• 제목/요약/키워드: immuno-histochemistry

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Conversion of C2C12 Myoblast into Adipoblast with Thiazolidinediones - A Possible Basis for Intramuscular Fat Generation in Meat Animals

  • Singh, N.K.;Chae, H.S.;Hwang, I.H.;Yoo, Y.M.;Ahn, C.N.;Lee, H.J.;Park, H.J.;Chung, H.Y.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제20권3호
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    • pp.432-439
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    • 2007
  • Thiazolidinediones (TZDs) act as potent activators of the adipose differentiation program in established preadipose cell lines. TZD's have also been investigated in diabetic patients and reported to act as PPAR-${\gamma}$ ligands. In this report, the effects of TZDs on the differentiation pathway of myoblasts have been investigated. C2C12 mouse myoblasts were grown in Dulbecco's Modified Eagles medium for 4-5 days until they reached almost 100% confluency. Post-confluent cells (day 0) were further exposed to adipogenic induction medium along with TZDs for 48 hours. Thereafter, cells were exposed only to TZDs every 48 h until day 10. The control was provided with differentiation medium without any treatment. Alterations in the cells during the differentiation programme were analyzed on the basis of fusion index, oil-red-o staining, adipocyte index, adipocyte stain uptake measurement, immuno-histochemistry and western blotting. Exposure of C2C12 mouse myoblasts to TZDs prevented the expression of myosin heavy chain with parallel increase in the expression of C/EBP-${\alpha}$ and PPAR-${\gamma}$ and acquisition of adipocyte morphology, thus abolishing the formation of multinucleated myotubes. TZDs exert their adipogenic effects only in non-terminally differentiated myoblasts; myotubes were insensitive to the compound. Continuous exposure (at least 4-5 doses) to inducers after the growth arrest was essential to provide a sustained environment to the cells converting to fully matured adipoctyes. The results indicate that TZDs specifically converted the differentiation pathway of myoblasts into that of adipoblasts.

아급성 육아종성 갑상샘염의 세침흡인 세포소견 -아급성 육아종성 갑상샘염 10예의 임상-세포소견 및 면역세포염색 소견 분석- (Fine Needle Aspiration Cytology of Subacute Granulomatous Thyroiditis -A Clinico-Cytological Review of 10 Cases with Immunocytochemical Analysis-)

  • 김도경;표주연;박종필;김연화;정우희;손은주;홍순원
    • 대한세포병리학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.27-33
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    • 2008
  • Although subacute granulomatous thyroiditis(SGT) is usually diagnosed clinically, papillary carcinoma or other thyroid conditions must be considered in the differential diagnosis. We retrospectively reviewed the clinical and fine-needle aspiration(FNA) cytologic findings seen in 10 SGT cases to decide what are the most reliable cytologic findings and the most helpful molecular tools for reaching a confident cytologic diagnosis. The most representative smear slides were retrieved to perform immunocytochemistry for cytokeratin 19(CK19) and Ret protein. Five papillary carcinomas(PTCs) were included as controls. The constant and typical cytologic findings of SGT were multinucleated giant cells(MGCs) (100%), epithelioid granulomas(90%), an inflammatory dirty background(90%) and plump transformed follicular cells(80%) without fire-flare cells, oncocytic cells or transformed lymphocytes. The immunoreactivities for CK19(37.5%) and Ret(10%) of the follicular cells of SGT were less than those(CK19 and Ret:100%) of PTC. CK19 immunoreactivity of the MGCs was seen in only one case of PTC. There was no significant difference between CK19 and Ret immunocytochemical staining for the MGCs of both SGT and PTC. The results of this study demonstrate that the cytological diagnosis of SGT can be improved by employing a combination of the typical and constant diagnostic cytological features and immunocytochemical results.

생후 발달과정동안 남성 생식기의 Efferent Ductules에서 Monocarboxylate Transporters(MCTs)와 Basigin의 발현 양상과 에스트로젠 수용체 α에 의한 MCT1 발현 조절 연구 (Expression of Monocarboxylate Transporters(MCTs) and Basigin and Estrogen Receptor α(ERα)-Mediated Regulation of MCT1 Expression in The Efferent Ductules of Male Reproductive Tract During Postnatal Development)

  • 이기호;최인호;정정수;장종수
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제49권3호
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    • pp.309-320
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    • 2007
  • 본 연구에서는 남성 생식 기관인 efferent ductules(ED)에서 monocarboxylate transporter (MCT) isoform과 Basigin(Bsg)의 mRNA 발현을 탐구하고, MCT1의 발현이 에스트로젠 수용체 α에 의해 조절되는지를 연구하였다. 생후 여러 연령대의 백서 ED에서 MCT isoform과 Bsg의 mRNA 발현 여부는 real-time PCR에 의해 조사 되었고, 정상 생쥐와 에스트로젠 수용체 α knockout 생쥐를 사용하여 에스트로젠 수용체 α에 의한 MCT1의 발현 조절 여부는 immunohistochemistry 방법에 의해 간접적으로 알아 보았다. 본 연구 결과는 백서의 ED에서 MCT1, 2, 3, 4와 8 그리고 Bsg 유전자의 발현은 연령에 따라 다르게 나타나며, MCT1의 발현이 ED의 ciliated 세포의 basolateral 지역에서 발현되고 어떤 측면에서 ERα에 의해 조절되어 질 수 있음을 보여 주었다. 따라서 본 연구 결과는 MCT가 monocarboxylate의 세포 내, 외부로 운반을 조절함으로써 남성 생식기의 일부인 ED의 역할을 조절하는데 관여함을 시사한다.

Correlation between Ki67 and Histological Grade in Breast Cancer Patients Treated with Preoperative Chemotherapy

  • Petric, Militza;Martinez, Santiago;Acevedo, Francisco;Oddo, David;Artigas, Rocio;Camus, Mauricio;Sanchez, Cesar
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제15권23호
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    • pp.10277-10280
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    • 2015
  • Background and Aim: Breast cancer (BC) is a heterogeneous disease and cell proliferation markers may help to identify subtypes of clinical interest. We here analyzed the correlation between cell proliferation determined by Ki67 and HG in BC patients undergoing preoperative chemotherapy (PCT). Materials and Methods: We obtained clinical/pathological data from patients with invasive BC treated at our institution from 1999 until 2012. Expression of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), epidermal growth factor receptor type 2 (HER2) and Ki67 were determined by immuno-histochemistry (IHC). Clinicopathological subtypes were defined as: Luminal A, ER and/or PR positive, HER2 negative, HG 1 or 2; Luminal B, ER and/or PR positive, HER2 negative or positive and/or HG 3; triple negative (TN), ER, PR and HER2 negative independent of HG; HER2 positive, ER, PR negative and HER2 positive, independent of HG. By using Ki67, a value of 14% separated Luminal A and B tumors, independently of the histological grade. We analyzed correlations between Ki67 and HG, to define BC subtypes and their predictive value for response to PCT. Results: 1,560 BC patients were treated in the period, 147 receiving PCT (9.5%). Some 57 had sufficient clinicopathological information to be included in the study. Median age was 52 years (26-72), with 87.7% invasive ductal carcinomas (n=50). We performed IHC for Ki67 in 40 core biopsies and 50 surgical biopsies, 37 paired samples with Ki67 before and after chemotherapy being available. There was no significant correlation between Ki67 and HG (p=0.237), both categorizing patients into different subtypes. In most cases Ki67 decreased after PCT (65.8%). Only 3 patients had pathologic complete response (cPR). Conclusions: In our experience we did not find associations between Ki67 and HG. Determination of clinicopathological luminal subtypes differs by using Ki67 or HG.

필수아미노산 결핍에 의한 섭식반응과 Methionine 결핍이 흰쥐의 뇌내 c-fos 발현에 미치는 영향 (Effect of Essential Amino Acid Deficient Diets in Feeding Response and c-fos Expression in Rats Brain in Response to Methionine Deficiency)

  • 김창혁
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제44권6호
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    • pp.727-738
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    • 2002
  • 본 시험은 각각의 필수아미노산 결핍사료 섭취에 의한 단기간의 섭식반응과 methionine 결핍(-Met) 사료 섭취시 뇌내 각 부위에 나타나는 Fos 면역반응을 조사하여 아미노산 결핍이 뇌내 섭식반응과 관련있는 부위를 명확히 알고자 수행하였다. 실험사료의 단백질원은 정제아미노산을 이용하였다. 시험에 이용된 모든 사료의 질소원은 순수 아미노산 혼합물을 이용하였으며, 사료내 단백질 함량은 15%로 하였다. 사료는 하루 6시간 동안 섭취하도록 적응을 시켰으며(17:00${\sim}$21:00, meal feeding method), 사료섭취량과 증체량은 사료급여 7일째부터 매시간 측정하였다. 실험 1에서는 각 필수아미노산 결핍사료가 사료섭취량, 체중 변화 및 섭식패턴에 미치는 영향을 관찰하였고, 실험 2에서는 Fos 면역조직 화학적 방법을 사용하여 methio- nine 결핍사료에 대하여 회피 반응을 나타내는 동안에 활성을 보이는 뇌의 영역을 확인하였다. 각 필수아미노산 결핍사료 섭취에 따른 초기 섭식 억제 정도는 methionine이 가장 강하게 나타난 반면 threonine이 가장 약하였다. 결핍사료 급여 3일째의 사료섭취량은 대조구 사료에 비하여 histidine(71%), leucine(68%), isoleucine (66%), threonine(63%), tryptophan(61%), valine (55%), phenylalanine(52%), methionine(51%), lysine(44%), arginine(24%) 순으로 억제되었다. 뇌 신경 영역에 Fos 면역활성은 PPC, amygdala 및 endopyriform cortex(EPC) 부분이 대조구에 비하여 강한 활성을 나타냈으나, LH, VMH 및 PVM에서는 대조구와 처리구가 비슷하게 나타냈다. 따라서 본 연구의 결과로 미루어 뇌내 PPC는 필수아미노산 결핍에 반응하는 초기 인식부위라는 것을 확인할 수 있었다.

당뇨병 유발 쥐에서 신경 세포 증식에 대한 저선량 방사선의 효과 (The Effect of Low Dose Radiation on the Neuronal Cell Proliferation in Diabetic Rats)

  • 김두순;강진오;홍성언;김상기;이택현;김창주
    • Radiation Oncology Journal
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    • 제23권3호
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    • pp.157-160
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    • 2005
  • 목적: 저선량 방사선이 당뇨쥐의 해마에서 신경 세포의 증식에 미치는 영향을 확인하기 위해서이다. 대상 및 방법: 정상 쥐를 대상으로 방사선을 조사하지 않은 군, 0.1 Gy 방사선 조사군, 10 Gy 방사선 조사군으로 나눠 방사선이 정상 신경 세포의 증식에 미치는 영향을 확인하였다. 당뇨쥐를 대상으로 한 이차 실험은 방사선을 조사하지 않은 정상 쥐, 방사선을 조사하지 않은 당뇨쥐, 0.01 Gy 방사선 조사한 당뇨쥐, 0.1 Gy를 조사한 당뇨쥐, 1 Gy를 조사한 당뇨쥐, 10 Gy를 조사한 당뇨쥐로 나눠 시행하였다. 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU)를 이용한 면역 염색을 시행하여 쥐 해마의 치아이랑 세포의 수를 세어 비교하였다. 결과: BrdU 양성 세포의 수는 대상으로 방사선을 조사하지 않은 정상쥐, 0.1 Gy 방사선 조사한 정상쥐, 10 Gy 방사선 조사한 정상쥐에서 각각 $45.95{\pm}3.42/mm^2,\;59.34{\pm}5.20/mm^2,\;19.26{\pm}2.98/mm^2$로 나타났다. 당뇨쥐를 대상으로 한 이차 실험에서 BrdU 양성 세포의 수는 방사선을 조사하지 않은 정상 쥐, 방사선을 조사하지 않은 당뇨쥐, 0.01 Gy 방사선 조사한 당뇨쥐, 0.1 Gy를 조사한 당뇨쥐, 1 Gy를 조사한 당뇨쥐, 10 Gy를 조사한 당뇨쥐에서 각각 $55.44{\pm}8.57/mm^2,\;33.33{\pm}6.46/mm^2,\;67.75{\pm}10.54/mm^2,\;66.63{\pm}10.05/mm^2,\;23.59{\pm}6.37/mm^2,\;14.34{\pm}7.22/mm^2$로 나타났다. 결론: 0.1 Gy 이하의 저선량 방사선은 당뇨쥐의 해마 치아이랑세포의 수를 증가시켜 세포 증식효과를 보이는 것을 확인하였다.

알코올성 위염 동물 모델에서 작두콩 추출물의 보호 효과 (Protective Effect of Canavalia gladiata on Gastric Inflammation Induced by Alcohol Treatment in Rats)

  • 김옥경;남다은;유양희;전우진;이정민
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제42권5호
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    • pp.690-696
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    • 2013
  • 본 연구는 국내에서 재배되는 작두콩 추출물의 투여가 알코올 처리로 유발된 위염 동물모델에서 위 점막 손상, 위액분비, 염증성 인자 발현의 변화에 미치는 영향을 관찰한 후 위장 보호 효과의 기능성을 입증시켜 기능성 식품 개발의 기초자료를 제공하고자 하였다. 작두콩 80% 알코올 추출물을 투여한 그룹에서 알코올성 위염을 유발시킨 그룹에 비하여 위 점막 손상과 출혈이 감소하였음을 관찰하였으며 위 손상면적 또한 유의적으로 감소시켰다. 위액분비량을 비교한 결과에서도 알코올성 위염으로 인하여 증가한 위액분비량을 작두콩 80% 알코올 추출물이 농도 의존적으로 감소시켰음을 확인할 수 있었다. 위 조직의 병리학적인 관찰을 통하여 효과를 관찰한 결과 알코올성 위염을 유발한 군에서 위 점막조직의 손상과 표면 상피세포의 손실을 관찰할 수 있었으나, 작두콩 80% 알코올 추출물 250 및 500 mg/kg 투여한 군들에서는 알코올성 위염 그룹과 비교하여 손상이 깊지 않음을 확인할 수 있었다. TBARS 양으로 산화적 손상을 측정한 결과에서는 작두콩 80% 알코올 추출물 500 mg/kg을 투여한 그룹에서 알코올성 위염으로 인하여 증가된 산화적 손상을 대조물질 lansoprazole 30 mg/kg 투여군과 유의적인 차이가 없는 정도로 감소시켰음을 확인하였다. 염증 관련인자인 COX-2와 NF-${\kappa}B$의 발현을 비교한 결과, 알코올성 위염을 유발시킨 시험대조군에서 정상대조군보다 COX-2와 NF-${\kappa}B$의 발현이 확연히 증가한 반면 대조물질 lansoprazole 30 mg/kg 투여한 그룹에서는 발현이 감소하는 것을 확인할 수 있었으나 작두콩 80% 알코올 추출물을 투여한 군에서는 시험대조군에 비해 미비한 감소를 보였다. 따라서 작두콩 80% 알코올 추출물의 알코올성 위염 예방 효과는 형태학적 및 병리학적 관찰, 산화적 손상 억제, 염증억제효과 등으로 확인한 결과, 알코올성 위염을 억제시켰으며 이는 저용량 보다는 고용량을 섭취하였을 때 그 보호효과가 크다는 것을 확인하였다.