The importance of biological resources has been gradually increasing, and mollusks have been utilized as main fishery resources in terrestrial ecosystems. But little is known about genomic and transcriptional analysis in mollusks. This is the first report on the transcriptomic profile of Meretrix lusoria. In this study, we constructed cDNA library and determined 542 of distinct EST sequences composed of 284 singletons and 95 contigs. At first, we identified 180 of EST sequences that have significant hits on protein sequences of the exclusive Mollusks database through BLASTX program and 343 of EST sequences that have significant hits on NCBI NR database. We also found that 211 of putative sequences through local BLAST (blastx, E < e-10) search against KOG database were classified into 16 functional categories. Some kinds of immune response related genes encoding allograft inflammatory factor 1 (AIF-1), B-cell translocation gene 1 (BTG1), C-type lectin A, thioester-containing protein and 26S proteasome regulatory complex were identified. To determine phylogenetic relationship, we identified partial sequences of four genes (COX1, COX2, 12S rRNA and NADH dehydrogenase) that significantly matched with the mitochondrial genomes of 3 species-Ml (Meretrix lusoria), Mp (Meretrix petechialis) and Mm (Meretrix meretrix). As a result, we found that there was a little bit of a difference between sequences of Korean isolates and other known isolates. This study will be useful to develop breeding technology and might also be helpful to establish a classification system.
Background : Although the pathophysiology of asthma has been reported, its mechanism has not been fully elucidated. The mast cell is an effector cells in allergic inflammation and secretes a number of chemokines. Chemokines are important for the recruitment of leukocytes to sites of infection, which is essential in host defense. Chemokines also contribute to the pathogenesis of several disorders such as asthma, chronic bronchitis, atopic dermatitis, allergic rhinitis, and rheumatoid arthritis. Objective : In this study, the aim was to identify the effect of Baekryunchihyo-tang(白蓮治哮湯) on expression of chemokines. This was examined by RT-PCR using the human mast cell line (HMC-l) Materials and Methods : HMC-l cells were used, which is known to secrete and express chemokines. In order to investigate the protective effect of Baekryunchihyo-tang(白蓮治哮湯), HMC-l cells were incubated with pretreatment of Baekryunchihyo-tang(白蓮治哮湯) for 24 hrs. RT-PCR analyses of chemokine genes of cells pretreated with Baekryunchihyo-tang(白蓮治哮湯) showed that expressions of IL-8, $MIP-l{\beta}$, and RANTES genes in these cells were lower and $MIP-l{\alpha}$ showed a similar pattern compared to the calcium ionophore-treated group. In addition, cell cytotoxicity concentration measurements were performed by MTT assay method. Results : After stimulation with 1 uM calcium ionophore A23178 for 2 hrs, IL-8, major one of CXC chemokines, was highly expressed, and expression of $MIP-l{\beta}$ and RANTES (CC chemokines) increased, while expression of $MIP-l{\alpha}$ did not change. The cell cytotoxicity of Baekryunchihyo-tang(白蓮治哮湯) with treatments at various concentrations and times was not observed, respectively. Conclusion : This study suggests that Baekryunchihyo-tang(白蓮治哮湯) has dose-dependent effects on mRNA expression of IL-8(CXC chemokines), $MIP-l{\beta}$ and RANTES(CC chemokines) in human mast cellline(HMC-l). So these herbal medicines may inhibit the inflammatory process of asthma. Advanced studies are required to investigate the mechanism of inhibition by herbal medicine in the asthma model. This study provides basic data on the possibility of the clinical treatment of Baekryunchihyo-tang(白蓮治哮湯) for allergic disorders.
Kim, Jin-Young;Kim, Hyun-Joong;Jung, Kwang-Sik;Park, Cheol;Choi, Yung-Hyun;Kam, Cheol-Woo;Park, Dong-Il
The Journal of Internal Korean Medicine
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v.29
no.1
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pp.130-148
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2008
Objective : This study was designed to investigate the effect of the water extract of Gamisamgibopae-tang(GMSGBPT), an oriental herbal formulation, on the growth of NCI-H460 and A549 human non-small-cell lung cancer cell lines. Methods : Cytotoxicity and cell morphology were evaluated by MTT assay and inverted microscope, respectively. Apoptosis was detected using agarose gel electrophoresis and flow cytometer. The expression levels of mRNAs and proteins of target genes were determined by RT-PCR and western blot analyses, respectively Result and Conclusion : We found that exposure of A549 cells to GMSGBPT resulted in the growth inhibition in a dose-dependent manner as measured by MTT assay, but GMSGBPTdid not affect the growth of NCI-H460 cells. The anti-proliferative effect of GMSGBPT treatment in A549 cells was associated with morphological changes, formation of apoptotic bodies and DNA fragmentation, and flow cytometry analysis confirmed that GMSGBPT treatment increased the populations of apoptotic-sub G1 phase. Growth inhibition and apoptotic cell death by GMSGBPT were connected with a up-regulation of cyclin-dependent kinase inhibitor p21 (WAF1/CIP1) mRNA and protein in a tumor suppressor p53-independent fashion. However GMSGBPT treatment did not affect other growth regulation-related genes such as early growth response-1 (Egr-1), nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID)-activated gene-1 (NAG-1), inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenases (COXs), telomere-regulatory factors in A549 orNCI-H460 cells. Taken together, these findings partially provide novel insights into the possible molecular mechanism of the anti-cancer activity of GMSGBPT.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.23
no.3
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pp.645-661
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2009
The water extract of Dohongsamul-Tang(DHSMT) has been traditionally used to stroke and brain injuries in Oriental Medicine. The present study was designed to investigate the effects of DHSMT on the gene expression profile of cerebral infarction by cDNA microarray in photothrombotic ischemia mouse model. Photothrombotic ischemia was induced in stereotactically held male BALB/c mice using rose bengal and cold light. MRI was performed 24 hours after inducing photothrombosis using 1.5 T MRI and 47 mm surface coil to obtain T2-weighted, and contrast-enhanced images. After MRI test, animal was sacrificed and the brain sections were stained for hematoxylin and eosin and immunohistochemistry. MRI and histological analysis revealed that lesion of thrombotic ischemia was well induced in the cortex with the evidence of biological courses of infarction. The target area of thrombotic infarction was 1 mm anterior to bregma and 3 mm lateral to midline with 2 mm in diameter, which were decreased by administration of DHSMT. To assess gene expression pattern of cerebral infarction, mRNA was isolated and reacted with microarray chip(Agilant's DNA Microarray 44K). Scatter and MA plot analysis were performed to clustering of each functional genes. M value [M=log2(R/G), A={log2(R ${\times}$ G)}/2] was between -0.5 and +0.5 with 40% difference. After pretreatment with DHSMT, the expression levels of mRNA of many genes involved in various signaling pathway such as apoptosis, cell cycle, cell proliferation, response to oxidative stress, immune response, angiogenesis, and inflammatory cytokine were markedly inhibited in photothrombotic ischemia lesion compared to the control group. These results suggest that DHSMT prevent ischemic death of brain on photothrombotic ischemia model of mice through modulation of gene expression at the transcriptional level.
Jung, Hae Soo;Song, Mi Young;Kim, Hyoung Sik;Seo, Hyo Hyun;Lee, Jeong Hun;Lee, Kyung Rok;Hong, Il;Moh, Sang Hyun
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.16
no.8
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pp.5452-5457
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2015
Conjugating a phytochemical, a strong antioxidant, with a functional peptide not only compensates for its stability, but also improves its solubility and anti-wrinkle effects, thereby contributing to the possibility of becoming an excellent cosmetic ingredient. Thus, in this study we examined the potential cosmetic use of a phytochemical-peptide derivative using gallic acid, a phytochemical with antioxidant, anti-inflammatory, and anti-cancer effects. To evaluate the antioxidant and wrinkle-improving efficacy of 5 synthesized gallic acids conjugated with LVH, IVH, KTTKS, YGGFM, and YGGFLRKYP respectively, we observed the expression of genes related to wrinkle improvement using DPPH radical scavenging activity and real-time PCR. As a result, all 5 derivatives had excellent free radical scavenging effects. The expression level of genes involved collagen synthesis also increased, and the secreted peptides during collagen production contributed to their antioxidant and wrinkle improving effects. These results mark the potential use of gallic acid peptide derivatives as a cosmetic ingredient for anti-oxidation and wrinkle improvement.
Pronase, a protease produced for commercial purpose by Streptomyces griseus, was composed of serine protease, alkaline protease, aminopeptidase and carboxypeptidase complex, and it has been widely used as anti-inflammatory drugs for human therapy. In this study, we developed a new integration vector, pHJ101 derived from pSET152, containing strong promoter, ermE, to overexpress a certain protease gene. Specific PCR primers for cloning of sprA (a gene for S. griseus protease A) and sprB (a gene for S. griseus protease B) genes were designed from the basis of nucleotide sequence in databases and amplified by PCR. Plasmid pHJ201 and pHJ202 were constructed by inserting of amplified each gene in a vector pHJ101. S. griseus HA and S. griseus HB were respectively obtained by conjugal process of a parent strain, S. griseus IFO 13350 with the recombinant Escherichia coli harboring plasmid pHJ201 or pHJ202. When protease activity was measured in flask cultivation, produced protease levels of S. griseus HA and S. griseus HB increased about 5.3 times and 5 times, respectively, more than that of parent strain. And, the constructed integrating plasmid pHJ101 was applicable for overexpression of a certain gene in Streptomyces sp.
Rice (Oryza sativa L.) is one of the major cereal crops for consumption by the world’s population. Recently, various colored rice, such as white, red, brown, green, and black rice, have caught the attention of world consumers. The commercial name ‘black rice’ contains a high amount of anthocyanins in pericarp, which increases nutritional value. Moreover, anthocyanin in black rice possesses biomedical properties, including anti-oxidant, anti-cancer, and anti-inflammatory effects in humans. In genetics, black rice has a dominant PURPLE PERICARP (Prp) trait governed by two genes, Pb and Pp, which are involved in the synthesis of cyanidin-3-O-glucoside (C3G). Since the publication of a report by Nagai at 1921, the genetics and physiological studies of black rice driven by Prp traits are still unable to understand the relevant genes and their roles. However, with the increased demand for anthocyanin-rich black rice as a functional food for human health, it has become urgent to develop highyielding anthocyanin-rich varieties of rice. We explored many years in the genetics of purple pericarp trait, anthocyanin biosynthesis in pericarp during seed development, and, consequently, their products in relation to different physiological and agronomic traits. In this review, we summarized the anthocyanin biosynthesis in pericarp, emphasizing the inheritance pattern of the trait and functions of their products on different physiological and agronomic traits, including the yield of black rice.
To evaluate the effects of lactic acid bacteria (LAB) on Peyer's patch cells, mice were treated with a high dose of kanamycin to disturb the gut microbial environment. The overarching goal was to explore the potential of LAB for use as a dietary probiotic that buffers the negative consequences of antibiotic treatment. In vitro, LAB stimulated the production of immunoglobulin A (IgA) from isolated Peyer's patch cells. Inflammation-related genes (TNF-α, IL-1β, and IL-8) were up-regulated in Caco-2 cells stimulated with lipopolysaccharide (LPS), while tight-junction-related genes (ZO-1 and occludin) were down-regulated; the effects of LPS on inflammatory gene and tight-junction gene expression were reversed by treatment with LAB. Mice treated with a high dose of kanamycin showed increased serum IgE levels and decreases in serum IgA and fecal IgA levels; the number of Peyer's patch cells decreased with kanamycin treatment. However, subsequent LAB treatment was effective in reducing the serum IgE level and recovering the serum IgA and fecal IgA levels, as well as the number of Peyer's patch cells. In addition, ZO-1 and occludin mRNA levels were up-regulated in the ileum tissues of mice receiving LAB treatment. Lactic acid bacteria can enhance the intestinal immune system by improving the integrity of the intestinal barrier and increasing the production of IgA in Peyer's patches. Lactic acid bacteria should be considered a potential probiotic candidate for improving intestinal immunity, particularly in mitigating the negative consequences of antibiotic use.
Saprolegniasis is one of the most devastating oomycete diseases in freshwater fish which is caused by species in the genus Saprolegnia including Saprolegnia parasitica. In this study, we isolated the strain of S. parasitica from diseased rainbow trout in Korea. Morphological and molecular based identification confirmed that isolated oomycete belongs to the member of S. parasitica, supported by its typical features including cotton-like mycelium, zoospores and phylogenetic analysis with internal transcribed spacer region. Pathogenicity of isolated S. parasitica was developed in embryo, juvenile, and adult zebrafish as a disease model. Host-pathogen interaction in adult zebrafish was investigated at transcriptional level. Upon infection with S. parasitica, pathogen/antigen recognition and signaling (TLR2, TLR4b, TLR5b, NOD1, and major histocompatibility complex class I), pro/anti-inflammatory cytokines (interleukin $[IL]-1{\beta}$, tumor necrosis factor ${\alpha}$, IL-6, IL-8, interferon ${\gamma}$, IL-12, and IL-10), matrix metalloproteinase (MMP9 and MMP13), cell surface molecules ($CD8^+$ and $CD4^+$) and antioxidant enzymes (superoxide dismutase, catalase) related genes were differentially modulated at 3- and 12-hr post infection. As an anti-Saprolegnia agent, plant based lawsone was applied to investigate on the susceptibility of S. parasitica showing the minimum inhibitory concentration and percentage inhibition of radial growth as $200{\mu}g/mL$ and 31.8%, respectively. Moreover, natural lawsone changed the membrane permeability of S. parasitica mycelium and caused irreversible damage and disintegration to the cellular membranes of S. parasitica. Transcriptional responses of the genes of S. parasitica mycelium exposed to lawsone were altered, indicating that lawsone could be a potential anti-S. parasitica agent for controlling S. parasitica infection.
Jung, Hee Jin;Bang, EunJin;Jeong, Seong Ho;Kim, Byeong Moo;Chung, Hae Young
Journal of Life Science
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v.29
no.9
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pp.964-971
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2019
Hepatic lipid accumulation and insulin resistance increases in patients with non-alcoholic fatty liver disease. Piperine is a major compound found in black pepper (Piper nigrum) and long pepper (P. longum). Piperine has been used in fine chemical for its anti-cancer, anti-obesity, anti-diabetic, anti-inflammatory and anti-oxidant properties. However, the signaling-based mechanism of piperine and its role as an inhibitor of lipogenesis and insulin resistance in human hepatocyte cells remains ill-defined. In the present study, we explored the effects of piperine on lipid accumulation and insulin resistance, and explored the potential underlying molecular mechanisms in palmitate-treated HepG2 cells. Piperine treatment resulted in a significant reduction of triglyceride content. Furthermore, piperine treatment decreased palmitate-treated intracellular lipid deposition by inhibiting the lipogenic target genes, sterol-regulatory-element-binding protein 1c (SREBP-1c) and fatty acid synthase (FAS); whereas the expression of carnitine palmitoyl transferase (CPT-1) and phosphorylation of acetyl coenzyme A carboxylase (ACC) gene involved in fatty acid oxidation was increased. Moreover, piperine also inhibited the phosphorylation of insulin receptor substrate (IRS)-1 (Ser307). Piperine treatment modulated palmitate-treated lipid accumulation and insulin resistance in HepG2 cells with concomitant reduction of lipogenic target genes, such as SREBP-1 and FAS, and induction of CPT-1-ACC and phosphorylation of IRS-1 (Tyr632)-Akt pathways. Therefore, piperine represents a promising treatment for the prevention of lipid accumulation and insulin resistance.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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