In this work, the hydration process and cytotoxicity of lab-synthesized experimental Portland cements (EPCs) were investigated for dental applications. For this purpose, EPCs were prepared using laboratory-synthesized clinker constituents, tricalcium silicate (C3S), dicalcium silicate (C2S), and tricalcium aluminate (C3A). C-A was prepared by the Pechini method, whereas C3S and C2S were synthesized by solid-state reactions. The phase compositions were characterized by X-ray diffraction (XRD) analysis, and the hydration process of the individual constituents and their combinations, with and without the addition of gypsum, was investigated by electrochemical impedance spectroscopy (EIS). Furthermore, four EPC compositions were prepared using the lab-synthesized C-A, C3S, and C2S, and their hydration processes were examined by EIS, and their cytotoxicity to HPC and HIPC cells were tested by performing an XTT assay. None of the EPCs exhibited any significant cytotoxicity for 7 days, and no significant difference was observed in the cell viabilities of ProRoot MTA and EPCs. The results indicated that all the EPCs are sufficiently biocompatible with human dental pulp cells and can be potential substitutes for commercial dental cements.
Hokmabad, Vahideh Raeisdasteh;Davaran, Soodabeh;Aghazadeh, Marziyeh;Alizadeh, Effat;Salehi, Roya;Ramazani, Ali
Tissue Engineering and Regenerative Medicine
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v.15
no.6
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pp.735-750
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2018
BACKGROUND: The major challenge of tissue engineering is to develop constructions with suitable properties which would mimic the natural extracellular matrix to induce the proliferation and differentiation of cells. Poly(${\varepsilon}$-caprolactone)-poly(ethylene glycol)-poly(${\varepsilon}$-caprolactone) (PCL-PEG-PCL, PCEC), chitosan (CS), nano-silica ($n-SiO_2$) and nano-hydroxyapatite (n-HA) are biomaterials successfully applied for the preparation of 3D structures appropriate for tissue engineering. METHODS: We evaluated the effect of n-HA and $n-SiO_2$ incorporated PCEC-CS nanofibers on physical properties and osteogenic differentiation of human dental pulp stem cells (hDPSCs). Fourier transform infrared spectroscopy, field emission scanning electron microscope, transmission electron microscope, thermogravimetric analysis, contact angle and mechanical test were applied to evaluate the physicochemical properties of nanofibers. Cell adhesion and proliferation of hDPSCs and their osteoblastic differentiation on nanofibers were assessed using MTT assay, DAPI staining, alizarin red S staining, and QRT-PCR assay. RESULTS: All the samples demonstrated bead-less morphologies with an average diameter in the range of 190-260 nm. The mechanical test studies showed that scaffolds incorporated with n-HA had a higher tensile strength than ones incorporated with $n-SiO_2$. While the hydrophilicity of $n-SiO_2$ incorporated PCEC-CS nanofibers was higher than that of samples enriched with n-HA. Cell adhesion and proliferation studies showed that n-HA incorporated nanofibers were slightly superior to $n-SiO_2$ incorporated ones. Alizarin red S staining and QRT-PCR analysis confirmed the osteogenic differentiation of hDPSCs on PCEC-CS nanofibers incorporated with n-HA and $n-SiO_2$. CONCLUSION: Compared to other groups, PCEC-CS nanofibers incorporated with 15 wt% n-HA were able to support more cell adhesion and differentiation, thus are better candidates for bone tissue engineering applications.
Background and Objectives: Regenerative endodontic procedures (REPs) are a research hotspot in the endodontic field. One of the biggest problems of REPs is that it is difficult to realize regeneration of pulp-dentin complex and functional reconstruction. The reason is still not clear. We hypothesize that the migration may be different in different dental stem cells. Periodontal ligament stem cells (PDLSCs) may migrate faster than stem cells of apical papilla (SCAPs), differentiating into cementum-like tissue, bone-like tissue and periodontal ligament-like tissue and, finally affecting the outcomes of REPs. Hence, this study aimed to explore the mechanism that regulates the migration of PDLSCs. Methods and Results: After isolating and culturing PDLSCs and SCAPs from human third molars, we compared the migration of PDLSCs and SCAPs. Then we investigated the role of SDF-1𝛼-CXCR4/CXCR7 axis in PDLSC migration. We further investigated the impact of Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) lipopolysaccharide (LPS) on PDLSC migration and the potential mechanism. PDLSCs showed better migration under both noninflammatory and inflammatory conditions than SCAPs. SDF-1𝛼 can promote the migration of PDLSCs by elevating the expression of CXCR4 and CXCR7, increasing the interaction between them, promoting expression of 𝛽-arrestin1 and activating the ERK signaling pathway. P. gingivalis LPS can promote the migration of PDLSCs toward SDF-1𝛼 through increasing the expression of CXCR4 via the NF-𝜅B signaling pathway, promoting the expression of 𝛽-arrestin1, and activating the ERK signaling pathway. Conclusions: This study helped elucidate the potential reason for the difficulty in forming pulp-dentin complex.
Tae Gyeom Kim;Jongsoo Kim;Joonhaeng Lee;Jisun Shin;Mi Ran Han;Jongbin Kim;Yujin Kim;Jae Hee Park
Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.51
no.2
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pp.149-164
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2024
This study compared the solubility, water absorption, dimensional stability, release of various ions (hydroxyl, calcium, sulfur, strontium, and silicon), and cytotoxicity of light-cured resin-modified pulp-capping materials. Resin-modified calcium hydroxide (Ultra-blendTM plus, UBP), light-cured resin-modified calcium silicate (TheraCal LCTM, TLC), and dual-cure resin-modified calcium silicate (TheraCal PTTM, TPT) were used. Each material was polymerized; solubility, 24-hour water absorption, and 30- day dimensional stability experiments were conducted to test its physical properties. Solubility was assessed according to the ISO 6876 standard, and 24 hours of water absorption, 30 days of dimensional stability were assessed by referring to the previous protocol respectively. Eluates at 3 and 24 hours and on 7, 14, and 28 days were analyzed according to the ISO 10993-12 standard. And the pH, Ion-releasing ability, cell proliferation rate, and cell viability were assessed using the eluates to evaluate biochemical characteristics. pH was measured with a pH meter and Ion-releasing ability was assessed using inductively coupled plasma atomic emission spectrometry (ICP-AES). Cell proliferation rate and cell viability were assessed using human dental pulp cells (hDPCs). The former was assessed by an absorbance assay using the CCK-8 solution, and the latter was assessed by Live and Dead staining. TPT exhibited lower solubility and water absorption than TLC. UBP and TPT demonstrated higher stability than TLC. The release of sulfur, strontium, calcium, and hydroxyl ions was higher for TLC and TPT than for UBP. The 28-day release of hydroxyl and silicon ions was similar for TLC and TPT. TLC alone exhibited a lower cell proliferation rate compared to the control group at a dilution ratio of 1 : 2 in cell proliferation and dead cells from Live and Dead assay evaluation. Thus, when using light-cure resin-modified pulp-capping materials, calcium silicate-based materials can be considered alternatives to calcium hydroxide-based materials. Moreover, when comparing physical and biochemical properties, TPT could be prioritized over TLC as the first choice.
본 연구는 치수 염증 시 IL-8과 MCP-1 분비에서 neuropeptide의 역할에 대해 관찰하고자 발거된 건전한 치아를 수직 파절시켜 치수조직을 채취하여 배양된 치수세포 및 혈관내피세포(ECV 304세포)를 각기 다른 농도의 Substance P(SP)로 12시간 자극하였고, 24시간 동안 4시간 간격으로 시간대별로 자극하였으며, 또 치수세포를 Calcitonin gene-related peptide (CGRP)로 12시간 자극하였다. 이들 세포를 SP길항제 (Spantide)로 15분간 차단한 후 SP로 12시간 재 자극하였으며, SP와 CGRP혼합액을 12시간 자극하였다. 상기의 실험 후 부유물로 ELISA를 시행하여 IL-8과 MCP-1의 분비 량을 측정하였다. 치수세포는 SP로 자극 시 IL-8이 현저히 증가한 반면, CGRP는 효과가 없었으며, SP와 CGRP를 혼합자극 시 시너지 효과 또한 없었고, Spantide는 치수세포의 IL-8과 MCP-1의 분비를 차단시켰다. 치수세포를 SP로 24시간 동안 4시간 간격으로 자극 시 8시간 후 최대의 IL-8은 분비량 나타내었으며, 8시간과 12시간 사이에서 최대의 MCP-1 분비량을 나타내었다. ECV 304세포를 SP로 자극 시 IL-8과 MCP-1 분비량이 미약하게 증가하였으며, Spantide는 ECV 304세포의 IL-8과 MCP-1 분비를 억제시켰다.
Gabriela Leite de Souza ;Camilla Christian Gomes Moura ;Anielle Christine Almeida Silva ;Juliane Zacour Marinho;Thaynara Rodrigues Silva ;Noelio Oliveira Dantas;Jessica Fernanda Sena Bonvicini ;Ana Paula Turrioni
Restorative Dentistry and Endodontics
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v.45
no.4
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pp.54.1-54.16
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2020
Objectives: This study aimed to synthesize nanocrystals (NCs) of zinc oxide (ZnO) and calcium ion (Ca2+)-doped ZnO with different percentages of calcium oxide (CaO), to evaluate cytotoxicity and to assess the effects of the most promising NCs on cytotoxicity depending on lipopolysaccharide (LPS) stimulation. Materials and Methods: Nanomaterials were synthesized (ZnO and ZnO:xCa, x = 0.7; 1.0; 5.0; 9.0) and characterized using X-ray diffractometry, scanning electron microscopy, and methylene blue degradation. SAOS-2 and RAW 264.7 were treated with NCs, and evaluated for viability using the MTT assay. NCs with lower cytotoxicity were maintained in contact with LPS-stimulated (+LPS) and nonstimulated (-LPS) human dental pulp cells (hDPCs). Cell viability, nitric oxide (NO), and reactive oxygen species (ROS) production were evaluated. Cells kept in culture medium or LPS served as negative and positive controls, respectively. One-way analysis of variance and the Dunnett test (α = 0.05) were used for statistical testing. Results: ZnO:0.7Ca and ZnO:1.0Ca at 10 ㎍/mL were not cytotoxic to SAOS-2 and RAW 264.7. +LPS and -LPS hDPCs treated with ZnO, ZnO:0.7Ca, and ZnO:1.0Ca presented similar NO production to negative control (p > 0.05) and lower production compared to positive control (p < 0.05). All NCs showed reduced ROS production compared with the positive control group both in +LPS and -LPS cells (p < 0.05). Conclusions: NCs were successfully synthesized. ZnO, ZnO:0.7Ca and ZnO:1.0Ca presented the highest percentages of cell viability, decreased ROS and NO production in +LPS cells, and maintenance of NO production at basal levels.
Kim, Jong-Myung;Yu, Ji-Min;Bae, Yong-Chan;Jung, Jin-Sup
Journal of Life Science
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v.21
no.5
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pp.631-646
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2011
Mesenchymal stem cells (MSC) are multipotent and can be isolated from diverse human tissues including bone marrow, fat, placenta, dental pulp, synovium, tonsil, and the thymus. They function as regulators of tissue homeostasis. Because of their various advantages such as plasticity, easy isolation and manipulation, chemotaxis to cancer, and immune regulatory function, MSCs have been considered to be a potent cell source for regenerative medicine, cancer treatment and other cell based therapy such as GVHD. However, relating to its supportive feature for surrounding cell and tissue, it has been frequently reported that MSCs accelerate tumor growth by modulating cancer microenvironment through promoting angiogenesis, secreting growth factors, and suppressing anti-tumorigenic immune reaction. Thus, clinical application of MSCs has been limited. To understand the underlying mechanism which modulates MSCs to function as tumor supportive cells, we co-cultured human adipose tissue derived mesenchymal stem cells (ASC) with cancer cell lines H460 and U87MG. Then, expression data of ASCs co-cultured with cancer cells and cultured alone were obtained via microarray. Comparative expression analysis was carried out using DAVID (Database for Annotation, Visualization and Integrated Discovery) and PANTHER (Protein ANalysis THrough Evolutionary Relationships) in divers aspects including biological process, molecular function, cellular component, protein class, disease, tissue expression, and signal pathway. We found that cancer cells alter the expression profile of MSCs to cancer associated fibroblast like cells by modulating its energy metabolism, stemness, cell structure components, and paracrine effect in a variety of levels. These findings will improve the clinical efficacy and safety of MSCs based cell therapy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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