We investigated the protein productivity of the promoters for genes showing prolonged induction upon cold shock in Escherichia coli. Six low temperature inducible genes (frdA, glpB, hypB, katG, nupG, ompT) were selected based on the previously reported cDNA microarray based global transcription profiling of Escherichia coli Kl2 in response to cold shock. Their promoter regions were isolated from the genomic DNA of E. coli JM109 and expression levels induced by the promoters were examined by using green fluorescence protein (GFP) as a reporter at $15^{\circ}C$ and $37^{\circ}C$. Among the six promoters, the promoter for nupG showed the highest and prolonged expression at both temperatures and the cold inducibility of nupG promoter was not observed.
Kim, Woo-Jin;Lee, Jeong-Ho;Kim, Kyung-Kil;Park, Jung-Youn;Kang, Ho-Sung;Kim, Han-Do
Journal of Aquaculture
/
v.12
no.3
/
pp.175-183
/
1999
We have shown previously that the sequence of olive flounder (Paralichthys olivaceus) hsp70-related cDAN has a high similarity with those of cognate hsc70 of other species (Kim et al., 1999; J. Aquaculture, 12:91-100). In order to investigate whether this gene encodes the congate hsc70, we examined the expression of this gene in normal and heat-shocked conditions. By in vitro translation, this gene encoded a 70 kD protein which was constitutively experessed and was not induced by heat shock. This translated protein was recognized by anti-hsp/hsc70 antibody. Tests of heat-inducibility showed that this gene was constitutively expressed in normal conditions and its expression was not increased after heat shock. The expression levels of this gene were high in stomach, gill, intestine, kidney and brain, moderate in liver, and comparatively low in overy and heart. Furthermore, Northern blot analysis of transcript expression showed that the corresponding mRNA were detected throughout embryonic development in the absence of any heat shock. These results provided evidence that olive flounder hsp70-related cDNA encoded to cognate member of hsp70 family, hsc70.
Five human cancer cell lines (HeLa S3, Hep 3B, KATO III, Hs 683, HeLa MR) and one human normal cell line (WI-38) were examined cell viability, northern blot analysis, western blot analysis, and in situ hybridization for the expression $O_{6}$ -methylguanine-DNAmethyltransferase (MGMT), which can repair $O_{6}$ -methylguanine produced in DNA by alkylating agents. In cell viability test, the lethal sensitivities of each strain against anti-tumor drug N,N-bis(2-chloroethyl)- N-nitrosourea (BCNU) were counted, and both BCNU treated and untreated cell extracts were examined for their MGMT inducibility by RNA dot blot analysis. Cell lines did not show MGMT induction by BCNU pretreatment. Tlle MGMT activity was assayed by measuring the $^3$H radioactivity transferred from the substrate DNA containing [methyl-$^3$H)-O$_{6}$ -methylguanine to acceptor molecules in the cell extracts. Extracts from the majority of tumor strains and normal cells contained substantial MGMT activity of varying degree, while the known Mer$^{[-10]}$ cell (lacked or severely depleted in MGMT activity) Hela MR, and Hs 683 (proved to be Mer$^{[-10]}$ ) were much more sensitive to BCNU than the rest of tumor strains, as measured by cell viability test. Overall results above, KATO III showed the highest expression level of MGMT among the strains examined. Furthermore, with all the tumor and normal strains tested, a good correlation was observed between MGMT expression and cellular resistance to BCNU. The varying levels of expression of MGMT in human cancer cells found in this study should provide a molecular basis for MGMT expression among tumor strains from different tissue origin, the information of antitumor agents selection for chemotherapy of cancers.
The SNF2/SW12 family comprises proteins from a variety of species with in vivo functions, such as transcriptional regulation, maintenance of chromosome stability during mitosis, and various types of DNA repair. This study was shown the characterization of hrp2+ gene which was isolated by PCR amplification using the conserved domain of SNF2 motifs. Sequence analysis of hrp2+ gene showed striking evolutionary conservation among the SNF2 family of proteins. The transcript of hrp2+ gene was found to be a 4.7 kb as identified by Northern hybridization. To investigate the inducibility of hrp2+ gene, transcript levels were examined after treating the cells to various DNA damaging agents. The transcripts of hrp2+ were induced by UV-irradiation. But the transcripts were not induced by treatment of $ 0.25\%$ Methylmethane sulfonate (MMS). These results implied that the effects of damaging agents are complex and different regulatory pathways exist for the induction of this gene. Hrp2 protein was purified near homogeneity by combination of affinity chromatography. We tested the purified Hrp2 protein for the helicase activity in an oligonucleotide release assay. However we were unable to detect any helicase activity associated with the Hrp2 protein, indicating that the helicase motifs in Hrp2 are merely indicators of a broader DNA-dependent ATPase activity.
Kim, Ki-Woong;Kang, Seung-Kyu;Cho, Young-Sook;Lee, Sei-Hui;Moon, Young-Hahn;Choi, Byung-Soon;Park, Sang-Shin
Journal of Preventive Medicine and Public Health
/
v.28
no.1
s.49
/
pp.141-152
/
1995
This study was performed to find out the influences of ethanol on the metabolism of trichloroethylene(TRI) in rats. TRI in corn oil at the dosage of 150, 300, 600 mg/kg was injected peritoneally once a day for two days to two groups. In one group ethanol(4 g/kg) was taken orally 30 minutes before TRI injection, and the other group ethanol was not. The results of experiments are as follows: 1. The contents of cytochrome P-450 and $b_5$ had inverse relationship with in-jected TRI amounts in both groups. 2. The activity of NADPH P-450 reductase was decreased slowly in TRI injected group related with TRI amount, but decreased drastically in the group pretreated with ethanol. 3. The activity of NADH $b_5$ reductase had relationship with injected nt amount , but the statistical significance was found only in the groups of 300 and 600 mg/kg of TRI injected without relevance to ethanol when compared with the group that was not injected. 4. The activity of ADH was more decreased and ALDH activity was more increased in groups that TRI injected and ethanol was pretreated with ethanol groups than in group without any treatment. These results suggest that ethanol may inhibit epoxide formulation, the first step of TRI metabolism, and change from TCE-OH to TCA also.
A simple and easy modification of AST by disk diffusion was tested for the detection of induced clindamycin resistant Staphylococci and their antimicrobial susceptibility at the same time. The incidence of inducible clindamycin resistant staphylococci in blood culture and their MIC characterization at Seoul National University Hospital was analyzed by an AST contained disk approximation test (D-zone test) and Etest, respectively. Of the total 309 staphylococcal isolates, 139 (45%) isolates presented constitutive resistance to ERY and CLI (ERY-R, CLI-R phenotype), and 59 were ERY-I/R and CLI-S phenotypes. Of the 59 isolates, 19 (32%) isolates were inducible resistant to CLI. The incidence was higher in S. aureus (66.7%) than coagulase-negative staphylococci (CNS, 26.0%). Especially, methicillin-resistant staphylococci (MRSA, 100%; MRCNS, 45.5%) presented higher inducibility than methicillin susceptible (MSSA, 50%; MSCNS, 20%). For most of the inducible clindamycin resistant staphylococci (15 of 19 isolates), their ERY MIC were high (>$128_{\mu}g/mL$) and were methicillin resistant. The remaining 4 isolates were methicillin susceptible and their ERY MIC were of intermediate concentrations ($1-4_{\mu}g/mL$). We concluded that suscetibility testing of staphylococci, especially methicillin resistant, should include the D-zone test.
Kim, Minjae;Kim, Jongrae;Kim, Sanghee;Jin, EonSeon
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.30
no.11
/
pp.1777-1784
/
2020
To increase the availability of microalgae as producers of valuable compounds, it is necessary to develop novel systems for gene expression regulation. Among the diverse expression systems available in microalgae, none are designed to induce expression by low temperature. In this study, we explored a cold-inducible system using the antifreeze protein (AFP) promoter from a polar diatom, Chaetoceros neogracile. A vector containing the CnAFP promoter (pCnAFP) was generated to regulate nuclear gene expression, and reporter genes (Gaussia luciferase (GLuc) and mVenus fluorescent protein (mVenus)) were successfully expressed in the model microalga, Chlamydomonas reinhardtii. In particular, under the control of pCnAFP, the expression of these genes was increased at low temperature, unlike pAR1, a promoter that is widely used for gene expression in C. reinhardtii. Promoter truncation assays showed that cold inducibility was still present even when pCnAFP was shortened to 600 bp, indicating the presence of a low-temperature response element between -600 and -477 bp. Our results show the availability of new heterologous gene expression systems with cold-inducible promoters and the possibility to find novel low-temperature response factors in microalgae. Through further improvement, this cold-inducible promoter could be used to develop more efficient expression tools.
The marine medaka Oryzias dancena choriogenin H gene (odChgH) and its mRNA expression during estradiol-$17{\beta}$ (E2) exposure were characterized. At the amino acid level, the choriogenin H protein is predicted to possess the conserved repetitive N-terminal region, as well as zona pellucida (ZP) and Trefoil factor family (TFF) domains. At the genomic level, odChgH has an eight-exon organization with a distribution pattern of transcription factor binding sites in the 5'-upstream region, which is commonly found in other estrogen-responsive genes. The tissue distribution pattern of odChgH mRNA was found to be gender-specific, whereby females showed a higher expression level and wider tissue distribution than did males. During embryonic development, odChgH mRNA was robustly detected from the stage of visceral blood vessel formation. Experimental E2 exposure of males resulted in odChgH mRNA being induced not only in the liver, but also in other several tissues. The E2-mediated induction was fairly dose-dependent. The basal expression levels of hepatic odChgH mRNA were lower in males that were acclimated to 30 ppt salinity than in those acclimated to 0 or 15 ppt salinity. In contrast, the inducibility of odChgH mRNA during E2 exposure was greater in seawater-acclimated fish than in brackish water- or freshwater-acclimated fish.
Development of symbiotic root nodules in legumes involves the induction and repression of numerous genes in conjunction with changes in the level of phytohormones. We have isolated several genes that exhibit differential expression patterns during the development of soybean nodules. One of such genes, which were repressed in mature nodules, was identified as a putative aldo/keto reductase and thus named Glycine max aldo/keto reductase 1 (GmAKR1). GmAKR1 appears to be a close relative of a yeast aldo/keto reductase YakC whose in vivo substrate has not been identified yet. The expression of GmAKR1 in soybean showed a root-specific expression pattern and inducibility by a synthetic auxin analogue 2,4-D, which appeared to be corroborated by presence of the root-specific element and the stress-response element in the promoter region. In addition, constitutive overexpression of GmAKR1 in transgenic soybean hairy roots inhibited nodule development, which suggests that it plays a negative role in the regulation of nodule development. One of the Arabidopsis orthologues of GmAKR1 is the ARF-GAP domain 2 protein, which is a potential negative regulator of vesicle trafficking; therefore GmAKR1 may have a similar function in the roots and nodules of legume plants.
목재부후균으로 부터 락케이스 효소의 생산 및 유도를 위하여 여러가지 유도약품(inducer)을 사용하였다. 이들 가운데 ferulic acid, pentachlorophenol 및 2,5-xylidine이 매우 높은 락케이스 활성을 나타나게 하였으며, 거의 동일한 유도효과를 보여주었다. 이들 약품 이외에도 sinapic acid, syringic acid 및 coffeic acid 등도 높은 락케이스 활성을 주었는데, 산의 형태가 알데히드류보다도 높은 유도효과를 나타냈다. 그리고 실험한 48개 균주 가운데 38개 균주가 락케이스를 생산하였으며, 이 가운데 32균주가 ferulic acid에 의해 강한 효소유도 활성을 보였다. 이러한 결과는 지금까지 락케이스 효소의 검출이 어려웠던 Abortiporus biennis 및 Gleophyllum odoratum에서도 높은 락케이스 효소의 유도를 가능하게 하였다. 아울러 가장 높은 효소활성을 나타낸 균주로서는 Cerrena unicolor 였으며, 그 락케이스 효소활성이 무처리 및 inducer 첨가시 각각 40,000 및 60,000 nkat/l 정도였다.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.