• 생명과학회지
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• 제18권9호
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• pp.1219-1224
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• 2008

Neural crest는 신경계의 발생과정에서 생긴 특정화된 외배엽으로서 말초신경계(peripheral nervous system)의 모든 sensory cells과 fibers, 자율신경계의 대부분의 peripheral cells, unipolar spinal ganglion cell, cranial sensory ganglia, peripheral nerve의 neurolemmal sheath cells, ganglia의 capsule cells, sympathetic ganglia, chromaffin cells, pigment cell 등이 분화한다. Fish의 경우는 melanin을 가지고 있는 melanophores, yellow pigment를 가지고 있는 xanthopores, reflecting platelets를 가지고 있는 iridophores등 3가지의 pigment-producing cell을 가지고 있다. 다양한 pigement들의 deposition, distribution에 의해 Fish와 amphibian에서 볼 수 있는 수많은 color와 pattern이 만들어지게 된다. Embryonic neural crest가 patterning을 연구하기에 아주 좋은 모델임에도 불구하고, choromatophores의 cell-signaling mechanism에 관한 연구는 거의 없는 실정이다. 본 연구에서는 melanosomes의 melanocyt로의 이동기작과 이들의 dentiritic processe를 밝히기 밝히기 위해 phosphorylaion assay와 투과형 전자 현미경(transmission electron microscope)등을 이용한 다양한 실험들을 토대로, Lithium에 의해 유도되는 morphological alteration에 IP cell signaling pathway에 의해 조절되는 단백질의 하나인 55-kDa단백질의 인산화가 중요한 역할을 함을 밝혔다.

• 생명과학회지
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• 제14권5호
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• pp.874-881
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• 2004

혈관 신생은 암의 성장 및 전이뿐만 아니라 염증, 관절염, 건성, 동맥경화 등의 병적인 진행에 주요한 역할을 하며, 혈관신생 억제를 통한 암의 치료를 시도하는 연구들이 활발하게 진행되고 있다. 혈관 신생 시 내피세포의 증식, 이동을 유도하는 활성화 과정이 필수적으로 일어나는 것으로 알려져 있다 본 연구에서는 in vitro에서 내피세포를 배양하여, 각종 growth factor가 풍부한 배지에서 활성화 시켰을 때, 그렇지 않는 세포들과의 유전자 발현 형태를 비교 조사하였다. HUVEC을 70∼80% cofluency로 배양시킨 후에 endothelial cell growth supplement (ECCS), 20% fetal bovine serum, heparin이 첨가된 Ml99 배지에서 13 시간 활성화시킨 세포(AHUVEC)와 대조군 세포(RHUVEC)로부터 분리한 total RNA로부터 CDNA를 제작하였고, 이것을 18,864 개의 유전자가 올려져있는 인간 올리고 칩과 hybridization 반응을 시켰다. 반응된 유전자를 이용하여 random clustering분석을 실시한 결과, 활성화 시켰던 HUVEC과 그렇지 않은 HUVEC으로 dendrogram 상에서 두개의 subgroup으로 나뉘어 지는 것을 확인할 수 있었다. 최소 2배 이상 발현 변화가 있는 유전자 122종이 활성화 시켰던 HUVEC으로부터 추출되었다. 이중에서 기능이 알려진 32 개의 유전자는 활성화시킨 HUVEC에서 발현이 증가하였고, 38 개의 유전자 발현은 감소하였다. 흥미롭게도 세포 증식과 이동, 염증, 면역반응에 관련한 유전자의 발현이 증가된 반면에 세포 흡착과 혈관 조직과 기능에 관련한 유전자의 발현이 감소된 것이 관찰되었다. 예상외로 규명이 잘된 혈관신생 인자와 관련한 유전자들의 발현에는 크기 차이를 보이지 않았으나, Eph-B4의 발현은 약 4 배 감소된 것으로 관찰되었다 또한, 2배 이상 발현에 차이를 보이고 기능이 알려져 있지 않은 유전자 52종이 발견되었다. 따라서, 이러한 연구 결과로부터 새로운 혈관 표적 물질 개발에 대한 기회가 제공될 수 있을 것이라 사료된다.

• 한국수정란이식학회:학술대회논문집
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• 한국수정란이식학회 2002년도 국제심포지엄
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• pp.102-102
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• 2002

Heparin-bindin epidermal growth factor (HB-EGF) is one of the EGF family to be expressed at the time of implantation in the mouse uterus. Although HB-EGF has been shown to stimulate the development of embryo and uterus in the mouse, its correlation between cell adhesion molecules remains undefined. Integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$, one of the cell adhesion molecules, is an important mediator of cell-substratum and cell-cell adhesion in implantation. In the present studies, we investigated the effects of HB-EGF on the embryonic development, initiation of implantation and expression of integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ in in vitro culture, blocking of HB-EGF, RT-PCR and immunofluores cence analysis. The results showed that HB-EGF significantly improved the developmental rate of hatched embryos (24.1%, p<0.01) and outgrowth embryos (42.5%, p<0.01). On the other hand, this growth factor showed no offset before the hatching embryonic stage. Analysis of RT-PCR showed that HB-EGF upregulated the expression level of integrina $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ subunit genes on the preimplantation embryo and outgrowth of blastocyst (120hr and 144hr after hCG injection). Immunofluorescence analysis showed that the integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ subunits localized at the pericellular borders and cell-cell contact areas. Increase in fluorescence intensity was observed in the HB-EGF treated embryos. Intrauterine injection of an anti-HB-EGF antiserum at day 3 significantly decreased the number of implantation sites (14.4, p<0.01) and significantly increased the number of recovered embryos(6.4, p<0.05) at day 5. From these results, it imply that HB-EGF improve the embryo development and accelerated the expression of integrin $\alpha$$_{ν}$$\beta$$_3$ in the preimplantation mouse embryos.

• 한국임상수의학회지
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• 제9권2호
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• pp.373-390
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• 1992

To assay the fertilizing capacity of domestic animal spermatozoa by hamster test, semen were collected from 13 boars(Duroc. Landrace and Yorkshire) which had been proved to be fertile in the past. then, were preserved in BWW medium or in raw state at 18$^{\circ}C$ or at room temperature. The preserved semen were given each different treatment according to the experimental design and coincubated with zona-free hamster ova for 5 hours. The ova were stained by lacmoid and examined under phase contrast microscope to investigate the rates of ova bound with sperm(sperm binding). ova penetrated by sperm(penetration) and formation of a male pronucleus(pronucleus formation) and also numbers of both bound and penetrated sperm per ovum. Between BWW and TBM medium for boar sperm. no difference in the results of hamster test was obtained. The boar spermatozoa in BWW medium, BWW with caffeine, BWW with heparin, and BWW with both caffeine and heparin showed no difference in the results of hamster test. The boar spermatozoa in BWW medium containing both calcium and RSA showed considerably higher rates of sperm binding, penetration and pronucleus formation as well as higher numbers of both bound and penetrated sperm than those not containing calcium with or without BSA( p<0.01) and also the same results higher than that containing calcium without BSA( p< 0.05). The boar spermatozoa irradiated by X-ray(70 KVP, 20mA) for 3 seconds. then, maintained at 18$^{\circ}C$ for 18 hours showed considerably lower rate of sperm binding than all the other groups including the control and X-ray groups irradiated by smaller dose or maintained for shorter period(p<0.01), and also showed lower number of bound sperm than the other groups(p<0.01, p<0.05). All the control groups of both raw and diluted sperm in BWM medium showed higher rates of sperm binding, penetration and pronucleus formation as well as higher number of penetrated sperm than all the X-ray groups irradiated for 3 seconds(70KVP, 20mA) and maintained for either 3 or 18 hours (p<0.01, p<0.05). At the same time the control groups of diluted sperm showed considerably higher rates of sperm penetration and pronucleus formation than the control group of raw sperm( p<0.01). These results indicates that fertile boar sperm showed considerably lower rates In the results of hamster test, when incubated in the medium without calcium and irradiated by X-ray than when incubated in the medium with calcium and not irradiated by X-ray, respectively, to prove consequently that hamster test would be of great value in assaying the fertilizing capacity of boar spermatozoa.

• KSBB Journal
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• 제23권1호
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• pp.37-43
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• 2008

(주)녹십자는 1986년 "훽나인"을 B형 혈우병 치료제로 제조품목허가를 받아 B형 혈우병치료제 공급을 시작하였다. 또한 1991년 New York Blood Center에서 selvent/detergent 바이러스 불활화 방법을 도입하여 제조공정에 추가한 후 혈액유래 바이러스로부터 안전한 제품을 생산하여 왔다. 하지만 이 제품은 혈액응고 제2인자, 제7인자, 제10인자가 함유된 제9인자 복합체로, 정맥 혈전증과 파종성 혈관내응고병증 같은 혈전형성 부작용이 일어날 가능성이 있어, 훽나인보다 순도, 유효성, 바이러스 안전성이 우수한 제품의 개발이 필요하였다. 이를 위해 고순도 제9인자 제제인 "GreenNine VF" 제조공정을 개발하였다. GreenNine VF 제조공정은 기존의 훽나인 생산 공정에 heparin 친화성 크로마토그래피와 양이온 크로마토그래피가 추가된 공정으로, 바이러스 안전성을 증진시키기 위한 바이러스 필터 공정도 포함하고 있다. 이러한 공정에 의해서 산업적 규모로 생산된 GreenNine VF는 훽나인에 비해 순도와 바이러스 안전성이 월등히 높은 것으로 확인되었다. 또한 고순도 혈액응고 제9인자 제제인 Mononine, Octanyne, Berinin HS, Immunine STIM plus 600보다 순도가 더 높았다. Cryo-poor plasma 1,600 L를 원료로 사용했을 때 1 batch 당 250IU 분병제품 2,400병 이상, 500 IU 분병제품 1,200병 이상을 생산할 수 있었다.

• 대한한의학방제학회지
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• 제16권2호
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• pp.115-131
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• 2008

실험목적 : 빈소산은 11가지 생약으로 구성된 복합 한약 처방으로 관절염을 포함한 다양한 염증성 질환의 치료제로 사용되어 왔으나, 관절염에 대한 직접적인 효력평가는 찾아 보기 힘들다. 따라서 본 실험에서는 빈소산 추출물이 Freund's complete adjuvant (FCA)로 유발된 rat 류마티스성 관절염에 미치는 치료 효과를 dexamethasone (15mg/kg, 복강 투여) 의 효과와 비교 평가하였다. 실험방법 : 류마티스성 관절염은 FCA (10mg in 1ml paraffin oil 0.1ml/rats)를 좌측 후지에 피내 투여하여 유발하였다. 실험동물은 Wistar 랫트를 사용하였고, FCA 투여 14일 후 유사한 무릎관절 둘레를 나타내는 류마티스성 관절염 유발 rat와 정상 rat 및 실험군을 그룹당 9마리씩 나누었다. 실험동물은 100 또는 200mg/kg의 빈소산 추출물을 FCA 투여 14일 후부터 14일간 경구 투여하였으며, dexamethasone은 15mg/kg 농도로 복강 투여한 다음, 희생하여, 체중, 연골내 collagen 함량 및 chondroitin sulphate, heparin sulphate 및 hyaluronic acid와 같은 뼈내 glycosaminoglycan 함량의 변화를 각각 관찰하였다. 실험결과는 항염 효과가 이미 입증되어 있는 dexamethasone 15mg/kg 복강 투여군과 비교하였다. 결과 : FCA 투여는 현저한 체중, 연골내 collagen 함량 및 chondroitin sulphate, heparin sulphate 및 hyaluronic acid와 같은 뼈내 glycosaminoglycan 함량의 감소와 함께 유발 관절 둘레 및 조직내 prostaglandin $E_2$의 증가와 같은 전형적인 류마티스성 염증을 초래하였으나, 이러한 류마티스성 관절염 소견은 dexamethasone 및 모든 용량의 빈소산 추출물 투여에 의해 현저히 억제되었으며, 특히 빈소산 투여군에서는 투여 용량 의존적인 감소가 인정되었다. 결론 : 이상에서 빈소산 추출물은 투여 용량 의존적인 prostaglandin $E_2$ 억제를 매개하여 FCA 유발 류마티스성 관절염에 대한 치료 효과를 나타내는 것으로 관찰되었다. 따라서 새로운 관절염에 대한 치료제로서 개발 가능성이 있을 것으로 판단된다. 한편 빈소산 추출물은 주로 prostaglandin $E_2$ 억제작용에 의해 항염 효과를 나타내는 것으로 관찰되었으나, 금후 다른 작용기전에 대한 연구와 빈소산의 구성성분 중 유효 성분 규명을 위한 실험이 수행되어야 할 것으로 판단된다.

• 대한약리학회지
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• 제32권1호
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• pp.83-91
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• 1996

본 연구에서는 Hydrocortisone이 적출 흰쥐 관류 부신에서 histamine에 의한 카테콜아민 (CA) 분비작용에 대한 영향을 관찰하고자 시도하였으며, 얻어진 연구 결과는 다음과 같다. Histamine (150ug)은 부신정맥내로 주입시 현저한 CA 분비작용을 나타내었다. 이러한 histamine의 CA 분비작용은 천연 글루코콜티코이드인 hydrocortisone (30uM)이나 합성 글루코콜티코이드인 dexamethasone (30uM)을 각각 20분간 전처치한 후에 현저히 증강되었다. Hydrocortisone에 의한 histamine의 CA 분비의 증강작용은 inositol trisphosphate 수용체 억제제인 heparin (3.56U/ml)으로 천처치시 뚜렷이 억제되었으나 adenylate cyclase의 강력한 활성화제인 forskolin (0.2uM)으로 전처치시 현저히 강화되었다. 이상과 같은 실험 결과를 종합한 결과, hydrocortisone (글루코콜티코이드)은 흰쥐 적출관류 부신에서 histamine의 CA 유리작용을 증강시킬 수 있으며, 이는 부신수질 크롬친화성 세포에서 inositol phosphate 뿐만 아니라 cyclic AMP의 축적작용과 관련성이 있는것으로 사료된다.

• Childhood Kidney Diseases
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• 제18권2호
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• pp.98-105
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• 2014

목적: Nafamostat mesilate는 출혈성 경향이 있는 성인 환자에서 지속적 신대체 요법시 항응고제로 사용되고 있지만 소아에서의 경험은 잘 알려지지 않았다. 본 연구는 출혈 성향이 높은 소아에서 지속적 신대체 요법을 시행하는 경우에 항응고제로서 Nafamostat mesilate의 용량, 효과, 및 안전성에 대하여 알아보기 위해 수행하였다. 방법: 2011년 1월부터 2013년 10월까지 최소 24시간이상 지속적신대체요법을 받은 40명의 소아환자들을 대상으로 하여 의무기록을 후향적으로 분석하였다. 환자들은 출혈 위험군(그룹 1: 항응고제 사용 안함, 그룹 2: 항응고제로 Nafamostat mesilate 사용)과 출혈 위험이 없는 군(그룹 3: 항응고제로 헤파린 사용)으로 분류하였다. 결과: 40명의 환자 중에서 남아는 25명 여아는 15명 이었으며 평균 나이는 $8.2{\pm}6.6$세 이었다. 지속적신대체요법의 평균 시간은 13일 이었다. 평균 혈액 필터 수명은 그룹 1에서는 39.3시간 이었고, 그룹 3에서는 11.3시간이었다. 그룹 2에서는 Nafamostat mesilate 사용 전에는 7.5시간 이었으나 Nafamostat mesilate 사용 후에는 27.4시간으로 연장되었으며 통계학적으로 유의하였다(P=0.001). 평균 혈액 필터 수명은 Nafamostat mesilate을 사용한 그룹에서는 헤파린을 사용한 그룹보다 통계적으로 의미 있게 연장되었다(P=0.018). Nafamostat mesilate 사용한 군에서 의미있는 출혈이 동반되지는 않았다. 결론: Nafamostat mesilate은 출혈 성향이 높은 소아에서 지속적 신대체 요법을 시행하는 경우에 헤파린을 대체해서 사용될 수 있는 항응고제로 생각된다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제7권1호
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• pp.1-12
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• 1992

본 연구는 소의 난포란의 체외성숙과 체외수정에 영향을 미치는 요인을 구명하기 위하여 미숙 난포란을 채취하여 형태적 분류를 통해 우수한 란을 공시한 후 난포의 크기, 정액의 형태, 수정능득법, 혈청, 호르몬, 난포액, 난구세포등을 첨가한 TCM-199 배양액에서 배양하면서 체외성숙 및 수정율을 조사하였는 바 그 결과는 다음과 같다. 1. 소 난포란을 채취하여 배양을 통해 형태적 분류를 했을때 A형란은 61.4%, B형란은 12.1%, C형란은 19.2%, D형란은 4.2%였으며 발생중지 또는 퇴화란은 3.0%였다. 또한 A, B, C형란을 배양액에 배양했을때 난포란의 체외성숙율은 각각 89.1%, 78.0%, 52.6%였으며, 수정율은 각각 78.1%, 66.1%, 33.3%였다. 2. 소 난포의 크기를 1-2mm, 3-5mm 및 5mm이상으로 분류하여 채취한 난포란의 수는 각각 67개, 98개, 63개 였으며, 이를 TCM-199 배양액에서 배양했을때의 체외성숙 및 수정율은 각각 56.7%와 44.8%, 82.5%, 72.4%와 46.0%와 28.6%였다. 3. 소 난포란의 체외수정에 있어서 정소상체 미부정자, 희택정액 및 동결정액을 이용하여 매정하였을때 체외수정율과 분할율은 각각 63.3%, 73.3%, 70.0%와 32.7%, 37.8%, 38.3%였다. 4. 소 난포란의 체외수정에 있어서 m-KRB 처리법, HIS처리법, Ca-IA처리법, BFF처리법 및 heparin처리법으로 각각 수정능획득을 유기하였을때 체외성숙 및 분할율은 각각 53.1%, 28.1%, 33.9%와 17.7%, 50.8%와 26.2%, 48.1%와 22.8% 및 58.8%와 32.8%로서 heparin 처리법이 가장 높았다. 5. 소 난포란의 체외성숙과 수정에 있어서 각 농도의 우태아혈청과 FSH, HCG, $\beta$-estradiol을 첨가한 TCM-199배양액에서 배양했을때의 체외성숙 및 수정율은 각각 76.0-82.3%와 26.2-70.0%로서 무첨가에 비해 첨가가 높았다. 6. 발정우혈청 및 우태아혈청 5-20%를 첨가한 배양액에서 배양했을때의 체외성숙율은 각각 71.7-76.9%, 74.0-80.6%였으며 체외수정율은 51.9-58%와 26.2-30.0%로서, 체외수정율의 경우 발정우혈청의 첨가가 우태아혈청의 첨가에 비해 높았다. 7. 난포액20-30%를 첨가한 배양액에서 배양했을때의 난포란의 체외성숙율은 각각 68.0%와 64.6%, 수정율은 각각59.6%와 60.4%로서 난포액10%, 50%를 첨가한 배양액에서 배양시의 체외성숙율과 수정율에 비해 높았다. 8. 1$\times$10 6 /ml의 난구세포를 첨가한 배양액에서 배양했을때의 난포란의 체외성숙율과 수정율은 각각 76.5%와 61.7%로서 FCS 10%와 1$\times$10 4 -10 5/ml 와 1 $\times$10 8/ml난구세포를 첨가한 배양액에서 배양시의 체외성숙율과 수정율에 비해 높았다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제16권2호
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• pp.139-144
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• 2001

본 연구는 숫소 개체별, 정자의 형태, 정자의 전처리 및 난자의 투명대부착과 미부착별로 현미조작에 의해 난자의 세포질내 단일정자를 주입했을 때 웅성전핵 형성율과 체외발생율을 조사하였다. 1. 숫소 개체별 정자를 이용하여 ICSI를 하였을 때 웅성전핵 형성율은 각각 73.9∼87.0%였고 체외발생율은 33.3∼60.9%를 나타냈다. 2. 신선 및 동결정자와 미부절단 정자와 두부, 미부손상 정자를 이용하여 ICSI를 하였을 때 웅성전핵 형성율은 각각 82.0%, 78.0% 42.2%, 51.1%였고, 체외발생율은 56.0%, 42.0%, 17.8%, 22.2%로서 신선정자를 이용했을 때가 다른 처리군에 비해 높은 전핵형성율과 체외발생율을 나타냈다. 3. 정자를 heparin, BFF, His, Ca Ionophore, I + caffeine 액으로 처리후 ICSI를 하였을 때 전핵 형성율은 66.7∼82.2%였고, 체외발생율은 33.3∼60.6%로서 I + caffeine 처리법이 다른 처리군에 비해 높게 나타났다. 4. 투명대 부착 난자 및 미부착 난자로 ICSI를 하였을 때 전핵형성율은 각각 80.0%, 72.0%였고, 체외발생율은 46.0%, 36.0%로서, 토명대부착 난자가 투명대 미부착 난자에 비해 높은 웅성전핵 형성율과 체외발생율을 나타냈다.