Cell growth and ginseng saponin production by large-scale suspension (bioreactor) cultures of Panax ginseng were investigated under various inoculum sizes. Cell growth was low at an inoculum size of 40 g FW/L, and the maximum cell growth was obtained with increasing inoculum size up to 100 g FW/L. The cell density of 333 g FW/L and 12.7 g DW/L was obtained at inoculum size of 100 g FW/L after 30 days of cultivation. Maximum saponin production of $4.40\;\cal{mg/g}$ DW was achieved at 60 g FW/L of inoculum size. Thus, inoculum size 60 g FW/L was suitable for optimum biomass accumulation as well as saponin production during bioreactor cultivation of ginseng suspension cells.
We researched effects of growth on initial inoculum size, liquid volume, and medium feeding rate etc. Cell suspension inoculated at low cell concentrations showed a typical growth reduction, whereas root cultures showed an improvement in growth. In this paper, Hairy roots showed high growth rate at 0.4 % inoculum size and 100 mL liquid volume in 250 mL flask cultures.
본 연구에서는 hGM-CSF 유전자가 도입된 형질전한 담배의 callus를 현탁배양하여 hGM-CSF를 생산할 때에 배양 초기의 세포접종농도와 sucrose의 농도가 hGM-CSF의 생산에 미치는 영향을 확인하고자 하였다. 20, 50, 80, 110 g/L의 초기세포접종농도와 30, 60, 90 g/L의 당의 농도를 서로 조합하여 배양한 결과 모든 처리구에서의 hGM-CSF 생산량은 배양 7일 이후부터 급격하게 감소하였으며, 모든 세포접종농도에서 당의 농도가 높아질수록 hGM-CSF의 생산이 촉진되는 결과를 얻었다. 또한, 서로 다른 당과 세포접종농도의 조합에 따라서 hGM-CSF의 생산량은 현저한 차이를 보여 식물세포 배양을 이용한 외래단백질의 생산에는 당의 농도와 배양초기의 세포접종농도에 크게 영향 받음을 확인하였으며, 최대의 hGM-CSF 생산을 보인 조건은 90 g/L의 당과 110 g/L의 초기세포접종농도로서 약 720 $\mu\textrm{g}$/L의 hGM-CSF를 생산하였다.
A study was carried out to determine a suitable light intensity and inoculum size for the growth of Rhodopseudomonas palustris strain B1. The pollution reduction of sago effluent using free and immobilised R. palustris cells was also evaluated. The growth rate in glutamatemalate medium was highest at 4 klux compared to 2.5 and 3 klux. The optimal inoculum size was 10% (v/v). Both the COD and BOD of the sago effluent were reduced by 67% after three days of treatment. The difference in biomass production or BOD and COD removal with higher inoculum sizes of 15 and 20% was minimal. This could be attributed to limited nutrient availability in the substrate. The use of immobilised cells of R. palustris reduced the pollution load 10% less compared to pollution reduction by free cells. Hence, there was no significant difference in using free or immobilised cells for the treatment of sago effluent.
Pseudomonas elodea ATCC 31461에 의해 생산되는 미생물 다당류인 gellan의 최적 조건을 확립하기 위해 flask상에서 inoculum size, 탄소원 종류 및 농도, 질소원 종류, C/N ratio등을 조사하였다. Gellan 생산을 위한 최적 inoculum size는 5%(v/v)로 나타났으며, 1.0%(w/v)의 glucose에서 2.22의 최대 specific yield 와 $0.03 g/\ell$의 생산성을 얻을 수 있었다. 또한 ammonium nitrate가 없을 때 최대 생산을 얻을 수 있어, gellan 생산을 위해서 nitrogen limitation이 필요함을 알 수 있었다 Glucose와 bactopeptone을 이용하여 C/N ratio를 조사한 결과 20에서 gellan 생산이 가장 높게 나왔다.
To understand effect of inoculum size, cell density, sucrose concentration and concentrations of MS basal on suspension culture and protoplast isolation of wild viola(Viola patrinii DC.) callus from petiole segments this experiment was conducted. In the lot of 30 mesh inoculum size, two observations were; One was that a considerable increase in the fresh and dry weight of callus was determined. Another was that the callus mass was relatively compact compared with others. A recommendable cell density was 0.4g for 20ml culture medium and the higher sucrose concentration, the higher fresh and dry weight were obtained. The dilution of MS basal salt was differently affected on fresh and dry weight; the highest fresh weight was found in 1x MS salt, while the higest dry weight was in 1/3x dilution.The addition of casein hydrolysate(3g/L) was more effective to increase of both fresh and dry weight. THe contents of protein was great in the inoculum lots with larger inoculum sizeand higher concentration of MS basal salts contenting 3g/L of casein hydrolysate and higher sucrose compared with others. The greatest protoplasts were isolated from the lot of 10 mesh size treated with 1%pectinase SE-150 and 2% cellulase YC. In general, for optimal protoplast isolation the followingconditions were recommended; 1) Use of smaller cell size cultured for 2-5 weeks, and 2) more than 5 hours incubation using the combined mixture of the enzymes with proper concentrations.
Demeclocycline 생산균주를 세포 융합하여 얻은 변이주를 이용하여 demethyltetracycline을 생산하기 위한 발효조건에 대해 연구한 결과, 발효 최적온도는 $25^{\circ}C$였고, 초기pH는 6.7였으며 발효기간 중 pH를 일정하게 조절하면 생산성이 저하되었다. 또한 식균량이 많을 수록 초기 당 소모와 점도가 높았는데, 이는 식균량이 증가함에 따라 발효가 급격히 진행됨을 나타냈다. 식균량은 5(v/v)일 때 생산성이 가장 높았으며 전배양 시간과 전배양 pH가 중요한 요인임을 밝혔다.
To maximize and sustain the productivity of Monascus pigments, various environmental and nutritional parameters, such as the initial moisture content, pH, inoculum size, sample size, and nutrient supplement, that influence pigment production were evaluated in solid-state cultures as follows: initial moisture content, $50\%;$ pH, 6.0; inoculum size $1\;\times\;10^4$ spore cells $(grams\;of\;dry\;solid\;substrate)^{-1};$ sample size, 300 g. All supplementary nutrients (carbon, nitrogen, and mineral sources) added has inhibitory effects on the cell growth and red pigment production. In open tray culture the maximum biomass yield and specific productivity of red pigments were 223 mg DCW $(grams\;of\;initial\;dry\;substrate)^{-1}$ and, $47.6\;OD_{500}\;(DCW\;grams)^{-1}h^h{-1}$ respectively.
본 실험은 벼흰빛잎마름병에 대한 저항성계통선발에 필요한 인공접종법 개발을 위해 시도한 것으로서 병원균의 접종농도와 식물체의 노유가 본병의 발전에 미치는 영향에 관해 중점을 두었다. 일정한 환경조건하에서 본병에 대한 식물의 감수성은 식물의 묘령이 어릴 때 일수록 예민하게 나타났으며 식물의 생장과 더불어 점차 둔감해지는 경향이었다. 파종후 14, 37, 48 및 58일째 되는 식물에서 본병에 대한 저항성과 이병성 계통을 선별할 수 있는 병원균의 적정농도는 각각 $10^6,\;10^7,\;10^7-10^{-9}$및$10^9 cells/ml.,$였다. 어린 식물에 대해 지나치게 높은 농도의 접종액은 식물의 품종에 관계없이 단시일에 고사시키는 결과를 초래하였고 묘령이 많은 식물에 대해 일정수준 이하의 세균접종농도를 적용했을 때는 식물의 품종간 특성을 구별할 수 없었다.
한국산 6종의 대두품종 봉의, 황금, 장백, 단엽, 장엽 및 남천을 선정하고 Aspergillus parasiticus NR-RL 2999의 접종량을 다르게 하여($10^2$과 $10^6$) aflatoxin 생성을 검토하였다. 균접종량이 적었을 때$(10^2)$ 대두품종간의 AF 생성량에 현저한 차이가 있어 남천은 봉의의 7배 정도의 AF $B_1$을 생성하였으며, 봉의와 황금이 가장 적은 량의 $AF\;B_1$ (p<0.05)을 생성하였다. 한편 장엽은 가장 많은 양의 $AF\;G_1$ (p<0.05)을 생성하였고, 남천과 장엽은 $AF\;B_1+G_1$을 가장 많이 생성하는 품종이었으며, 이들은 비교군으로 쓰인 쌀보다 70배 정도의 AF을 생성하였다. 소립(小粒) 대두인 단엽과 장백은 $AF\;B_1/G_1$율이 높은 반면 대립(大粒) 대두인 봉의 황금 및 장엽은 낮은 $AF\;B_1/G_1$율을 나타내었다. 균 접종량이 많았을 때는$(10^6)$$10^2$ 때보다 소량의 AF이 생성되었는데 남천이 가장 적은 량의 $AF\;B_1$을 생성하였으나 황금은 가장 많은 량의 $AF\;B_1$을 생성하였다(p<0.05). $AF\;G_1$에 있어서는 황금을 제외하고는 생성량에 있어 품종간의 차이가 없었고 이 경우 AF 생성은 비교군 쌀에서 보다 적은 량이 생성되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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