Park, Eun-Hee;Lee, Dae-Hee;Seo, Jin-Ho;Kim, Myoung-Dong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권3호
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pp.277-283
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2011
Glyoxalase I catalyzes the conversion of methylglyoxal to S-D-lactoylglutathione in the presence of glutathione. The structural gene of glyoxalase I (GLO1) was cloned from an osmotolerant yeast, Candida magnoliae, which produces a functional sweetener, erythritol, from sucrose. DNA sequence analysis revealed that the uninterrupted open reading frame (ORF) of C. magnoliae GLO1 (CmGLO1) spans 945 bp, corresponding to 315 amino acid residues, and shares 45.2% amino acid sequence identity to Saccharomyces cerevisiae Glo1. The cloned ORF in a multicopy constitutive expression plasmid complemented the glo1 mutation of S. cerevisiae, confirming that it encodes Glo1 in C. magnoliae. The responses of CmGLO1 to environmental stresses were different from those of S. cerevisiae, which only responds to osmotic stress. An enzyme activity assay and reverse transcription polymerase chain reaction revealed that the expression of CmGLO1 is induced by stress inducers such as methylglyoxal, $H_2O_2$, KCl, and NaCl. The GenBank Accession No. for CmGLO1 is HM000001.
A simple whole-cell-based sensing system is proposed for determining the cell mass of H. pluvialis using ultraviolet fluorescence spectroscopy. An emission signal at 368 nm was used to detect the various kinds of green, green-brown, brown-red, and red H. pluvialis cells. The fluorescence emission intensities of the cells were highest at 368 nm with an excitation wavelength of 227 nm. An excitation wavelength of 227 nm was then selected for cell-mass sensing, as the emission fluorescence intensities of the cell suspensions were highest at this wavelength after subtracting the background interference. The emission fluorescence intensities of HPLC-grade water, filtered water, and HPLC-grade water containing a modified Bold's basal medium (MBBM) were measured and the difference was less than 1.6 for the selected wavelengths. Moreover, there was no difference in the emission intensity at 368 nm among suspensions of the various morphological states of the cells. A calibration curve of the fluorescence emission intensities. and cell mass was obtained with a high correlation ($R^2=0.9938$) for the various morphological forms of H. pluvialis. Accordingly, the proposed method showed no significant dependency on the various morphological cell forms, making it applicable for cell-mass measurement. A high correlation was found between the fluorescence emission intensities and the dry cell weight with a mixture of green, green-brown, brown-red, and red cells. In conclusion, the proposed model can be directly used for cell-mass sensing without any pretreatment and has potential use as a noninvasive method for the online determination of algal biomass.
In this study, the acidic lipase from Aspergillus niger (ANL) was homologously expressed in A. niger. The expression of ANL was significantly improved by the expression of the native ANL with the introns, the addition of the Kozak sequence and the optimization of the signal sequences. When the cDNA sequence of ANL fused with the glaA signal was expressed under the gpdA promoter in A. niger, no lipase activity could be detected. We then tried to improve the expression by using the full-length ANL gene containing three introns, and the lipase activity in the supernatant reached 75.80 U/ml, probably as a result of a more stable mRNA structure. The expression was further improved to 100.60 U/ml by introducing a Kozak sequence around the start codon due to a higher translation efficiency. Finally, the effects of three signal sequences including the cbhI signal, the ANL signal and the glaA signal on the lipase expression were evaluated. The transformant with the cbhI signal showed the highest lipase activity (314.67 U/ml), which was 1.90-fold and 3.13-fold higher than those with the ANL signal and the glaA signal, respectively. The acidic lipase was characterized and its highest activity was detected at pH 3.0 and a temperature of 45℃. These results provided promising strategies for the production of the acidic lipase from A. niger.
Fundamental advances in the biotechnologies are exerting a profound influence on the health care, agricultural, industrial chemical, environmental, and other industrial fields. Korean government are now more and more realizing the importance of biotechnology as a main technology for the 21st century. But any technical progress is largely the result of a complex set of relationships among the firms, institutions and others involved in development. So understanding the complexity is very important to make promoting strategies and it is even critical in the field of biotechnology. The reason is that commercialization of research results in biotechnology is strongly related with the national science bases provided by academic and public institutes. And its applicable industrial sectors are very diverse. So it is very important to make a effective collaboration system among many R&D related agents. This article discusses and compares both USA and Japanese framework of national innovation systems in the field of biotechnology. The American Innovation system encourages basic research in the biological sciences, and fosters the creation of small venture firms that focus on the development of novel products. America's peculiar incentive structure, derived from its research and educational system, financial system, and regulatory environment has driven USA labs and firms to the forefront of many biotechnology fields. The Japanese institutional environment in contrast, supported the strategy of building production expertise. Firms were urged to use the new techniques as a way of leapfrogging into a second generation of bio-products, in that cost and production advantages count. But the strategy was not effective as expected and Japanese firms have remained competent but not prominent rivals. The differing situations in USA and Japan with regard to biotechnology have many suggestions for our bioindustry. In the conclusion of this article, we translate USA and Japan's experiences to some suggestions which guide for promoting Korea's biotechnology R&D and commercialization activities.
영지버섯(Ganoderma lucidum WK-003) 균사체의 액체 배양에 의하여 세포외 생물고분자 물질의 산업적 생산을 위한 최적 조건을 검토하였다. 세포외 고분자물질 생산을 위한 산업용배지의 최적 농도는 molasses 5%와 CSL 2.5%에서 균사체 생장(12.4 g/l)과 균체외 다당체 생산(3.6g/l)이 최대를 나타났으며, 5 l 발효조 배양시에는 균사체 생장이 합성배지(8.1g/l)일때가 산업용배지(7.3 g/l)보다 높게 나타났으나, 균체외 다당체 생산은 합성배지(7.2 g/l)보다 산업용 배지(11.2 g/l)일 때가 더 높게 나타났다. 간 보호 효과는 합성배지와 최적화된 산업용 배지에서 생산된 균체외 다당체를 $CCl_4$ 독성이 유발된 rat에 경구 투여하였을 때 주요 지표를 나타내는 GPT활성은 산업용배지에서 생산된 균체외 다당체 인 경우 704IU/L에서 356IU/L로 낮추었으며, 합성배지에서 생산된 균체외 다당체는 704IU/L에서 349IU/L로 낮춘 결과를 보였다. 따라서 합성배지와 산업용 배지에서 생산된 균체외 다당체의 간 보호 작용은 거의 차이가 없는 것으로 나타났다.
This review aims to show that industrial sustainable chemistry, minimizing or reducing the ecological impacts by the chemicals, is not an emerging trend, but is already a reality through the application of 'White Biotechnology' such as 'green' chemistry and engineering expertise. A large number of current industrial case studies are presented, as well as new developments from the chemical industry. The case studies cover new chemistry, new process design and new equipment. By articulating the requirements for industrial application of sustainable chemistry, this review also seeks to bridge any existing gap between academia and industry regarding the R & D and engineering challenges needed to ensure green chemistry research enables a more sustainable future chemical industry considering eco-toxicological impacts.
Previous studies have addressed the management of phyllosphere pathogens by leaf and root-associated microbes. The present study evaluated the effect of the foliar application of three strains of Bacillus spp. on plant growth and fruit quality. The application of a bacilli spore preparation significantly improved leaf growth parameters such as leaf thickness and photosynthesis capacity, indicating that bacilli treatment directly promoted leaf growth. In addition, foliar treatment resulted in an improvement in the key indicators of fruit quality including water, glucose, and sucrose contents. The present results suggest that foliar spraying of beneficial bacilli is a potential treatment of wide application for the improvement of apple quality. Foliar application of bacilli preparation as effective plant growth-promoting rhizobacteria broadens the spectrum of their availability for orchard application.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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