Proceedings of the Microbiological Society of Korea Conference
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2002.10a
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pp.121-124
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2002
This work was initiated to develope a recombinant oral poliovaccine (OPV), which is highly advanced in safety (minimizing VAPP) by introducing Type 2,3 poliovirus epitopes into our RPS-Vax system. We have introduced several potential vaccine epitopes of poliovirus Type 2, and 3 into RPS-Vax system, resulting in production of recombinant polioviruses. Any of these chimeric viruses, however, were not detected for their foreign gene expression by serotype-specific mouse antiserum. We have designed several folding units to stabilize the introduced vaccine protein and attached short epitope-concatamer or epitope-multimer to them, followed by production of chimeric viruses. Only those who have an HIV-1 Tat-mediated folding unit were nicely detected for the introduced foreign proteins by anti-Tat antiserum and type-specific peptide-induced antisera. Nevertheless, introduced epitopes were not detected in Western blot experiment with each serotype-specific antiserum. None of the mice inoculated with these chimeric viruses showed preventative immunity when challenged with Lansing and Leon wildtype 2 and 3 poliovirus, and the antiserum did not show neutralizing capacity in vitro. Conformational epitope covering B/C loop region of type 2 and 3 were newly designed by computer modeling, and introduced into the RPS-Vax vector system, followed by production of chimeric viruses. Introduced epitope regions were nicely detected by anti-Tag23 mAb or peptide antibody, but still not detected by poliovirus antiserum. Nevertheless, neutralizing antibody was detected in the Tg-PVR mice even when inoculated once with these chimeric viruses. Also, the immunized mice showed perfect preventative immunity against the wild Type poliovirus Lancing or Leon. When boosted appropriately, those chimeric virus-inoculated Tg-PVR mice produced equivalent amounts of neutralizing antibody to those in Sabin 2/3-immunized mice. These data strongly suggest that our recombinant poliovirus (RPS-PV2 and RPS-PV3) can be used as a safe and effective rec-OPV instead of any preexisting poliovaccine.
Rapid production of nitric oxide (NO) and reactive oxygen species (ROS) has been implicated in the regulation of innate immunity in plants. A potato calcium-dependent protein kinase (StCDPK5) activates an NADPH oxidase StRBOHA to D by direct phosphorylation of N-terminal regions, and heterologous expression of StCDPK5 and StRBOHs in Nicotiana benthamiana results in oxidative burst. The transgenic potato plants that carry a constitutively active StCDPK5 driven by a pathogen-inducible promoter of the potato showed high resistance to late blight pathogen Phytophthora infestans accompanied by HR-like cell death and $H_2O_2$ accumulation in the attacked cells. In contrast, these plants showed high susceptibility to early blight necrotrophic pathogen Alternaria solani, suggesting that oxidative burst confers high resistance to biotrophic pathogen, but high susceptibility to necrotrophic pathogen. NO and ROS synergistically function in defense responses. Two MAPK cascades, MEK2-SIPK and cytokinesis-related MEK1-NTF6, are involved in the induction of NbRBOHB gene in N. benthamiana. On the other hand, NO burst is regulated by the MEK2-SIPK cascade. Conditional activation of SIPK in potato plants induces oxidative and NO bursts, and confers resistance to both biotrophic and necrotrophic pathogens, indicating the plants may have obtained during evolution the signaling pathway which regulates both NO and ROS production to adapt to wide-spectrum pathogens.
Ralstonia solanacearum (Rso) is a causal agent of bacterial wilt in Solanaceae crops worldwide including Republic of Korea. Rso virulence predominantly relies on type III secreted effectors (T3Es). However, only a handful of Rso T3Es have been characterized. In this study, we investigated subcellular localization of and manipulation of plant immunity by 8 Rso T3Es predicted to harbor a nuclear localization signal (NLS). While 2 of these T3Es elicited cell death in both Nicotiana benthamiana and N. tabacum, only one was dependent on suppressor of G2 allele of skp1 (SGT1), a molecular chaperone of nucleotide-binding and leucine-rich repeat immune receptors. We also identified T3Es that differentially regulate flg22-induced reactive oxygen species production and gene expression. Interestingly, several of the NLS-containing T3Es translationally fused with yellow fluorescent protein accumulated in subcellular compartments other than the cell nucleus. Our findings bring new clues to decipher Rso T3E function in planta.
Objectives : This study was carried out to understand the immunity responses and anti-oxidation effect of the Gamidaeganghwal-tang(GDT) on rheumatoid arthritis by using the THP-1 cells and the serum of CIA mice. Methods : For this purpose, GDT was orally administerd to mice with rheumatoid arthritis induced by collagen II. To investigate the immunity responses, value of cytokine and gene expression in the THP-1 cell, levels of cytokines in the serum of CIA(collagen type II induced arthritis) mice, number of immunocyte in PBMC of CIA mice were measured. Then, anti-oxidant activity, scavenging activity on DHHP(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) free radical and SOD(Superoxide dismutae)-like activity of GDT was observed. Results : 1. The levels of IL-$1{\beta}$, IL-6, IL-8, MCP-1 at 100, $50{\mu}g/m{\ell}$ of GDT were significantly reduced in the THP-1 cell. 2. The levels of TNF-${\alpha}$, COX-2 mRNA expression at 100, $50{\mu}g/m{\ell}$ of GDT and IL-$1{\beta}$, IL-6 at $100{\mu}g/m{\ell}$ of GDT were significantly reduced in the THP-1 cell line. 3. The levels of IL-6, TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ were significantly reduced in the serum of CIA mice. 4. The absolute number of CD3+, CD4+ and CD8+ cells were significantly induced, CD3+/CD69+, CD3+/CD49+, CD19+, B220+/CD23+ cells were significantly reduced in PBMC. 5. Scavenging activity on DPPH free radical and SOD-like activity were significantly induced in a concentration dependent manner. Conclusions : Taking all these observations, GDT considered to be effective in treating rheumatoid arthritis. Therefore we have to survey continuously in looking for the effective substance and mechanism in the future.
Sumon, Md Afsar Ahmed;Sumon, Tofael Ahmed;Hussain, Md. Ashraf;Lee, Su-Jeong;Jang, Won Je;Sharifuzzaman, S.M.;Brown, Christopher L.;Lee, Eun-Woo;Hasan, Md. Tawheed
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.6
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pp.681-698
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2022
The Nile tilapia Oreochromis niloticus, Atlantic salmon Salmo salar, rainbow trout Oncorhynchus mykiss, olive flounder Paralichthys olivaceus, common carp Cyprinus carpio, grass carp Ctenopharyngodon idella and rohu carp Labeo rohita are farmed commercially worldwide. Production of these important finfishes is rapidly expanding, and intensive culture practices can lead to stress in fish, often reducing resistance to infectious diseases. Antibiotics and other drugs are routinely used for the treatment of diseases and sometimes applied preventatively to combat microbial pathogens. This strategy is responsible for the emergence and spread of antimicrobial resistance, mass killing of environmental/beneficial bacteria, and residual effects in humans. As an alternative, the administration of probiotics has gained acceptance for disease control in aquaculture. Probiotics have been found to improve growth, feed utilization, immunological status, disease resistance, and to promote transcriptomic profiles and internal microbial balance of host organisms. The present review discusses the effects of single and multi-strain probiotics on growth, immunity, heamato-biochemical parameters, and disease resistance of the above-mentioned finfishes. The application and outcome of probiotics in the field or open pond system, gaps in existing knowledge, and issues worthy of further research are also highlighted.
Bacterial wilt caused by the pathogen Ralstonia solanacearum is a devastating disease of potato crops. Harmonizing immunity to pathogens and crop yield is a balance between productive, economic, and environmental interests. In this work, the agronomic performance of two events of potato cultivar INIA Iporá expressing the Arabidopsis thaliana EFR gene (Iporá EFR 3 and Iporá EFR 12) previously selected for their high resistance to bacterial wilt was evaluated under pathogen-free conditions. During two cultivation cycles, the evaluated phenotypic characteristics were emergence, beginning of flowering, vigor, growth, leaf morphology, yield, number and size of tubers, analyzed under biosecurity standards. The phenotypic characteristics evaluated did not show differences, except in the morphology of the leaf with a more globose appearance and a shortening of the rachis in the transformation events with respect to untransformed Iporá. The Iporá EFR 3 genotype showed a ~40% yield decrease in reference to untransformed Iporá in the two trials, while Iporá EFR 12 did not differ statistically from untransformed Iporá. Iporá EFR 12 shows performance stability in the absence of the pathogen, compared to the untransformed control, positioning it as an interesting candidate for regions where the presence of the pathogen is endemic and bacterial wilt has a high economic impact.
Objective: The bursa of Fabricius (BF) is a central humoral immune organ belonging specifically to avians. Recent studies had suggested that miRNAs were active regulators involved in the immune processes. This study was to investigate the possible differences of the BF at miRNA level between two genetically disparate duck breeds. Methods: Using Illumina next-generation sequencing, the miRNAs libraries of ducks were established. Results: The results showed that there were 66 differentially expressed miRNAs and 28 novel miRNAs in bursa. A set of abundant miRNAs (i.e., let-7, miR-146a-5p, miR-21-5p, miR-17~92) which are involved in immunity and disease were detected and the predicted target genes of the novel miRNAs were associated with duck high anti-adversity ability. By gene ontology analysis and enriching KEGG pathway, the targets of differential expressed miRNAs were mainly involved in immunity and disease, supporting that there were differences in the BF immune functions between the two duck breeds. In addition, the metabolic pathway had the maximum enriched target genes and some enriched pathways that were related to cell cycle, protein synthesis, cell proliferation and apoptosis. It indicted that the difference of metabolism may be one of the reasons leading the immune difference between the BF of two duck breeds. Conclusion: This data lists the main differences in the BF at miRNAs level between two genetically disparate duck breeds and lays a foundation to carry out molecular assisted breeding of poultry in the future.
Objective: This study was conducted to investigate the effects of dietary multi-strain probiotic (MSP) (Bacillus coagulans Unique IS2 + Bacillus subtillis UBBS14 + Saccharomyces boulardii Unique 28) on performance, gut morphology and expression of nutrient transporter related genes in broiler chickens. Methods: A total of 256 (4×8×8) day-old CARIBRO Vishal commercial broiler chicks of uniform body weight were randomly distributed into four treatments with 8 replicates each and having eight chicks in each replicate. Four dietary treatments were T1 (negative control-basal diet), T2 (positive control-antibiotic bacitracin methylene disalicylate at 20 mg/kg diet), T3 (MSP at 107 colony-forming unit [CFU]/g feed), and T4 (MSP at 108 CFU/g feed). Results: During 3 to 6 weeks and 0 to 6 weeks, the body weight gain increased significantly (p<0.05) in T3 and T4 groups. The feed intake significantly (p<0.05) reduced from T1 to T3 during 0 to 3 weeks and the feed conversion ratio also significantly (p<0.05) improved in T3 and T4 during 0 to 6 weeks. The humoral and cell mediated immune response and the weight of immune organs were also significantly (p<0.05) improved in T3 and T4. However, significant (p<0.05) dietary effects were observed on intestinal histo-morphometry of ileum in T3 followed by T4 and T2. At 14 d post hatch, the relative gene expression of glucose transporter (GLUT5), sodium-dependent glucose transporter (SGLT1) and peptide transporter (PepT1) showed a significant (p<0.05) up-regulating pattern in T2, T3, and T4. Whereas, at 21 d post hatch, the gene expression of SGLT1 and PepT1 was significantly (p<0.05) downregulated in MSP supplemented treatments T3 and T4. Conclusion: The supplementation of MSP at 107 CFU/g diet showed significant effects with improved performance, immune response, gut morphology and expression of nutrient transporter genes. Thus, the MSP could be a suitable alternative to antibiotic growth promoters in chicken diets.
In recent decades, oncolytic viruses (OVs) have extensively been investigated as a potential cancer drug. Oncolytic viruses have primarily the unique advantage in the fact that they can only infect and destroy cancer cells. Secondary, oncolytic viruses induce the activation of specific adaptive immunity which targets tumor-associated antigens that were hidden during the initial cancer progression. In 2015, one genetically modified oncolytic virus, talimogene laherparepvec (T-VEC), was approved by the American Food and Drug Administration (FDA) for the treatment of melanoma. Currently, various oncolytic viruses are being investigated in clinical trials as monotherapy or in combination with preexistent cancer therapies like immunotherapy, radiotherapy or chemotherapy. The efficacy of oncolytic virotherapy relies on the balance between the induced anti-tumor immunity and the anti-viral response. Despite the revolutionary outcome, the development of oncolytic viruses for the treatment of cancer faces a number of obstacles such as delivery method, neutralizing antibodies and induction of antiviral immunity due to the complexity, variability and reactivity of tumors. Intratumoral administration has been successful reducing considerably solid tumors with no notable side effects unfortunately some tumors are not accessible (brain) and require a systemic administration of the oncolytic viruses. In order to overcome these hurdles, various strategies to enhance the efficacy of oncolytic viruses have been developed which include the insertion of transgenes or combination with immune-modulatory substances.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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