We used cDNA microarrays to monitor the transcriptome of ozone stress-regulated genes (ORGs) in two pepper cultivars [Capsicum annuum cv. Dabotop (ozone-sensitive) and Capsicum annuum cv. Buchon (ozone-tolerant)]. Ozone stress up- or down-regulated 180 genes more than three-fold. Transcripts of 84 of these ORGs increased, transcripts of 88 others diminished, and those of eight either accumulated or diminished at different time points in the two cultivars or changed in only one of the cultivars. 67% (120) of the ORGs were regulated differently in ozone-sensitive and ozone-tolerant peppers, most being specifically up-regulated in the ozone-sensitive cultivar. Many were also represented in the plant defense transcriptome against non-host pathogen infection, and some in the transcriptomes for cold, drought, and salinity stresses.
The inhibitory effect of cell wall extracts of streptococci, have been investigated to know host-parasite relationship or pathogenesis of abscess formation. Streptococci isolated from the infected root canals were sonicated to get cell wall extracts which have been known as one of the factors of pyogenesis. Lymphocytes separated by density gradient were stimulated with phytohemagglutinin and exposed to cell wall extracts of Streptococcus sanguis, S. mitis, S. uberis, S. mutans (ATCC 10449), and S. faecalis (ATCC 19433). [$^3H$]-thymidine uptake of lymphocytes was analyzed with scintillation counter and lactate dehyrogenase (LD) activity was measured with autochemistry analyzer. S. faeealis had the strongest inhibitory effect. beginning at $100\;{\mu}g/ml$ concentration of sonic extracts. S. sanguis and S. mitis had inhibitory effect at $300\;{\mu}g/ml$, while S. uberis and S. mutans showed no inhibitory, effect on DNA syntheis even at $300\;{\mu}g/ml$. Each streptococci showed different inhibitory effect on the DNA synthesis of lymphocytes, which finding indicated wide spectrum of susceptibility of lymphocytes according to streptococcus spp. There were no significant difference of LD activities between control and each streptococcal extracts. Streptococcal sonic extracts did not affect the morphological findings or number of colonies activated lymphocytes. These finding suggested the inhibitory effect of sonic extract of streptococci to lymphocytes could be detected by DNA synthesis inhibition, not by cellular membrane damage.
Poultry products are an important source of Salmonella enterica. An effective way to reduce food poisoning due to Salmonella would be to breed chickens more resistant to infection. Unfortunately host responses to Salmonella are complex with many factors involved. To learn more about responses to Salmonella in young chickens of 2 wk old, a cDNA Microarray containing 13,319 probes was performed to compare gene expression profiles between two chicken groups under control and Salmonella infected conditions. Newly hatched chickens were orally infected with S. enterica serovar Enteritidis. Since the intestine is one of the important barriers the bacteria encounter after oral inoculation, intestine gene expression was investigated at 2 wk old. There were 588 differentially expressed genes detected, of which 276 were known genes, and of the total number 266 were up-regulated and 322 were down-regulated. Differences in gene expression between the two chicken groups were found in control as well as Salmonella infected conditions indicating a difference in the intestine development between the two chicken groups which might be linked to the difference in Salmonella susceptibility. The differential expressions of 4 genes were confirmed by quantitative real-time PCR and the results indicated that the expression changes of these genes were generally consistent with the results of GeneChips. The findings in this study have lead to the identification of novel genes and possible cellular pathways, which are host dependent.
한국식품영양과학회 2004년도 Annual Meeting and International Symposium
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pp.17-23
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2004
Not all individuals respond identically, or at times in the same direction, to dietary interventions. These inconsistencies likely arise because of diet and genomic interactions (nutrigenomics effects). A host of factors may influence the response to bioactive food components including specific polymorphisms (nutrigenetic effect), DNA methylation patterns and other epigenomic factors (nutritional epigenomic effects), capacity to induce anuo. suppress specific mRNA expression and patterns (nutritional transcriptomics), the occurrence and activity of proteins (proteomic effects), and/or the dose and temporal changes in cellular small molecular weight compounds will not only provide clues about specificity in response to food components, but assist in the identification of surrogate tissues and biomarkers that can predict a response. While this 'discovery' phase is critical for defining mechanisms and targets, and thus those who will benefit most from intervention, its true usefulness depends on moving this understanding into 'development' (interventions for better prevention, detection, diagnosis, and treatment) and a 'delivery' phase where information is provided to those most in need. It is incumbent on those involved with food and nutrition to embrace the 'omics' that relate to nutrition when considering not only the nutritional value of foods and their food components, but also when addressing acceptability and safety. The future of 'Nutrigenomics and Health Promotion' depends on the ability of the scientific community to identity appropriate biomarkers and susceptibility variants, effective communications about the merits of such undertakings with the health care community and with consumers, and doing all of this within a responsible bioethical framework.
Incompatible plant-pathogen interactions result in the rapid cell death response known as hypersensitive response (HR) and activation of host defense-related genes. To understand the molecular and cellular mechanism controlling defense response better, several approaches including isolation and characterization of novel genes, promoter analysis of those genes, protein-protein interaction analysis and reverse genetic approach etc. By using the yeast two-hybrid system a clone named Tsipl, Tsil -interacting protein 1, was isolated whose translation product apparently interacted with Tsil, an EREBP/AP2 type DNA binding protein. RNA gel blot analysis showed that the expression of Tsipl was increased by treatment with NaCl, ethylene, salicylic acid, or gibberellic acid. Transient expression analysis using a Tsipl::smGFP fusion gene in Arabidopsis protoplasts indicated that the Tsipl protein was targeted to the outer surface of chloroplasts. The targeted Tsipl::smGFP proteins were diffused to the cytoplasm of protoplasts in the presence of salicylic acid (SA) The PEG-mediated co-transfection analysis showed that Tsipl could interact with Tsil in the nucleus. These results suggest that Tsipl-Tsil interaction might serve to regulate defense-related gene expression. Basically the useful promoters are valuable tools for effective control of gene expression related to various developmental and environmental condition.(중략)
Mitchell, Robert J.;Lee, Sung-Kuk;Kim, Tae-Sung;Ghim, Cheol-Min
BMB Reports
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제44권1호
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pp.1-10
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2011
Inter-cellular communication via diffusible small molecules is a defining character not only of multicellular forms of life but also of single-celled organisms. A large number of bacterial genes are regulated by the change of chemical milieu mediated by the local population density of its own species or others. The cell density-dependent "autoinducer" molecules regulate the expression of those genes involved in genetic competence, biofilm formation and persistence, virulence, sporulation, bioluminescence, antibiotic production, and many others. Recent innovations in recombinant DNA technology and micro-/nano-fluidics systems render the genetic circuitry responsible for cell-to-cell communication feasible to and malleable via synthetic biological approaches. Here we review the current understanding of the molecular biology of bacterial intercellular communication and the novel experimental protocols and platforms used to investigate this phenomenon. A particular emphasis is given to the genetic regulatory circuits that provide the standard building blocks which constitute the syntax of the biochemical communication network. Thus, this review gives focus to the engineering principles necessary for rewiring bacterial chemo-communication for various applications, ranging from population-level gene expression control to the study of host-pathogen interactions.
Background: Hepatitis C virus(HCV), a family of Flaviviridae, has a host cell-derived envelope containing a positive-stranded RNA genome, and has been known as the maj or etiological agent for chronic hepatitis, hepatic cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. There remains a need to dissect a molecular mechanism of pathogenesis for the development of therapeutic and effective preventive measure for HCV. Identification of cellular receptor is of central importance not only to understand the viral pathogenesis, but also to exploit strategies for prevention of HCV. This study was aimed at identifying peptide mimotopes inhibiting the binding of E2 protein of HCV to MOLT-4 cell. Methods: In this study, phage peptide library displaying a random peptides consisting of 7 or 12 random peptides was employed in order to pan against E2 protein. Free HCV particles were separated from the immune complex forms by immunoprecipitation using anti-human IgG antibody, and used for HCV-capture ELISA. To identify the peptides inhibiting E2-binding to MOLT-4 cells, E2 protein was subj ect to bind to MOLT-4 cells under the competition with phage peptides. Results: Several phage peptides were selected for their specific binding to E2 protein, which showed the conserved sequence of SHFWRAP from 3 different peptide sequences. They were also able to recognize the HCV particles in the sera of HCV patients captured by monoclonal antibody against E2 protein. Two of them, showing peptide sequence of HLGPWMSHWFQR and WAPPLERSSLFY respectively, were revealed to inhibit the binding of E2 protein to MOLT-4 cell efficiently in dose dependent mode. However, few membrane-associated receptor candidates were seen using Fasta3 programe for homology search with these peptides. Conclusion: Phage peptides containing HLGPWMSHWFQR and WAPPLERSSLFY respectively, showed the inhibition of E2-binding to MOLT-4 cells. However, they did not reveal any homologues to cellular receptors from GenBank database. In further study, cellular receptor could be identified through the screening of cDNA library from MOLT-4 or hepatocytes using antibodies against these peptide mimotopes.
Hur, Jingyung;Choi, Eunseok;Buckley, Kenneth J.;Lee, Sukchan;Davis, Keith R.
Molecules and Cells
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제26권2호
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pp.131-139
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2008
Expression of the seven open reading frames (ORFs) of single-stranded DNA Curtoviruses such as Beet curly top virus (BCTV) and Beet severe curly top virus (BSCTV) is driven by a bi-directional promoter. To investigate this bidirectional promoter activity with respect to viral late gene expression, transgenic Arabidopsis plants expressing a GUS reporter gene under the control of either the BCTV or BSCTV bi-directional promoter were constructed. Transgenic plants harboring constructs showed higher expression levels when the promoter of the less virulent BCTV was used than when the promoter of the more virulent BSCTV was used. In transgenic seedlings, the reporter gene constructs were expressed primarily in actively dividing tissues such as root tips and apical meristems. As the transgenic plants matured, reporter gene expression diminished but viral infection of mature transgenic plants restored reporter gene expression, particularly in transgenic plants containing BCTV virion-sense gene promoter constructs. A 30 base pair conserved late element (CLE) motif was identified that was present three times in tandem in the BCTV promoter and once in that of BSCTV. Progressive deletion of these repeats from the BCTV promoter resulted in decreased reporter gene expression, but BSCTV promoters in which one or two extra copies of this motif were inserted did not exhibit increased late gene promoter activity. These results demonstrate that Curtovirus late gene expression by virion-sense promoters depends on the developmental stage of the host plant as well as on the number of CLE motifs present in the promoter.
Sahin-Cevik, Mehtap;Sivri, Emine Dogus;Cevik, Bayram
The Plant Pathology Journal
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제35권3호
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pp.257-273
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2019
Tomato (Solanum lycopersicum) is one of the most widely grown and economically important vegetable crops in the world. Tomato chlorosis virus (ToCV) is one of the recently emerged viruses of tomato distributed worldwide. ToCV-tomato interaction was investigated at the molecular level for determining changes in the expression of tomato genes in response to ToCV infection in this study. A cDNA library enriched with genes induced in response to ToCV infection were constructed and 240 cDNAs were sequenced from this library. The macroarray analysis of 108 cDNAs revealed that the expression of 92 non-redundant tomato genes was induced by 1.5-fold or greater in response to ToCV infection. The majority of ToCV-induced genes identified in this study were associated with a variety of cellular functions including transcription, defense and defense signaling, metabolism, energy, transport facilitation, protein synthesis and fate and cellular biogenesis. Twenty ToCV-induced genes from different functional groups were selected and induction of 19 of these genes in response to ToCV infection was validated by RT-qPCR assay. Finally, the expression of 6 selected genes was analyzed in different stages of ToCV infection from 0 to 45 dpi. While the expression of three of these genes was only induced by ToCV infection, others were induced both by ToCV infection and wounding. The result showed that ToCV induced the basic defense response and activated the defense signaling in tomato plants at different stages of the infection. Functions of these defense related genes and their potential roles in disease development and resistance to ToCV are also discussed.
By a cDNA array representing 2308 signal transduction related genes, we studied the expression profiles of HeLa cells stably transfected by Hepatitis C virus nonstructural protein 4B (HCV-NS4B). The alterations of the expression of four genes were confirmed by real-time quantitative RT-PCR; and the aldo-keto reductase family 1, member C1 (AKR1C1) enzyme activity was detected in HCV-NS4B transiently transfected HeLa cells and Huh-7, a human hepatoma cell line. Of the 2,308 genes we examined, 34 were up-regulated and 56 were down-regulated. These 90 genes involved oncogenes, tumor suppressors, cell receptors, complements, adhesions, transcription and translation, cytoskeletion and cellular stress. The expression profiling suggested that multiple regulatory pathways were affected by HCV-NS4B directly or indirectly. And since these genes are related to carcinogenesis, host defense system and cell homeostatic mechanism, we can conclude that HCV-NS4B could play some important roles in the pathogenesis mechanism of HCV.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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