This study was conducted to investigate the influence of media and hormones on in vitro maturation and development of porcine follicular oocytes. Basic media were used to TCM-199, Waymouth MB751/1 and BMOC-II, and hormones were used to hCG and FSH in each medium. The results obtained were summarized as follows : 1. The maturation rates of oocytes cultured in TCM-199 medium containing hCG, FSH and hCG+FSH were 78.05, 72.50 and 67.50%, respectively. The maturation rates of oocytes with hormones were significantly (P<0.05) higher than those of oocytes cultured without hormone. However, the cleavage rate(hCG 46.88%, FSH 31.04%. hCG+FSH 37.04%) of embryo cultured in TCM-199 containing hormone was significantly(P<0.05) lower than that(89.47%) of oocytes cultured without hormone. 2. The maturation rates of oocytes cultured in Waymouth MB751/1 medium containing hCG. FSH and hCG+FSH were 69.77, 71.43 and 80.00%, respectively. The maturation rates of oocytes with hormones were significantly(P<0.05) higher than those of oocytes cultured without hormone. However. the cleavage rate(hCG 46.67%. FSH 36.00%, hCG+FSH 35.71%) of embryo cultured in Waymouth MB751/1 containing hormone was significantly(P<0.05) lower than that(60.00%) of oocytes cultured without hormone. 3. The maturation rates of oocytes cultured in BMOC-II medium containing hormone were 66.67(control). 66.67(hCG). 91.89(FSH) and 81.82(hCG+FSH)%. respectively. showing the highest rate in FSH treatment. And, the cleavage rates of oocytes cultured in BMOC-II medium containing hormone were 81.82 (control, 79.17(hCG), 50.00(FSH) and 66.67(hCG+FSH)%, respectively.
Kim, Nam-Hoon;Park, Seung-Hyuk;Hwang, Deok-Sang;Lee, Jin-Moo;Lee, Chang-Hoon;Lee, Kyung-Sub;Jang, Jun-Bock
The Journal of Korean Obstetrics and Gynecology
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v.26
no.2
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pp.120-137
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2013
Purpose: This study was to investigate status survey and cost of infertility patients in ${\bigcirc}{\bigcirc}$ Korean Medicine Hospital. Methods: From January 2012 to June 2012, 171 new patients were admitted to ${\bigcirc}{\bigcirc}$ Korean Medicine Hospital for treatment of infertility. We reviewed their medical records retrospectively and had telephone consultations to find out whether they were pregnant or not. Results: The mean age of outpatients was $32.72{\pm}4.08$ years and mean BMI of outpatients was $20.26{\pm}2.68$. 55.0% of patients who did not have childbirth or miscarriage. 82.5% of patients had normal menstrual period. 93.5% of patients visited OB/GYN, 33.3% were treated with ovulation induction, 18.7% underwent intrauterine insemination, and 18.1% underwent in vitro fertilization and embryo transfer. 99.7% were treated with acupuncture and moxibustion, 100% had taken Herbal Medicine. The mean treatment duration of outpatients was $8.84{\pm}8.17$ weeks, and the mean medical expense was $761,994{\pm}586,502$ won. It was found that 32.4% of patients were pregnant after treatment. Conclusions: We investigated status survey and cost of infertility patients. Further study about Korean medical treatments on infertility is required.
Intramural pregnancy is an unusual ectopic gestation located within the uterine wall, completely surrounded by myometrium and separate from the uterine cavity, fallopian tube, or round ligament. It is known to be difficult to diagnose, and associated with a high rate of uterine rupture. We report a case of intramural pregnancy in which early diagnosis was made and successful treatment was done by dilatation and curettage. Diagnostic laparoscopy confirmed the absence of uterine rupture during the procedure. Therefore, conservation of fertility can be possible with early diagnosis of intramural pregnancy. To our knowledge, this is the first case report of intramural pregnancy following IVF-ET in Korea.
Proceedings of the Korea Society of Poultry Science Conference
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2001.11a
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pp.40-46
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2001
The use of pluripotent stem cells has tremendous advantages for various purposes but these cell lines with proven germ-line transmission have been completely established only in the mouse. Embryonic germ (EG) cell lines are also pluripotent and undifferentiated stem cells established from primordial germ cells (PGCs). This study was conducted to establish and characterize the chicken EG cells derived from gonadal primordial germ cells. We isolated gonadal PGCs from 5.5-day-old (stage 28) White leghorn (WL) embryos and established chicken EG cells lines with EG culture medium supplemented with human stem cell factor (hSCF), murine leukemia inhibitory factor (mLIF), bovine basic fibroblast growth factor (bFGF), human interleukin-11 (hIL-11), and human insulin-like growth factor-I (hIGF-I). These cells grew continuously for 4 months (10 passages) on a feeder layer of mitotically active chicken embryonic fibroblasts. These cells were characterized by screening with the Periodic acid-Shiff's reaction, anti-SSEA-1 antibody, and a proliferation assay after several passages. As the results, the chicken EG cells maintained characteristics of undifferentiated stem cells as well as that of gonadal PGCs. When cultured in suspension, the chicken EG cells successfully formed an embryoid body and differentiated into a variety of cell types when re-seeded onto culture dish. The chicken EG cells were injected into blastodermal layer at stage X and dorsal aorta of recipient embryo at stage 14 (incubation of 53hrs) and produced chimeric chickens with various differentiated tissues derived from the EG cells. The germline chimeras were also successfully induced by using EG cells. Thus, Chicken EG cells will be useful for the production of transgenic chickena and for studies of germ cell differentiation and genomic imprinting.
In vitro high-frequency plant regeneration of Muscari comosum var. plumosum through somatic embryogenesis was obtained via two developmental pathways: direct embryos and multiple shoots regenerated from embryogenic callus. Flower bud with pedicel, receptacle, petal and ovary wall, floral stalk and leaf as explants were cultured in MS medium supplemented with various plant growth regulators. Embryos formed directly from pedicel, receptacle and floral stalk. Depending on explant sources, the optimal medium was MS medium supplemented with 0.2 mg/L IBA and 0.3 mg/L BA, 3.0 mg/L IBA and 3.0 mg/L BA, and MS-free medium for pedicel, receptacle, and floral stalk, respectively. Multiple shoots regenerated from embryogenic cal]i which was initiated from petal, ovary and leaf were observed in MS medium with different concentrations and combinations of hormone. The most suitable medium for each type of explant was 3.0 mg/L IBA and 3.0 mg/L BA(petal and ovary) and 5.0 mg/L IBA and 5.0 mg/L BA (leaf) Furthermore, the combination of 0.1 mg/L 2,4-D and 1.0 mg/L BA was also good for all sources of explants not only for direct embryo formation, but also, for embryogenic callus induction.
Effective micropropagation system via somatic embryognesis was established for a Phytophthora resistant Aralia elata cultivar. Different kinds of growth regulators were needed to induce embryogenic callus with different explant sources. When leaf explants were used, a combination of 2,4-D, TDZ and L-glutamine was needed, whereas when petiole and root explants needed only 1.0 mg/L 2,4-D. Embryogenic callus induction rate under the optimum culture condition was 75.0%, 67.0% and 83.0% from leaf, petiole and root segment, respectively. Somatic embryo germination and plantlet conversion rate appeared to be influenced greatly by various osmoticums. More than 90% of embryos germinated when treated with sucrose, glucose and maltose. However, the highest conversion rate (72%) was recorded on medium with 2% sucrose only. The converted plantlets grew normally on 1/2MS basal medium, were acclimatized on artificial soil mixture and survived more than 95% in the greenhouse condition. The results suggest that the species can be clonally propagated through in vitro culture system via somatic embryogenesis.
The objectives of this study were performed to increase the efficiency of the culture conditions of embryos produced in vitro, and to assess the developmental potential after transfer of those embryos into recipients. The mean number of folliclular oocytes recovered from an ovary was 10.7. The rates of maturation and fertilization in Grade I oocytes were significantly (P<0.05) higher than Graden and III. Developmental rate into blastocyst in the culture group of TCM-199 with BOEC were significantly higher (P<0.05) than the groups of TCM-199 and conditioned medium (24.7% vs. 12.4% and 18.2%). The survivability of post-thawed blastocysts equilibrated for 3 min in EFS solution was significantly (P<0.05) lower than l0 for 1 and 2 min (32.1% vs. 82.9% and 73.3%). Significantly higher (P<0.05) survival rate in blastocysts was seen after freezing than in morulae stage embryos. Out of all 105 recipients, 49 (46.7%) were confirmed in pregnant. On pregnancy of cattle, 48 calves were born from 40 recipients. The ratio of twin and single calves was 30.5% (32/40 and 7.6% (8/40), respectively. However, the others composed of abnormal, as judging as 6 (12.2%) for abortion and 3 (6.1%) for stillbirth during the pregnant period.
Kim, Kyung-Ah;Min, Uoo-Gyung;Lim, Jae-Woo;Jun, Nu-Lee;Won, Hye-Sung;Kim, Chung-Hoon;Kim, Ellen Ai-Rhan;Lee, Pil-Ryang;Lee, In-Sik;Kim, Ki-Soo;Kim, Ahm;Pi, Soo-Young
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.46
no.3
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pp.224-229
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2003
Purpose : To examine various neonatal outcomes and perinatal factors resulting from assisted reproduction compared to that of spontaneous conception. Methods : This is a retrospective study. The control cases were all twins of spontaneous conception born between periods from January 1995 to June 2000. The study cases were identified from twins conceived by assisted reproduction in the same time peried. A total of 460 sets of twins consisted of 250 twins of spontaneous conception and 156 twins of assisted reproduction were studied. The primary outcomes were neonatal morbidity and mortality and the secondary outcomes were perinatal factors including number, length and cost of hospitalization for the delivery. Results : No differences were seen in various neonatal factors including gestational age, birth weight and incidences of respiratory distress syndrome, patent ductus arteriosus, necrotizing enterocolitis, hyperbilirubinemia, sepsis, intraventricular hemorrhage and the length of hospitalizations. Lower one minute and five minute Apgar scores and frequently encountered electrolyte abnormalities were observed in neonates of assisted reproduction. In general, the second twin of assisted reproduction had increased incidences of respiratory distress syndrome, sepsis and necrotizing enterocolitis than the first twin. Increased frequencies of preterm labor, hospitalization and elective cesarean section were seen among mothers who underwent artifical conception. However, overall hospital costs in terms of mothers hospitalization for the delivery and neonates hospitalization did not show differences. Conclusion : Assisted reproduction twins had similar neonatal morbidities, mortalities and perinatal morbidities compared to those born by spontaneous conception.
Kim, Myo-Kyung;Lee, Sun-Hee;Choi, Su-Jin;Choi, Hye-Won;Park, Dong-Wook;Lim, Chun-Kyu;Song, In-Ok;Lee, Hyoung-Song
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.37
no.4
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pp.329-338
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2010
Objective: This study was carried out to know whether cryopreservation of sibling 2PN zygotes could increase the cumulative delivery rates in the patients who had less than 10 fertilized zygotes. Methods: A retrospective analysis was performed in 138 in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET) cycles with less than 10 fertilized zygotes during January 2003 to December 2007 in Cheil General Hospital. These cycles were divided into two groups. In Group I (n=86), all fertilized embryos were cultured to transfer on day 3 without cryopreserved embryos at the 2PN stage. In Group II (n=52), among fertilized zygotes, some sibling zygotes were frozen at the 2PN stage, the remainder were cultured to transfer. Clinical outcomes in fresh ET cycles and cumulative ongoing pregnancy rates after subsequent frozen-thawed (FT)-ET cycles were compared. Results: There were no significant differences in female mean age, number of retrieved oocytes and total fertilized embryos between two groups, Number of cultured embryos was significantly lower in Group II ($5.2{\pm}0.5$) than in Group I ($8.4{\pm}0.7$) (p<0.01). Also, number of transferred embryos was significantly lower in Group II ($3.3{\pm}0.6$) compared with Group I ($3.6{\pm}0.6$) (p<0.01). ${\beta}$-hCG positive rates and delivery rates (51.2 vs. 46.2 % and 41.9 vs. 34.6 %, respectively) after fresh ET were slightly higher in Group I than in Group II. However, the differences were not statistically significant. Also, the cumulative delivery rates after subsequent FT-ET cycles were not significantly different between Group I (48.8%) and Group II (50.0%). Conclusion: This study showed that cryopreservation of sibling 2PN zygotes from patients who had less than 10 zygotes in the fresh ET cycles did not increase cumulative delivery outcomes. But, it could provide an alternative choice for patients due to offering more chance for embryo transfers if pregnancy was failed in fresh IVF-ET cycles.
As a basic research for breeding new varieties, reciprocal -intergeneric crosses between Citrus junos and P.trifoliata were made. F$_1$ hybrid production using in vitro ovule culture, gametogenesis, and fertilization phenomena were investigated. Frequency of fruit set resulting from crossing of Citrus junos and Poncirus Trifoliata was 16.6% while that of Poncirus Trifoliata and Citrus junos was 11.7%. Callus formation occurred well when ovules at the 6th week after pollination were cultured on MT (Murashige and Tucker) medium supplemented with zeatin 0.5 mg/L and NAA 1.0 or 3.0 mg/L. Immature ovules developed into mature embryos of the MT medium supplemented with 2,4-D 0.1 or 3.0 mg/L. Immature ovules developed into mature embryos of the MT medium supplemented with 2,4 D 0.1 or 0.5 mg/L. The invitro germination rates of 20-week-old ovules set C. junos $\times$ P. Trifoliata and P. Trifoliata $\times$ C. junos were 54.5% and 48.6%, respectively. The emergence ratios of trifoliate hybrids obtained by C. junos $\times$ P. Trifoliata and P. Trifoliata $\times$ C. junos were 56.7% and 100%, respectively. The chromosome number of C. junos and P. Trifoliata was n = 9 or 2n = 18, and the sizes of their pollen grain were 33.75 $\mu$ and 25.0 $\mu$. The length and width of embryo sac in C. junos and P. Trifoliata were 69.38~79.23 $\mu$ and 27.50~38.56 $\mu$, and those of egg cells were 17.50~41.50 $\mu$ and 6.25~8.12$\mu$. Fertilization of C. junos and P. trifoliata terminated 72 h after pollination.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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