Cotyledonary somatic embryos after being cultured in a liquid MS medium for 1 week were subcultured on a solid MS medium and then the embryos germinated at a rate of 92%, but the rate was lowered by extending the culture period of the embryos on a liquid medium: 26% germination on a liquid medium culture for 4 weeks. Somatic embryos subcultured on the liquid medium showed the normal elongation of hypocotyl and radicle but in part showed secondary embryogenesis on hypocotyl and callus formation on and around the root-hypocotyl juncture. Through observation of scanning electron microscope, apical meristem in plumule showed the loose arrangement of cells, and abnormal leaf primordium formation and growth arrest of the primordium or no leaf primordium formation. Therefore, it is suggested that the germination arrest of carrot somatic embryos on liquid medium culture is due to the structural abnormality of the apical meristem in plumule.
To investigate the effects of light intensity on the growth, and the critical minimum light intensity for growing of Cornus controversa seedlings at the stage of cotyledon, hypocotyl elongation, cotyledon expansion, the times of leaves appearance, dry weights of each organ, and specific leaf area(SLA) were measured on a growth chamber with several light intensity gradients(385, 32, 17, 8, and $5{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$). There was a positive correlationship between the size of cotyledon and the biomass of cotyledon and total seedling. Hypocotyl was more elongated under relatively low light intensities, such as 32, 17, 8, and $5{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ than under $385{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity, however, dry weight of the hypocotyl was adverse. As the light intensities decreased, the leaf appearance was delayed and the number of leaves decresed. In addition, leaves did not appear under $8{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ and $5{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity. Although cotyledons were more fully expanded under 32 and $17{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensities than $385{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity, the dry weights of cotyledons were greater under the high light intensity. The dry weight of cotyledon, hypocotyl, root and leaves showed a decreased pattern with decreasing light intensities, but root to shoot(hypocotyl+leaves) ratio rapidly increased. Roots did not develop below $8{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity. In conclusion, the results showed that the critical minimum light intensity for growing of Cornus controversa seedlings was above $17{\mu}mol\;m^{-2}s^{-1}$ light intensity.
Rocha Andrea da S.R.;Coutinho Camila M.;Braga Eugenia J.B.;Peters Jose A.;Binsfeld Pedro Canisio
Journal of Plant Biotechnology
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v.7
no.3
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pp.161-167
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2005
Brassinosteroids are steroidal plant hormones and are known to modulate physiological and cellular response in a wide range of plant species. Considerable insights has been achieved of the physiological role of brassinosteroid in Brassica species in the past few years, but their effect on direct organogenesis has not been extensively studied. In this sense, under optimal basal media and growth conditions we tested the cellular and organogenic response of 24-epibrassinolide (EBL) in a variable concentration (0.1 to $5.0\;{\mu}M$) and Zeatin (Z) (1.0 to $100\;{\mu}M$) and their synergic effect on hypocotyl explants of cauliflower and broccoli. The isolated EBL accelerated cell elongation and promotes direct organogenesis. One micromolar EBL + $10\;{\mu}M$ of Z was the most efficient combination for cell elongation, cell differentiation as well as for organogenesis. A suppressing effect on root induction was confirmed for all the tested hormone levels. The general results indicate a synergic effect of EBL-Z and EBL potentates Zeatin activity, at least in certain tissues. Besides de genetic factors, we can speculate that the natural hormone concentration in the explants might affect the responses by application of exogenous growth regulators. Experiments with new plant growth regulators, like brassinolide, are important aiming to maximize or accelerate plant regeneration for in vitro multiplication or for genetic transformation.
Lee, Ho Joon;Sung Jong Kim;Seon Ho Kim;Se Young Kim
The Korean Journal of Ecology
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v.9
no.1
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pp.19-24
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1986
Effects of temperature, pH, light-and-dark and degree of oxygen supply on germination of Papaver somniferum L. seeds were investigated. The optimum temperature of the germination was 2$0^{\circ}C$, but the germination was decreased as temperatures changed to the upper and lower. The largest elongation of both radicle and hypocotyl also occurred at 2$0^{\circ}C$. The best germination occurred at pH 7 but this decreased suddenly the above and below of that pH value. Although no effect of light-and-dark on the germination was, this was restricted under limited. oxyten supply in terms of underwater germination as compared with abovewater one.
An Arabidopsis hy4 mutant that is specifically impaired in its ability to undergo blue light dependent photomorphogenesis was used to identify cryptochrome 1 signaling-related components. Proteomic analysis revealed about 205 differentially expressed protein spots in the blue light-irradiated hy4 mutant compared to the wild-type. The proteins corresponding to 28 up-regulated and 33 down-regulated spots were identified. Obvious morphological changes in the hy4 mutant were closely related to the expression of various transcription factors. Our findings suggest that blue light signals may be involved in many cellular processes including disease resistance and stress responses.
Plants are able to recognize even small changes in surrounding temperatures to optimize their growth and development. At warm temperatures, plants exhibit diverse architectural adjustments, including hypocotyl and petiole elongation, leaf hyponasty, and reduced stomatal density. However, it was previously unknown how such warm temperatures affected the early stages of seedling development. In our recent study, we demonstrated that the RNA-binding protein, FCA, is critical for sustaining chlorophyll biosynthesis during early seedling development, which is a prerequisite for autotrophic transition at warm temperatures. FCA plays a dual role in this thermal response. It inhibits the rapid degradation of protochlorophyllide oxidoreductases (PORs) that mediate chlorophyll biosynthesis. In addition, it induces the expression of POR genes at the chromatin level, which contributes to maintaining functional enzyme levels. Our findings provide molecular basis for the thermal adaptation of chlorophyll biosynthesis during the early stages of seedling development in nature.
Several experiments were conducted to classify the variablity of field emergence rate among the major soybean(Glycine max. (L) Merril) cultivars. The results obtained are summerized as follows. The speed of emergence is highly correlated with diameter of hypocotyl. As increasing the seed depth, emergence percentage of small seed is higher than that of large seed, and emergence of large seed at seeding depth 5cm is higher than that of small seed, at seeding depth 7cm. Emergence percentage in clay, clay : sand :(1 : 1), sand : vermiculite(1 : 1), clay : (1 : 1), sand, vermiculite are 65, 80, 84, 89, 90 and 91%, respectively. As the soil water potential was decreasing from-0.1 to-0.5 bar, emergence percentage is increasing. The highest emergence percentage was shown at -0.5 bar, and the lowest emergence percentage at -0.7 bar.
By screening a cDNA library of auxin-treated mung bean (Vigna radiata L.) hypocotyls, we have isolated two full-length cDNA clones, pVR-ACS6 and pVR-ACS7, for 1-aminocyclopropane-1-carboxylate (ACC) synthase, the rate-limiting enzyme in the ethylene biosynthetic pathway. While PVR-ACS6 corresponds to the previously identified PCR fragment pMBA1, pVR-ACS7 is a new cDNA clone. A comparison of deduced amino acid sequences among auxin-induced ACC synthases reveal that these enzymes share a high degree of homology (65-75%) to VR-ACS6 and VR-ACS7 polypeptides, but only about 50% to VR-ACS1 polypeptide. ACS6 and ACS7 are specifically induced by auxin, while ACS1 is induced by cycloheximide, and to lesser extent by excision and auxin treatment. Results from nuclear run-on transcription assay and RNA gel blot studies revealed that all three genes were transcriptionally active displaying unique patterns of induction by IAA and various hormones in etiolated hypocotyls. Particularly, 24-epibrassinolide (BR), an active brassinosteroid, specifically enhanced the expression of VR-ACS7 by distinct temporal induction mechanism compared to that of IAA. In addition, BR synergistically increased the IAA-induced VR-ACS6 and VR-ACS7 transcript levels, while it effectively abolished both the IAA- and kinetin-induced accumulation of VR-ACS1 mRNA. In light-grown plants, VR-ACS1 was induced by IAA in roots, whereas W-ACS6 in epicotyls. IAA- and BR-treatments were not able to increase the VR-ACS7 transcript in the light-grown tissues. These results indicate that the expression of ACC synthase multigene family is regulated by complex hormonal and developmental networks in a gene- and tissue-specific manner in mung bean plants. The VR-ACS7 gene was isolated, and chimeric fusion between the 2.4 kb 5'-upstream region and the $\beta$-glucuronidase (GUS) reporter gene was constructed and introduced into Nicotiana tobacum. Analysis of transgenic tobacco plants revealed the VR-ACS7 promoter-driven GUS activity at a highly localized region of the hypocotyl-root junction of control seedlings, while a marked induction of GUS activity was detected only in the hypocotyl region of the IAA-treated transgenic seedlings where rapid cell elongation occurs. Although there was a modest synergistic effect of BR on the IAA-induced GUS activity, BR alone failed to increase the GUS activity, suggesting that induction of VR-ACS7 occurs via separate signaling pathways in response to IAA and BR.
Embryogenic callus was selected from callus induced from hypocotyl segment cultures of Daucus carota seedlings on MS basal medium supplemented with 1.0 mg/L 2,4-D. Cell clumps prepared from the embryogenic callus were transferred to MS medium without 2,4-D for somatic embryo development. Cotyledonary abnormalities were frequently observed on somatic embryos developed after the incubation of cell clumps in MS basal medium with 1.0 mg/L 2,4-D for one week and then subculture in the same medium but without 2.4-D for two weeks. The percentage of abnormalities was as follows: 5% one cotyledon, 21% three cotyledons, 6% four cotyledons, 5% five cotyledons, 0.2% six cotyledons and 1% trumpet-like cotyledons. On the other hand, the normal somatic embryo with two cotyledons appeared at 63%. The germination rate of somatic embryos was higher in two cotyledon somatic embryos than in multicotyledonary embryos. Trumpet-like somatic embryos did not germinate normally showing limited elongation and enlargement of roots and cotyledons without shoot development. From anatomical examination circular procambium in the root of somatic embryo began to branch around the middle regions of the hypocotyl which extended into the cotyledons through the cotyledonary nodes and the number of branched procambial strands in hypocotyl was equal to the number of cotyledons. Monocotyledonous somatic embryo always had larger cotyledon than that of somatic embryos with multicotyledons and had horseshoe-like cotyledons where the procambium was of the same structure.ucture.
Phytochrome A (phyA) and phytochrome B (phyB) perceive light and adapt to fluctuating circumstances by different manners in terms of effective wavelengths, required fluence and photoreversibility. Action spectra for induction of seed germination and inhibition of hypocotyl elongation using phytochrome mutants of Arabidopsis showed major difference. PhyA is the principal photoreceptor for the very low fluence responses and the far-red light-induced high irradiance responses, while phyB controls low fluence response in a red/far-red reversible mode. The structural requirement of their bilin chromophores for photosensory specificity of phyA and phyB was investigated by reconstituting holophytochromes through feeding various synthetic bilins to the following chromophore-deficient mutants: hy1, hyl/phyA and hyl/phyB mutants of Arabidopsis. We found that the vinyl side-chain of the D-ring in phytochromobilin interacts with phyA apoprotein. This interaction plays a direct role in mediating the specific photosensory function of phyA. The ethyl side-chain of the D-ring in phycocyanobilin fails to interact with phyA apoprotein, therefore, phyA specific photosensory function is not observed. In contrast, both phytochromobilin and phycocyanobilin interact with phyB apoprotein and induce phyB specific photosensory functions. Structural requirements of the apoproteins and the chromophores for the specific photoperception of phyA and phyB are discussed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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