장미 기내 신초 생육을 촉진시키고자 액체배지 첨가 실험을 실시하였다. 국립원예특작과학원 육성 신품종 '엔텍컬', '샤이니오렌지', '화이트젠', '레드젠' 등 4품종의 internode를 기내 도입한 후, 2회의 계대배양에 의해 신초를 증식하였다. 10~15 mL의 액체배지 첨가에 의해 4품종 모두 신초의 신장이 촉진되었고, 증식력에 있어서는 품종간 차이를 보였다.
Presently, we report a simple, reproducible and high frequency plant regeneration in Hibiscus syriacus L. using axillary buds. H. syriacus was regenerated from axillary buds directly or through a callus phase. Regenerated shoots were directly induced from young and fresh axillary buds cultured on Murashige and Skoog medium (MS) supplemented with 0.01 mg/L of the growth regulator thidiazuron (TDZ) after 2 weeks of culture. Directly induced shoots were transferred to hormone-free MS medium and root development was observed after 6 weeks. On the other hand, old and stale axillary buds were regenerated to shoots via callus induction on MS medium containing 0.01–2 mg/L TDZ after 4 weeks. A TDZ concentration of 0.01 mg/L was most effective in callus formation. Green callus was transferred to MS medium containing 0.01 mg/L α-naphthalene acetic acid (NAA) and 0.5 mg/L benzylaminopurine (BA). After 4 weeks, callus had developed into multiple shoots. Plantlets were formed from 10 week cultures of single shoots on hormone-free MS medium. Regenerated plantlets were cultured on MS medium for one month and then transferred to pots containing garden soil. Potted plants were acclimatized for one month and grown to maturity under greenhouse conditions. The present study has shown that various concentrations of plant growth regulator can be effective for in vitro plant regeneration of H. syriacus. The direct and indirect regeneration protocol presented here will be useful for understanding the manipulation and propagation of H. syriacus.
백리향(Thymus quinquecostatus Celak.)의 기내번식 방법을 개발하기 위해 줄기증식에 미치는 싸이토키닌 효과를 조사하였다. 시료식물은 MS배지에 thidiazuron등 5종의 싸이토키닌을 단독 또는 혼합 처리하여 광배양 또는 암배양 조건에서 식물체 증식을 유도하였다. 백리항의 대량증식에 효과적인 cytokinin종류와 농도는 명배양시 줄기수에 있어서 BA 1.0+TDZ 0.1mg/L (6.50$\pm$1.51) 였고, 신초의 길이는 zeatin 2.0+TDZ 0.1mg/L(3.27$\pm$0.7)가 최적 조건이었다. 또한 암배양시 줄기수의 경우엔 처리간에 별다른 차이 없이 비슷한 경향을 나타낸 가운데 2-ip 2.0mg/L로 처리하였을 때가 가장 뛰어났고, 줄기의 신장은 zeatin 2.0mg/L일 때가 가장 효과적이었다. 전체적으로 기내에서 대량증식율은 평균 89.58%로 비교적 대부분의 시료에서 식물체가 유도되었다.
An efficient system for the regeneration of adventitious shoots from in vitro cultured leaf sections of Lycium chinense Miller was developed and silent somaclones from the regenerants detected with RAPD method. Among the eight media tested (B5, SH, N&N, 1/2MS, MS, 3/2MS, GD and WPM), and four cytokinins (BA, kinetin, 2ip and zeatin) with different concentrations (1, 5, 10, 20, 30 and 40 $\mu{M}$), 1/2 MS medium supplemented with 20 and 30 $\mu{M}$ zeatin showed the best regeneration frequency (100% and 93.7%) and higher average number of shoots (9.0 and 9.4). All regenerants easily elongated after subculturing on 1/4MS without growth stimulants and produced spontaneous adventitious roots from their basal parts. With phenotypically normal 40 regenerants, RAPD analysis with 15 different random primers was performed to examine the cryptic somaclonal variants. No substantial differences in banding patterns were found in the amplified polymorphic DNAs implying no DNA changes during dedifferentiation into adventitious shoots. However, one (OPF-4) of the 15 primers detected silent somaclonal variation in one regenerant in which two different polymorphic bands did not appear when compared with the rest regenerants. The results indicate that regenerantion via intervening callus phase can be used to establish true-to-type planting stocks for homogeneous population.
Freesia has been an important worldwide cut flower because of its fragrance, long vase life and the wide color range of the flower. The conventional propagation methods by seeds and corms have many disadvantages such as shorter inflorescences with fewer numbers of florets, a reduction in cut flower quality and the accumulation of plant viruses in corms by successive cultivation. Therefore, the conventional propagation systems in Freesia needs to be replaced with tissue cultures to overcome the disadvantages. This study explored an efficient multiplication protocol using the combination of plant growth regulators (PGRs) for developed cultivar 'Sunny Gold'. The combination between 6-benzylaminopurin (BA) and α-naphthalene acetic acid (NAA) did not produce new shoots but developed enlarged roots. BA only treatments and the combination between BA and kinetin treatments were effective on shoot multiplication. The highest average number of shoots was 5.3 in the presence of 3 mg/L BA and 0.5 mg/L kinetin. To produce corms and cormlets, proliferated shoots were subcultured on 1/2 Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 90 g/L sucrose, 1 g/L charcoal and 7 g/L plant agar and placed at 4℃ in the dark for 6 months. The small size of corms and comlets were produced. The average number of regenerated comlets was 2.75 per shoot. The results showed that shoot multiplication is more efficient than cormlet regeneration for in vitro freesia proliferation.
Haloxylon recurvum (Locally known as Khar) is drought and salt tolerant plant of Thar Desert. This plant is a major biomass producer and has economic and ecological importance for the region. There is need for study on biology, propagation and genetic improvement for utilization of this plant for reclamation of saline soils. We report here on in vitro propagation of Haloxylon recurvum (Moq.) using nodal explant. Secretion of phenolic compound from explants was a major constraint for establishment of culture. This was checked by thorough washing and quick transfer of explant on fresh culture medium. Juvenile nodal explant with leaves was found suitable for culture establishment. Benzy-ladenine($4.0\;{\mu}M$) incorporated in Murashige and Skoog (MS) medium with additives (50 mg/L ascorbic acid and 25 mg/L each of adenine sulphate, arginine and citric acid) induced multiple shoots from nodal explant. Addition of $1.0\;{\mu}M$ naphthalene acetic acid (NAA) in combination with $4.0\;{\mu}M$ BAP improved the growth of axillary shoots. Further shoot amplification was achieved by repeated subculture of mother explants on fresh medium. Forty percent of the micropropagated shoots rooted on half-strength MS medium with $4.0\;{\mu}M$ indolebutyric acid (IBA) and 100 mg/L activated charcoal, at $28{\pm}2^{\circ}C$ and $60\%$ RH. Sixty percent of these plantlets were hardened in green house.
인삼 조직배양에 있어 multi-shoot 대량번식을 통한 이차대사산물의 이용가능성을 조사코자 강제통기방식에 의해 $CO_2$를 기내에 공급하여 배배양하였던 바 multi-shoot 분화특성 및 사포닌 함량에 미치는 $CO_2$의 효과는 다음과 같다. 부정아 수와 부정아 유래의 신초수는 무처리와 $CO_2$ 2처리구간에 차이가 적었고 분화율은 50%내외이었고 부정아에서 분화한 신초는 경엽의 전개가 빠르고 생장량이 높은것이 특징이었다. 한 개의 자엽에서 분화되는 shoot primordium의 수는 대체로 15.4개-23.9개로 $CO_2$ 2, 500ppm처리구가 가장 양호하였고 $CO_2$ 10, 000ppm의 고농도는 오히려 shoot primordium수 뿐만 아니라 신초 분화율도 저하시켰다. 무처리의 건물율은 7,50%이었던데 반하여 $CO_2$ 2, 500ppm처리구는 건물율이 8.59%로 여타 $CO_2$ 처리구에 비하여 가장 높았다. 기내개화율은 무처리가 7.6%이었으나 $CO_2$, 2, 500-5, 000ppm처리구는 16.3-15.7%로 무처리에 비하여 2배 가량 높았다. 그러나 1개의 치상 배에서 얻어지는 개화수는 1.2-1.3개로 $CO_2$ 처리농도에 따른 차이가 없었다. 조사포닌 함량은 $CO_2$ 2, 500ppm처리구의 경우, 캘러스와 신초가 혼재되어 있는 소식물체는 5.80%이었던데 비하여 multi-shoot가 8.32%로 높았고 ginsenoside함량은 multi-shoot의 경우, ginsenosid Rd, Re 그리고$Rg_1$이 특히 많았다.
Park, Yoon-Kyung;Park, Gene-Sue;Yang, Young-Ki;Cheong, Hyeon-Sook
Journal of Plant Biology
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제39권2호
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pp.93-98
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1996
In order to enhance the system of potato transformation and further regeneration, potato was transformed using the Agrobacterium tumefaciens harboring $\beta$-glucuronidase (GUS) gene. We found that a series fo modified medium ttained 100% shoot regeneration within 5 weeks after the preincubated explants on stage I medium were infected with Agrobacterium. Callus appeared at the cut edges of stem segments on stage II medium, mainly at the basal parts. Some explants started to form shoots after two to three weeks on stage III medium containing kanamycin (50 mg/L). When transferred to MS medium containing 200 mg/L kanamycin, 81% of the transformed shoots formed roots at the cut edge of the plantlets. In contrast, untrasformed shoots never rooted and became yellowish after few weeks under the same conditions. Southern and northern analysis indicated in vitro shoot regeneration on the callus derived from the potato explants, which were incubated with Agrobacteria. The regeneration cycle was shortened after the transformatin and finally the transformation efficiency was highly enhanced.
콩에서의 조직배양 가능성을 알아보고자 콩 유묘를 기내에서 배양시킨 뒤, 여러 부위를 채취하여 각기 다른 배지 치상한 결과는 다음과 같다. 1. 줄기정단조직 배양에서는 대부분 shoot가 분화되어 완전한 식물체를 얻을 수 있었다. 2. 자엽절 조직배양에서는 multiple shoots가 나타나 대량증식에 유용했으나 배지에 따른 영향이 컸다. 3. 배축 및 상배축 조직배양에서는 callus만 분화되엇다. 4. 엽조직배양에서는 callus 분화 후 계대배양했을 때 shoot가 분화되었으나 완전한 식물체를 얻기는 힘들었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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