 게놈 DNA를 분리하여, 염기서열을 분석하였다. VVTL1-homolog 유전자는 일반적으로 PR5 유전자의 구조와 동일한 구조인, intron이 없는 하나의 exon으로만 구성되어 있었다. 염기서열로부터 추론된 VVTL1-homolog 단백질의 아미노산 서열은 VVTL1을 비롯한 다른 품종의 포도에서 분리된 TLP와는 달리 염기성의 등전점을 가지고 있었다. Primer extension 분석을 통해 전사개시 부위를 결정하였고, promoter영역을 포함하는 5'upstream 지역에 전사에 중요한 TATA box (4개)와 CAAT box (1개)가 존재하였으나, 이들의 위치와 수는 다른 PR5 유전자의 promoter와는 다랐다. 이러한 연구결과는 VVTL1-homolog 유전자의 발현이 과육 성숙과정동안 abscisic acid와 스트레스 또는 자극에 의해 발현이 유도되고 있음을 제시해준다. 포도 과육특이발현 promoter인 VVTL1-homolog 유전자의 promoter 분리는, 유전자의 도입에 의해 유용형질을 과육에 나타내는 포도품종을 개발하고자 할 때 효율적으로 사용될 수 있을 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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